《液質(zhì)聯(lián)用基礎(chǔ)知識(shí)和名詞術(shù)語(yǔ)》由會(huì)員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《液質(zhì)聯(lián)用基礎(chǔ)知識(shí)和名詞術(shù)語(yǔ)(15頁(yè)珍藏版)》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、液質(zhì)聯(lián)用基礎(chǔ)知識(shí)和名詞術(shù)語(yǔ)(LC/MS/MS),2019-08-01,什么是液質(zhì)聯(lián)用?,LC-MS/MS:是一種將液相色譜的高效分離能力與質(zhì)譜的特異、靈敏、多組分檢測(cè)能力相結(jié)合,實(shí)現(xiàn)復(fù)雜混合物更準(zhǔn)確的定量和定性分析技術(shù)。在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。,液相色譜,樣品引入,離子化,質(zhì)量分析器,檢測(cè)器,數(shù)據(jù)分析,質(zhì)譜圖,什么是質(zhì)譜分析法,質(zhì)譜分析法是先將中性分子離子化,變?yōu)闅鈶B(tài)離子混合物,并按質(zhì)荷比( m/z)分離、豐度記錄的一種分析方法; 質(zhì)譜儀是實(shí)現(xiàn)上述分離分析技術(shù),從而測(cè)定物質(zhì)的質(zhì)量與含量及其結(jié)構(gòu)的儀器。由樣品導(dǎo)入系統(tǒng)、離子源、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。 質(zhì)譜分析
2、法是一種快速,有效的分析方法,利用質(zhì)譜儀可進(jìn)行同位素分析,化合物分析,氣體成分分析以及金屬和非金屬固體樣品的超純痕量分析。,什么是質(zhì)譜(MS) mass spectrometry,質(zhì)譜圖:不同質(zhì)荷比的離子經(jīng)質(zhì)量分析器分離,然后被檢測(cè)并記錄下來(lái)的譜圖叫做質(zhì)譜圖,簡(jiǎn)稱質(zhì)譜。 質(zhì)譜圖的橫坐標(biāo)是質(zhì)荷比(m/z),縱坐標(biāo)是離子強(qiáng)度。,,原子量:一種元素的所有同位素的重量平均值 1H(氕,H),2H(氘,D),3H(氚,T) 同位素:具有相同原子序數(shù)而又具有不同的質(zhì)量數(shù)的原子叫做同位素 同位素豐度:自然界中某同位素原子所占的百分?jǐn)?shù)叫做該元素的相對(duì)豐度 質(zhì)量數(shù)=質(zhì)子+中子 原子序數(shù)=質(zhì)子數(shù),質(zhì)荷比:離子的質(zhì)
3、量與它所帶電荷的比值(m/z) 質(zhì)荷比是質(zhì)譜圖的橫坐標(biāo),是質(zhì)譜定性的基礎(chǔ)。 基峰:在譜圖中,指定質(zhì)荷比范圍內(nèi)強(qiáng)度最大的離子峰叫做基峰?;宓南鄬?duì)豐度為100% 豐度:主要用于描述離子響應(yīng)強(qiáng)度,即在某一質(zhì)譜圖中以離子響應(yīng)強(qiáng)度最大的峰為基峰,以它的強(qiáng)度為100%,其他離子峰強(qiáng)與之的比例為相對(duì)豐度,總離子流圖(Total ions current, TIC):在選定質(zhì)量范圍內(nèi),所有離子強(qiáng)度的總和對(duì)時(shí)間或掃描次數(shù)所做的圖。液質(zhì)聯(lián)用是TIC即色譜圖 質(zhì)量色譜圖(Mass chromatogram )叫提取離子色譜圖(extract ion Chromatography,XIC):制定某一質(zhì)荷比的離子強(qiáng)度
4、對(duì)時(shí)間掃描號(hào)所作的圖,是質(zhì)譜法處理數(shù)據(jù)的一種方式。,質(zhì)譜中采用的質(zhì)量單位,Da=Dalton(道爾頓) 質(zhì)量單位,等于一個(gè)碳原子(12C)質(zhì)量的十二分之一,約1.6610-24克;一克約為61023道爾頓 amu=atomic mass unit原子質(zhì)量單位 1amu=1Da,儀器的使用范圍,儀器的測(cè)試條件決定了其使用范圍 色譜條件(液相色譜條件) 質(zhì)譜條件(離子源的選擇),HPLC條件的選擇,根據(jù)化合物的類型選擇選擇流動(dòng)相的組成;(甲醇-水、乙腈-水或甲醇-乙腈-水 DMF DMSO THF) 某些化合物質(zhì)有某種流動(dòng)相體系才可以出峰 一般正離子方式用甲醇,負(fù)離子方式用乙腈 梯度的設(shè)定:梯度
5、變化太快時(shí)對(duì)離子化效率影響很大,相應(yīng)源參數(shù)也應(yīng)該改變,所以很定流動(dòng)相可以滿足要求時(shí),盡量不用梯度,尤其是定量時(shí)。 流動(dòng)相中加入甲酸、乙酸可以提高正離子離子化效率;負(fù)離子方式分析酸性化合物時(shí)可用氨水調(diào)節(jié)PH值 常用的鹽:CH3COONH4 HCOONH4 KH2PO3,色譜柱的選擇,LC的流速一般根據(jù)色譜柱的規(guī)格和電離方式來(lái)確定 APCI 0.2-2mL/min ESI 5-300 uL /min routinely (1ml/min possible),離子化方法選擇,根據(jù)樣品類型確定離子化方式 適合ESI的樣品類型:極性物質(zhì)的檢測(cè) 高極性化合物、蛋白質(zhì)、肽類、低聚糖核苷酸、胺類、季銨鹽 適合APCI的樣品類型:弱極性、中等極性小分子 通常認(rèn)為ESI有利于分析生物大分子及其它分子量大的化合物。而APCI更適合于分析極性較小的化合物,ESI譜圖示例,正離子模式 M+H+ M+Na+ M+K+ 2M+H+ M+H+CH3OH+ M+NH4+ 負(fù)離子模式 M-H- M+Cl- M+OH-,Thank you for your attantion!,