鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵實(shí)驗(yàn)報(bào)告

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1、期過由，至大屋 分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 實(shí)驗(yàn)題目： 鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵 學(xué) 院： 專 業(yè)：食品科學(xué)與工程 班 級： 姓 名： 學(xué) 號： 同組者姓名： 一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 1 .了解分光光度法測定物質(zhì)含量的一般條件及其選定方法 2 .掌握鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的方法 3 .了解722型分光光度計(jì)的構(gòu)造和使用方法 二.實(shí)驗(yàn)原理 1 .光度法測定的條件：分光光度法測定物質(zhì)含量時(shí)應(yīng)注意的條件主要是 顯色反應(yīng)的條件和測量吸光度的條件。顯色反應(yīng)的條件有顯色劑用量、介質(zhì)的酸 度、顯色時(shí)溶液溫度、顯色時(shí)間及干擾物質(zhì)的消除方法等；測量吸光度的條件包 括應(yīng)選擇的入射光波

2、長，吸光度范圍和參比溶液等。 2 .在PH=2-9l勺條件下，F(xiàn)e2+與鄰二氮雜菲(o-ph)生成極穩(wěn)定的橘紅色配合物， 反應(yīng)式如下： 此配合物的lgK穩(wěn)=摩爾吸收系數(shù)e 510 =X104 在顯色前，首先用鹽酸羥胺把Fe2+還原成Fe3+.其反應(yīng)式如下： 2Fe3+ +2NH 2 OH- HC1 =2Fe 2+ +N 2 T +2H2 O+4H +2C1- 測定時(shí)，控制溶液酸度在PH=5E右較為適宜。酸度過高時(shí)，反應(yīng)進(jìn)行較慢；酸度 太低，則Fe 2+水解,影響顯色。 三、實(shí)驗(yàn)儀器 分光光度計(jì)、容量瓶、移液管、洗瓶 四、實(shí)驗(yàn)步驟 1 .條件實(shí)驗(yàn) (1)吸收曲線的測繪準(zhǔn)確吸取

3、 20 n g ? mL1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL于50 mL容量 瓶中，加入5海酸羥胺溶液1 mL,搖勻，加入1 mol ? L-1NaOAd簾夜5 mL和％ 鄰二氮雜菲溶液3 mL0以水稀釋至刻度，搖勻。放置 10 min,在722型分光光 度計(jì)上，用1 cm比色皿，以水為參比溶液，波長從 570 nm到430 nm為止，每 隔10 nm測定一次吸光度。如圖1所示，其最大吸收波長為510 nm,故該實(shí)驗(yàn) 選擇測定波長為510 nm。 (2)鄰二氮雜菲-亞鐵配合物的穩(wěn)定性 用上面溶液繼續(xù)進(jìn)行測定，具方法是在最大吸收波長510 nm處，每隔一定時(shí)間 測定其吸光度，及再加入顯色劑后立即測定一次吸

4、光度， 經(jīng)10、20、30、120 min 后，再各測一次吸光度。 (3)顯色劑濃度實(shí)驗(yàn) 取50 mL容量瓶7只，編號。每只容量瓶中準(zhǔn)確加入 20 ug ? mL1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL以及1mL5%k酸羥胺溶液，經(jīng)2 min后。再加入5 mL1 mol LRaOACS液，然后分別加入唳口二氮雜菲溶液、、mL、mL、mL、mL和mL, 用水稀釋至刻度，搖勻，在分光光度計(jì)上，用最大吸收波長510 nm、1 cm比色 皿，以水為參比，測定上述溶液的吸光度。 2 .鐵含量的測定 (1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取50mL容量瓶6只，編號。分別吸取20 pg ?mL1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液、mL、mL、 mL和mL于

5、5只容量瓶中，另一只容量瓶中不加標(biāo)準(zhǔn)溶液 (配制空白溶液，作參 比)。然后各加5啾酸羥胺溶液，搖勻，經(jīng)2 min后，再各加5 mL1mol ? L-1NaAc 溶液及3 mL1 g ? L-1鄰二氮雜菲溶液，以水稀釋至刻度線，搖勻。放置 10 min, 在分光光度計(jì)上，用1 cm比色皿，在510 nm處，測定各溶液的吸光度。以鐵含 量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 (2)未知液中鐵含量的測定 吸取5ml未知液代替標(biāo)準(zhǔn)溶液，其他步驟均同上測定吸光度。由未知液的 吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出5ml未知液中的鐵含量，然后以每毫升未知液中含鐵多 少微克表示結(jié)果。 五、記錄與計(jì)算 (1)吸收

6、曲線的測繪 波長/nm吸光度A 570 550 530 520 510 500 490 470 450 430 討論：從曲線可以看出，在一定范圍內(nèi)，當(dāng)波長較小時(shí)，隨波長增加吸光度增加 測定的適宜波長是510nm (2)鄰二氮雜菲亞鐵配合物的穩(wěn)定性 放置時(shí)間 t.min 0 5 10 15 20 穩(wěn)定性 福定性曲戰(zhàn) 匚年4叵國腳很 討論：從曲線可以看出，

7、配合物穩(wěn)定性較好。 (3)顯色劑用量的測定 容量瓶號 顯色劑量/mL 吸光度A 1 2 3 4 5 6 7 , 1 , 顯色和|量/nL 12 3 4 討論：當(dāng)顯色劑較小時(shí)，隨顯色劑含量增加吸光度增加， 當(dāng)加入顯色劑為吸光度 最大。所以顯色劑的適宜加入的量為 (4)標(biāo)準(zhǔn)曲線的測繪與鐵含量的測定 試液編會(huì) 標(biāo)準(zhǔn)溶液的量V/mL 總含鐵量m/ug 吸光度A 1 0 0 2 40 3 80 4 120 5 180 6 200

8、未知液 討論；由測定的未知液吸光度為通過函數(shù)關(guān)系可得鐵的含量為W 討論: 1 .再用分光光度計(jì)測量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)應(yīng)注意什么 答:再用分光光度計(jì)測量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)， 應(yīng)保持用一個(gè)比色皿測量, 這樣可以減小比色皿自身對實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的影響。 2 .如用配置已久的鹽酸羥胺溶液，對分析結(jié)果將帶來什么影響 答：鹽酸羥胺是用來將Fe3還原成Fe2的，如果配制已久，還原能力減弱，就 會(huì)使部分鐵離子得不到還原，造成分析結(jié)果偏小 3 .鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的適宜條件是什么 答：測定時(shí)，要控制 PH=曲右較好，弱酸度較高，反應(yīng)速度較慢，酸度較低， 會(huì)使二價(jià)鐵離子水解，影響顯色 4 .為什么要用鄰二氮菲顯色后再測定 答：因?yàn)樗形⒘拷M分較少，對光的吸收很小，無法測出其吸光光度，加入顯色 劑后，與被測組分形成絡(luò)合物，摩爾吸收系數(shù)較高，吸光明顯，容易測定。