（通用版）2019版高考生物二輪復(fù)習(xí) 專(zhuān)題十 現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題 考點(diǎn)29 基因工程、蛋白質(zhì)工程和細(xì)胞工程學(xué)案

考點(diǎn)29基因工程、蛋白質(zhì)工程和細(xì)胞工程 直擊考綱1.基因工程的誕生()。2.基因工程的原理及技術(shù)(含PCR技術(shù))()。3.基因工程的應(yīng)用()。4.蛋白質(zhì)工程()。5.植物的組織培養(yǎng)()。6.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆()。7.細(xì)胞融合與單克隆抗體()。8.動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程與胚胎工程的理論基礎(chǔ)()。9.胚胎干細(xì)胞的移植()。10.胚胎工程的應(yīng)用()。11.轉(zhuǎn)基因生物的安全性()。12.生物武器對(duì)人類(lèi)的威脅()。13.生物技術(shù)中的倫理問(wèn)題()。14.簡(jiǎn)述生態(tài)工程的原理()。15.生態(tài)工程的實(shí)例()。1基因工程常考的3種基本工具(1)限制性核酸內(nèi)切酶：識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并在特定位點(diǎn)上切割DNA分子。(2)DNA連接酶：E·coli DNA連接酶只能連接黏性末端；T4 DNA連接酶能連接黏性末端和平末端。(3)載體：能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制；有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段(基因)插入其中；具有特殊的標(biāo)記基因以便對(duì)含目的基因的受體細(xì)胞進(jìn)行鑒定和選擇。2基因工程的4大操作程序 (1)目的基因的獲取從基因文庫(kù)中獲取。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增a原理：DNA雙鏈復(fù)制。b條件：模板DNA、引物、游離的脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定的DNA聚合酶。用化學(xué)方法直接人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體模式圖基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞導(dǎo)入植物細(xì)胞：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法。導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞：顯微注射技術(shù)。導(dǎo)入微生物細(xì)胞：感受態(tài)細(xì)胞法(用Ca2處理)。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定插入檢測(cè)：DNA分子雜交技術(shù)。轉(zhuǎn)錄檢測(cè)：DNARNA分子雜交技術(shù)。翻譯檢測(cè)：抗原抗體雜交。個(gè)體水平檢測(cè)：抗性接種實(shí)驗(yàn)。3圖解記憶蛋白質(zhì)工程4比較記憶植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)取材植物幼嫩部位動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織過(guò)程結(jié)果獲得植株個(gè)體，可以體現(xiàn)全能性新的細(xì)胞，不形成個(gè)體，不體現(xiàn)全能性條件無(wú)菌；營(yíng)養(yǎng)；適宜條件無(wú)菌、無(wú)毒；營(yíng)養(yǎng)、血清等；溫度和pH；氣體環(huán)境：O2、CO25.植物體細(xì)胞雜交與單克隆抗體制備過(guò)程比較步驟植物體細(xì)胞雜交過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程第一步原生質(zhì)體的制備(酶解法)正常小鼠免疫處理第二步原生質(zhì)體融合(物理、化學(xué)法)動(dòng)物細(xì)胞融合(物理、化學(xué)、生物方法)第三步雜種植株的篩選與培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)第四步雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定單克隆抗體的提純相同點(diǎn)兩種技術(shù)手段的培養(yǎng)過(guò)程中都進(jìn)行有絲分裂，都是無(wú)性繁殖，都可稱(chēng)為克隆，都不涉及減數(shù)分裂；均為無(wú)菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件(1)誘導(dǎo)融合的方法分別有哪些？融合的細(xì)胞類(lèi)型有哪幾種(僅考慮兩兩融合的細(xì)胞)?提示誘導(dǎo)植物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合的方法主要有離心、振動(dòng)、電激或用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒(誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有因素)、電激等。融合的細(xì)胞類(lèi)型：前者AA、BB、AB。后者瘤瘤、B瘤、BB。(2)各自的原理分別有哪些？提示前者有細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性，后者有細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖。6掌握克隆動(dòng)物培育的流程7理清單克隆抗體制備的過(guò)程題組一基因工程和蛋白質(zhì)工程1(2018·保定一模)1-抗胰蛋白酶是肝臟產(chǎn)生的一種糖蛋白，缺乏會(huì)引起肺氣腫，某公司成功研制出轉(zhuǎn)基因羊，進(jìn)入泌乳期后，其乳汁中含有人類(lèi)的1-抗胰蛋白酶，用于治療肺氣腫，回答下列問(wèn)題：(1)為獲取目的基因，需要在肝細(xì)胞中提取_，通過(guò)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生cDNA，再通過(guò)_技術(shù)進(jìn)行快速擴(kuò)增。