2017-2018學年高中生物 第一部分 微生物的利用 實驗1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離學案 浙科版選修1

第一部分 微生物的利用 實驗1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離一、大腸桿菌1大腸桿菌屬于革蘭氏_性菌，為_型的腸道桿菌。2結構：屬于_生物。3用途：是在_技術中被廣泛采用的工具。4與人類的關系：它生活在人類的_中，一般對人_(“有”還是“無”)害。有一些菌株對人體能產生危害，因為它們可以侵蝕_并產生_。任何大腸桿菌如果進入人的_系統(tǒng)，都會對人體產生危害。答案：1.陰兼性厭氧2原核3基因工程4腸道無腸黏膜毒素泌尿二、細菌的培養(yǎng)和分離1細菌的培養(yǎng)：(1)細菌的繁殖：細菌以_的方式繁殖，分裂速度很快，約_分裂一次。(2)培養(yǎng)細菌的方法：培養(yǎng)細菌，需要將_轉移到_中，一般用_來轉移帶菌的培養(yǎng)物。(3)用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌的差別：接種后，培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基類型接種方法接種后培養(yǎng)的時間(單位：小時)培養(yǎng)結果液體培養(yǎng)基接種環(huán)直接接種培養(yǎng)8 h后每毫升培養(yǎng)基中有_個細菌固體培養(yǎng)基用接種環(huán)在培養(yǎng)基上用_的方式接種(該法還可以用于_)培養(yǎng)1020 h后一個細菌細胞會繁殖成許多個細菌細胞，這些細胞_，形成_2.細菌的分離：(1)分離的方法與特點：分離細菌有_和_2種。前者方法簡單，后者操作復雜，但是_更易分開。(2)本實驗進行大腸桿菌分離，是用_法，就是在_培養(yǎng)基上進行細菌的_。答案：1.(1)分裂20 min(2)已有細菌的培養(yǎng)物新的培養(yǎng)基接種環(huán)(3)幾億劃線分離細菌緊緊聚集在一起菌落2.(1)劃線分離法涂布分離法單菌落(2)劃線分離固體平面劃線培養(yǎng)三、滅菌操作1滅菌操作的原因：為了獲得_的培養(yǎng)物，其關鍵是防止外來_的入侵污染。因此，在培養(yǎng)微生物時必須進行_操作。2無菌操作的條件：(1)首要條件是_必須是無菌的；(2)_必須是無菌的；(3)_的過程必須是無菌的等。答案：1.純凈雜菌無菌2(1)各種器皿(2)各種培養(yǎng)基(3)菌轉移操作四、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實驗1實驗目的：(1)進行大腸桿菌的_，利用_培養(yǎng)基進行細菌培養(yǎng)的操作；(2)進行大腸桿菌的_，用_培養(yǎng)基進行細菌的_培養(yǎng)；(3)說明大腸桿菌培養(yǎng)的條件和操作要求的原理。2實驗步驟(1)滅菌：用_在_壓力下對LB液體培養(yǎng)基、LB固體培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌_min。(2)自_向_中轉移并分裝固體培養(yǎng)基：待冷卻至_左右，將三角錐形瓶中的_培養(yǎng)基，在_上分裝至幾個_中，制成_培養(yǎng)基。(3)將大腸桿菌自_轉移到_中的_培養(yǎng)基中培養(yǎng)：將大腸桿菌用_在無菌操作下接種至三角錐形瓶中的_培養(yǎng)基中，在_搖床振蕩培養(yǎng)_，完成大腸桿菌的培養(yǎng)。(4)將菌液在_培養(yǎng)基上進行_分離：從前一步培養(yǎng)得到的菌液中獲取菌種，用_以_法接種至第二步所制得的_培養(yǎng)基中，在_恒溫箱中培養(yǎng)_h后觀察菌落。(5)菌種保存：在無菌操作下將_用_取出，再用_法接種在_上，_培養(yǎng)_后，_冰箱保存。3分離實驗的結果及相應結論：觀察中若看到在_的末端出現(xiàn)_，則表明菌已被分離了。4大腸桿菌分離的用途：_的通用方法，也是用于_的最簡便方法之一。答案：1.(1)擴增液體(2)分離固體平面劃線2(1)高壓鍋1 kg15(2)三角瓶培養(yǎng)皿60 固體超凈臺培養(yǎng)皿固體平面(3)斜面三角瓶液體接種環(huán)液體37 12 h(4)固體平面劃線接種環(huán)劃線固體平面371224(5)單菌落接種環(huán)劃線斜面37 24 h4 3劃線不連續(xù)的單個菌落4消除污染雜菌篩選高表達量菌株3