鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵-實驗報告

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1、期過由，至大屋 分析化學實驗報告 實驗題目： 鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵 學院： 專業(yè)：食品科學與工程 班級： 姓名： 學號： 同組者： 一.實驗目的 1 .了解分光光度法測定物質含量的一般條件及其選定方法 2 .掌握鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的方法 3 .了解722型分光光度計的構造和使用方法 二.實驗原理 1 .光度法測定的條件：分光光度法測定物質含量時應注意的條件主要是 顯色反應的條件和測量吸光度的條件。顯色反應的條件有顯色劑用量、介質的酸 度、顯色時溶液溫度、顯色時間及干擾物質的消除方法等；測量吸光度的條件包 括應選擇的入射光波長，吸光度范圍

2、和參比溶液等。 2 .在PH=2-9l勺條件下，Fe2+與鄰二氮雜菲〔o-ph〕生成極穩(wěn)定的橘紅色配合物，反應式如下： 此配合物的lgK穩(wěn)=21.3摩爾吸收系數e510X104 在顯色前，首先用鹽酸羥胺把Fe2+復原成Fe3+.其反應式如下： 2Fe3++2NH2OH-HC1=2Fe2++N2T+2H2O+4H+2C1- 測定時，控制溶液酸度在PH=5E右較為適宜。酸度過高時，反應進行較慢；酸度太低，則Fe2+水解,影響顯色。 三、實驗儀器 分光光度計、容量瓶、移液管、洗瓶 四、實驗步驟 1. 條件實驗 （1）吸收曲線的測繪準確吸取20ng?mL1鐵標準溶液5mL于50mL

3、容量瓶中，加入5%fc酸羥胺溶液1mL,搖勻，加入1mol?L-1NaOAC§755mL和0.1%鄰二氮雜菲溶液3mL。以水稀釋至刻度，搖勻。放置10min,在722型分光光度計上，用1cm比色皿，以水為參比溶液，波長從570nm到430nm為止，每隔10nm測定一次吸光度。如圖1所示，其最大吸收波長為510nm,故該實驗選擇測定波長為510nm。 （2）鄰二氮雜菲-亞鐵配合物的穩(wěn)定性 用上面溶液繼續(xù)進行測定，具方法是在最大吸收波長510nm處，每隔一定時間 測定其吸光度，及再加入顯色劑后立即測定一次吸光度，經10、20、30、120min后，再各測一次吸光度。 〔3〕顯色劑濃度實驗取

4、50mL容量瓶7只，編號。每只容量瓶中準確加入 20ug?mL1鐵標準溶液5mL以及1mL5%k酸羥胺溶液，經2min后。再加入5mL1mol?L-1NaOAC§液，然后分別加入0.1%鄰二氮雜菲溶液0.3mL、0.6mL、1.0mL1.5mL2.00mL3.0mL和4.0mL用水稀釋至刻度，搖勻，在分光光度計上，用最大吸收波長510nm、1cm比色皿，以水為參比，測定上述溶液的吸光度。 〔1〕標準曲線的繪制 取50mL容量瓶6只，編號。分別吸取20仙g?mL1鐵標準溶液2.0mL、4.0mL、6.0mL、8.0mL和10.0mL于5只容量瓶中，另一只容量瓶中不加標準溶 液〔配制空白溶

5、液，作參比〕。然后各加5%鹽酸羥胺溶液，搖勻，經2min后， 再各加5mL1mol?L-1NaAc溶液及3mL1g?L-1鄰二氮雜菲溶液，以水稀釋至刻度線，搖勻。放置10min,在分光光度計上，用1cm比色皿，在510nm處，測定各溶液的吸光度。以鐵含量為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。 （2）未知液中鐵含量的測定 吸取5ml未知液代替標準溶液，其他步驟均同上測定吸光度。由未知液的 吸光度在標準曲線上查出5ml未知液中的鐵含量，然后以每毫升未知液中含鐵多 少微克表示結果。 五、記錄與計算 (1)吸收曲線的測繪 波長/nm 吸光度A 570 550 530

6、 520 510 500 490 470 450 430 討論：從曲線可以看出，在一定范圍內，當波長較小時，隨波長增加吸光度增加測定的適宜波長是510nm 〔2〕鄰二氮雜菲亞鐵配合物的穩(wěn)定性 放置時間 t/min 0 5 10 15 20 穩(wěn)定性 檢定性曲戰(zhàn) 必3加5 0.39 D. 33S5 H. 389 L 3385 5 IQ 15 20 檢定性 討論：從曲線可以看出，配合物穩(wěn)定性較好。 (3)顯色劑用量的測定 容量瓶號 顯色劑量/mL 吸光度A 1 0.12

7、5 2 35 3 0.386 4 0.418 5 0.428 6 0.415 7 0.424 (4)標準曲線的測繪與鐵含量的測定 試液編會 標準溶液的量V/mL 總含鐵量m/ug 吸光度A 1 0 0 0.000 2 40 0.195 3 80 0.357 4 120 0.479 5 180 0.678 6 200 0.831 未都夜 si 標準曲線 鐵含量/ u -V = 0. Q039苫+0, 0212? 討論： 1 .再用分光光度計測量顯色

8、劑量不同時的吸光度時應注意什么？ 答:再用分光光度計測量顯色劑量不同時的吸光度時，應保持用一個比色皿測量, 這樣可以減小比色皿自身對實驗產生的影響。 2 .如用配置已久的鹽酸羥胺溶液，對分析結果將帶來什么影響？ 答：鹽酸羥胺是用來將Fe3復原成Fe2的，如果配制已久，復原能力減弱，就會使部分鐵離子得不到復原，造成分析結果偏小 3 .鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的適宜條件是什么？ 答：測定時，要控制PH=曲右較好，弱酸度較高，反應速度較慢，酸度較低， 會使二價鐵離子水解，影響顯色 4 .為什么要用鄰二氮菲顯色后再測定？ 答：因為水中微量組分較少，對光的吸收很小，無法測出其吸光光度，加入顯色劑后，與被測組分形成絡合物，摩爾吸收系數較高，吸光明顯，容易測定。