(2)將1-抗胰蛋白酶基因與乳腺蛋白基因的_等調(diào)控組件重組在一起，構(gòu)建基因表達(dá)載體，然后通過(guò)_技術(shù)，導(dǎo)入羊的受精卵中。(3)受精卵通過(guò)早期胚胎培養(yǎng)，一般發(fā)育到_階段，通過(guò)胚胎移植到受體子宮中孕育，為選育出能泌乳的雌羊，移植前須從胚胎的_部位取樣，做DNA分析鑒定性別。(4)1-抗胰蛋白酶是一種結(jié)構(gòu)較復(fù)雜的糖蛋白，因此用上述方法生產(chǎn)，相對(duì)傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌生產(chǎn)，優(yōu)勢(shì)在于_。答案(1)mRNAPCR(2)啟動(dòng)子(或啟動(dòng)子、終止子)顯微注射(3)桑椹胚或囊胚滋養(yǎng)層(4)羊細(xì)胞有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，具備蛋白質(zhì)加工的能力解析(1)1-抗胰蛋白酶基因在肝細(xì)胞中表達(dá)，所以可以在肝細(xì)胞中提取mRNA，反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生相應(yīng)cDNA，再通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增。(2)為了使1-抗胰蛋白酶基因在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，需要將其與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組，構(gòu)建基因表達(dá)載體，然后通過(guò)顯微注射技術(shù)，導(dǎo)入羊的受精卵中。(3)牛和羊的胚胎一般發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段，再進(jìn)行胚胎移植；DNA分析鑒定性別須從胚胎的滋養(yǎng)層取樣，這樣既保證了遺傳信息一致，又不影響內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的進(jìn)一步發(fā)育。(4)糖蛋白的形成需要進(jìn)行蛋白質(zhì)的加工，相對(duì)于原核細(xì)胞而言，羊細(xì)胞有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，具備蛋白質(zhì)加工的能力。2人乳鐵蛋白是一種重要的藥用保健蛋白。下圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的過(guò)程，圖中Tetr表示四環(huán)素抗性基因，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，五種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示，請(qǐng)回答以下問(wèn)題：(1)要將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，若只允許使用一種限制酶，應(yīng)選擇的限制酶是_，酶能起催化作用的原理是_。(2)據(jù)圖分析，篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含_(填“四環(huán)素”“氨芐青霉素”或“四環(huán)素或氨芐青霉素”)的培養(yǎng)基上進(jìn)行，原因是_。(3)若BamH酶切的DNA末端與Bcl酶切的DNA末端連接起來(lái)，連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為_(kāi)，對(duì)于該部位，這兩種酶_(填“都不能”或“只有一種能”)切開(kāi)。(4)培養(yǎng)出早期胚胎后，科學(xué)家欲進(jìn)行胚胎分割移植，則應(yīng)該選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的_，將其移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中，然后用分割針進(jìn)行分割。答案(1)Sau3A可以顯著降低化學(xué)反應(yīng)的活化能(2)氨芐青霉素用限制酶切割后破壞了Tetr基因，但不會(huì)破壞Ampr基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞(對(duì)氨芐青霉素具有抗性)，能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來(lái)(3)或都不能(4)桑椹胚或囊胚解析分析題圖：題圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的過(guò)程，該過(guò)程采用了基因工程技術(shù)(目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá))、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)。圖中表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；表示早期胚胎培養(yǎng)；表示胚胎移植；表示轉(zhuǎn)基因牛的產(chǎn)生；表示從轉(zhuǎn)基因牛中獲取目的基因產(chǎn)物。(1)根據(jù)表中五種酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)可知，限制酶Sau3A還可以切割限制酶Bcl和限制酶BamH的識(shí)別序列，因此要將人乳蛋白基因插入載體，在只允許用一種限制酶切割載體和人乳鐵蛋白基因的情況下，應(yīng)選擇限制酶Sau3A。酶能起催化作用的原理是可以顯著降低化學(xué)反應(yīng)的活化能。(2)用限制酶Sau3A切割后會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因(Tetr)，但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因(Ampr)，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來(lái)。因此篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行。(3)根據(jù)表格中各種限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)可知，若BamH酶切的DNA末端與Bcl酶切的DNA末端連接起來(lái)，連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為或，對(duì)于該部位，這兩種酶都不能切開(kāi)。(4)桑椹胚或囊胚期細(xì)胞分化程度低，分割后易成活，因此胚胎分割移植，則應(yīng)該選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，將其移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中，然后用分割針進(jìn)行分割。用分割針或分割刀對(duì)囊胚進(jìn)行分割時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。3干擾素是用于治療病毒感染和癌癥的免疫活性蛋白質(zhì)，若人的干擾素基因在大腸桿菌內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生的抗病毒性較低且保存困難，若將第17位的半胱氨酸改造為絲氨酸，則生產(chǎn)出的干擾素的抗病毒性是原來(lái)的100倍，且可在70 條件下保存半年，下圖是構(gòu)建干擾素工程菌的過(guò)程示意圖?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)要改變干擾素的功能，可以考慮對(duì)干擾素的_進(jìn)行改造。對(duì)干擾素進(jìn)行改造，也可直接對(duì)干擾素基因進(jìn)行改造，其原因是_。(2)過(guò)程將B導(dǎo)入大腸桿菌，需用_對(duì)大腸桿菌進(jìn)行處理，使其處于能_的生理狀態(tài)。(3)要檢測(cè)B是否導(dǎo)入大腸桿菌，將過(guò)程后的大腸桿菌先接種于含_的培養(yǎng)基上，然后將在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌接種在含_的培養(yǎng)基上，在前者培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)而在后者培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的是導(dǎo)入B的工程菌。(4)利用圖中工程菌不能生產(chǎn)有活性的干擾素，這是因?yàn)開(kāi)。答案(1)氨基酸序列蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)由基因決定，基因可以直接遺傳；對(duì)基因進(jìn)行改造比對(duì)蛋白質(zhì)改造容易(2)Ca2吸收周?chē)h(huán)境中的DNA分子(3)氨芐青霉素四環(huán)素 (4)大腸桿菌為原核生物，無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不具備加工干擾素的能力解析(1)根據(jù)題干信息，若將第17位的半胱氨酸改造為絲氨酸，則生產(chǎn)出的干擾素的抗病毒性是原來(lái)的100倍，且可在70 條件下保存半年，因此可以對(duì)干擾素的氨基酸序列進(jìn)行改造。對(duì)干擾素進(jìn)行改造，也可直接對(duì)干擾素基因進(jìn)行改造，原因是：蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)由基因決定，基因可以直接遺傳；對(duì)基因進(jìn)行改造比對(duì)蛋白質(zhì)改造容易。(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，需用Ca2處理，使大腸桿菌處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，成為感受態(tài)細(xì)胞。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)，大腸桿菌有三種狀態(tài)，一是沒(méi)有導(dǎo)入任何質(zhì)粒，二是導(dǎo)入普通質(zhì)粒，三是導(dǎo)入重組質(zhì)粒。分析圖示可知：在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，抗四環(huán)素基因的結(jié)構(gòu)遭到破壞，而抗氨芐青霉素基因結(jié)構(gòu)完好，因此沒(méi)有導(dǎo)入任何質(zhì)粒的大腸桿菌，不含上述兩種抗性基因，在含有氨芐青霉素或四環(huán)素的培養(yǎng)基中都不能生長(zhǎng)；導(dǎo)入普通質(zhì)粒的大腸桿菌含有的上述兩種抗性基因的結(jié)構(gòu)均完好，在含有氨芐青霉素或四環(huán)素的培養(yǎng)基中都能生長(zhǎng)；導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌含有的抗四環(huán)素基因的結(jié)構(gòu)遭到破壞，而含有的抗氨芐青霉素基因結(jié)構(gòu)完好，因此在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)，但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng)?？梢?jiàn)，將過(guò)程后的大腸桿菌進(jìn)行篩選時(shí)，先用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，淘汰沒(méi)有導(dǎo)入任何質(zhì)粒的大腸桿菌，能生長(zhǎng)的則是含有普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒(二者都含抗氨芐青霉素基因)的大腸桿菌；然后將該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落用“蓋章”的方法接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上，在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)的是含普通質(zhì)粒的大腸桿菌，將兩個(gè)培養(yǎng)基進(jìn)行位置對(duì)照，在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上該位置沒(méi)有菌落出現(xiàn)，則屬于導(dǎo)入重組質(zhì)粒的工程菌。(4)干擾素是分泌蛋白，在核糖體中合成后需要經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工才具有生物活性，而大腸桿菌是原核生物，無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不具備加工干擾素的能力，所以利用圖中工程菌不能生產(chǎn)有活性的干擾素。題組二細(xì)胞工程4利用現(xiàn)代生物技術(shù)，科研人員對(duì)馬鈴薯的培育進(jìn)行了研究，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：(1)培育馬鈴薯脫毒苗所依據(jù)的原理是_，該培育過(guò)程涉及_和_兩個(gè)階段。(2)研究馬鈴薯莖尖外植體大小對(duì)幼苗的成苗率和脫毒率的影響，結(jié)果如圖。據(jù)圖可知：莖尖越小，脫毒率_，成苗率_，培養(yǎng)脫毒苗莖尖的適宜大小為_(kāi)。(3)若想培育出“番茄馬鈴薯”植株，運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交能否得到可育的雜種植株？為什么？_。(4)若馬鈴薯細(xì)胞中含m條染色體，番茄細(xì)胞中有n條染色體，則“番茄馬鈴薯”細(xì)胞在有絲分裂后期含_條染色體。答案(1)植物細(xì)胞全能性脫分化再分化(2)越高越低0.27 mm(3)否(或不能)，不同種的植物存在生殖隔離(4)2(mn)解析(1)培育馬鈴薯脫毒苗是對(duì)植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用，所依據(jù)的原理是植物細(xì)胞全能性；該培育過(guò)程涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段。(2)據(jù)圖可知：莖尖越小，脫毒率越高，成苗率越低；培養(yǎng)脫毒苗莖尖的適宜大小為0.27 mm。(3)由于番茄和馬鈴薯屬于兩個(gè)不同物種，而不同種的植物存在生殖隔離，所以若想培育出“番茄馬鈴薯”植株，運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交不能得到可育的雜種植株。(4)若馬鈴薯細(xì)胞中含m條染色體，番茄細(xì)胞中有n條染色體，則“番茄馬鈴薯”細(xì)胞中含有(mn)條染色體，在有絲分裂后期著絲點(diǎn)分裂，染色體數(shù)目加倍，因此細(xì)胞中含2(mn)條染色體。5美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭奶牛，年產(chǎn)奶量達(dá)30.8 t，我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為34 t。某人用該高產(chǎn)奶牛的耳朵細(xì)胞，采用核移植技術(shù)獲得高產(chǎn)奶牛(如圖)，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)目前完成的方法有_、梯度離心、紫外光短時(shí)間照射及化學(xué)物質(zhì)處理等。(2)過(guò)程中選擇去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因是_。(3)過(guò)程所利用的技術(shù)是_，其原理是_。(4)該實(shí)驗(yàn)的成功說(shuō)明已分化的耳朵細(xì)胞的細(xì)胞核中含有與_一樣的全套基因，這種繁殖方式屬于_。(5)若研究發(fā)現(xiàn)該高產(chǎn)奶牛線(xiàn)粒體發(fā)達(dá)，故它的產(chǎn)奶量高，則小牛d成年后具有這一優(yōu)良性狀嗎？_。你的依據(jù)是_。答案(1)顯微操作去核法(2)卵母細(xì)胞體積大，易操作，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，且細(xì)胞質(zhì)中含有激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(早期胚胎培養(yǎng))細(xì)胞增殖(4)受精卵無(wú)性繁殖(5)不具有線(xiàn)粒體中的基因一般通過(guò)細(xì)胞質(zhì)傳遞給后代，而小牛d的細(xì)胞質(zhì)主要來(lái)自于奶牛a解析(1)去核的方法有顯微操作去核法、梯度離心、紫外光短時(shí)間照射及化學(xué)物質(zhì)處理等方法。(2)在核移植中常用去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，是因?yàn)槁涯讣?xì)胞內(nèi)含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；體積比較大，容易操作。(3)過(guò)程屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，其原理是細(xì)胞增殖。(4)該實(shí)驗(yàn)的成功證明了動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，因?yàn)榧?xì)胞核中含有和受精卵一樣的全套基因。 (5)線(xiàn)粒體位于細(xì)胞質(zhì)中，主要來(lái)源于受體細(xì)胞，因此小牛d沒(méi)有產(chǎn)奶量高的優(yōu)良性狀。6人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：(1)制備單克隆抗體過(guò)程中要用到_和_技術(shù)。(2)制備單克隆抗體過(guò)程中，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于_，使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng)_的淋巴細(xì)胞，此過(guò)程屬于特異性免疫中的_免疫。(3)在細(xì)胞內(nèi)DNA的合成一般有兩條途徑，主途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA，而氨基喋呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經(jīng)酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成沒(méi)有此輔助途徑。 利用DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分，其中添加的_成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用。最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_。(4)此過(guò)程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與_特異性結(jié)合，從而診斷早孕。答案(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合(2)抗原抗體體液(3)氨基喋呤能無(wú)限增殖并分泌特異性抗體(4)人絨毛膜促性腺激素(或HCG)10