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1、 傳染傳染非特異性免疫非特異性免疫特異性免疫特異性免疫免疫學(xué)方法及其應(yīng)用免疫學(xué)方法及其應(yīng)用意義：意義：-疾病的預(yù)防和治療的基礎(chǔ)疾病的預(yù)防和治療的基礎(chǔ)-生物藥物的研究和開發(fā)生物藥物的研究和開發(fā)-現(xiàn)代分子的分析和測試技術(shù)現(xiàn)代分子的分析和測試技術(shù) 中國是免疫學(xué)的發(fā)祥地？中國是免疫學(xué)的發(fā)祥地？免疫技術(shù)的應(yīng)用免疫技術(shù)的應(yīng)用.1 .1 傳染傳染一、傳染與傳染病一、傳染與傳染病傳染：病原突破宿主的免疫防衛(wèi)系統(tǒng)，傳染：病原突破宿主的免疫防衛(wèi)系統(tǒng)， 在宿主的特定部位生長繁殖并引起一在宿主的特定部位生長繁殖并引起一 系列的病理生理變化過程。系列的病理生理變化過程。傳染?。耗軌驈囊粋€宿主傳播到另一傳染病：能夠從一個
2、宿主傳播到另一 個宿主的疾病。個宿主的疾病。二、決定傳染結(jié)局的三大因素二、決定傳染結(jié)局的三大因素（一）病原體（一）病原體1 1、毒力、毒力1 1）侵染力）侵染力 吸附、侵入能力吸附、侵入能力 繁殖擴(kuò)散能力繁殖擴(kuò)散能力 抗宿主防御能力抗宿主防御能力2 2）毒素毒素外毒素：病原細(xì)菌在生長過程向外分泌的外毒素：病原細(xì)菌在生長過程向外分泌的 一類毒性蛋白。一類毒性蛋白。內(nèi)毒素：內(nèi)毒素：G G- -細(xì)菌的脂多糖，僅在細(xì)胞死亡細(xì)菌的脂多糖，僅在細(xì)胞死亡 后才裂解釋放。后才裂解釋放。 類毒素：細(xì)菌外毒素脫毒失去毒性后，仍類毒素：細(xì)菌外毒素脫毒失去毒性后，仍 保持免疫原性的生物制品。保持免疫原性的生物制品。
3、沙門氏菌的侵染力和毒力沙門氏菌的侵染力和毒力 內(nèi)毒素的測定內(nèi)毒素的測定-鱟試劑法鱟試劑法原理：內(nèi)毒素激活變形細(xì)胞溶解物原理：內(nèi)毒素激活變形細(xì)胞溶解物(LAL)(LAL)中的中的B B因因子而引發(fā)系列的激活過程，使可溶蛋白凝固成為子而引發(fā)系列的激活過程，使可溶蛋白凝固成為可見的可見的 凝膠反應(yīng)。凝膠反應(yīng)。 2 2、病原菌數(shù)量、病原菌數(shù)量 3 3、侵入途徑、侵入途徑（二）宿主的免疫力（二）宿主的免疫力（三）環(huán)境因素（三）環(huán)境因素三、傳染的三種可能結(jié)局三、傳染的三種可能結(jié)局隱性傳染：病原侵入后很快為宿主消滅，隱性傳染：病原侵入后很快為宿主消滅， 基本上不出現(xiàn)癥狀。基本上不出現(xiàn)癥狀。帶菌狀態(tài)：無明顯感
4、染癥狀的感染個體。帶菌狀態(tài)：無明顯感染癥狀的感染個體。顯性傳染：病原侵入后使宿主細(xì)胞組織顯性傳染：病原侵入后使宿主細(xì)胞組織 損害，生理功能異常而出現(xiàn)損害，生理功能異常而出現(xiàn) 一系列的臨床癥狀。一系列的臨床癥狀。 非特異性免疫（非特異性免疫（nonspecific immunitynonspecific immunity） 生物體在長期進(jìn)化中形成，屬于先天生物體在長期進(jìn)化中形成，屬于先天 即有、相對穩(wěn)定、無特殊針對性的對付病即有、相對穩(wěn)定、無特殊針對性的對付病 原體的天然抵抗力。原體的天然抵抗力。 非特異免疫組成非特異免疫組成屏障結(jié)構(gòu)屏障結(jié)構(gòu)吞噬細(xì)胞的吞噬功能吞噬細(xì)胞的吞噬功能正常組織和體液中的
5、抗菌物質(zhì)正常組織和體液中的抗菌物質(zhì)炎癥反應(yīng)炎癥反應(yīng)一、表皮與屏障結(jié)構(gòu)一、表皮與屏障結(jié)構(gòu)1 1）機(jī)械性排阻）機(jī)械性排阻2 2）抗菌物質(zhì)）抗菌物質(zhì)3 3）正常菌群）正常菌群2 2血腦屏障和血胎屏障血腦屏障和血胎屏障 血腦屏障血腦屏障 血腦屏障的細(xì)胞間連接緊，胞飲作用微弱等特點，血腦屏障的細(xì)胞間連接緊，胞飲作用微弱等特點，可阻擋病原菌及其毒物隨血流可阻擋病原菌及其毒物隨血流 透入腦組織，從而透入腦組織，從而保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)。保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)。 血胎屏障：血胎屏障： 由母體子宮內(nèi)膜和胎兒絨毛膜共同組成。不由母體子宮內(nèi)膜和胎兒絨毛膜共同組成。不 妨礙母子物質(zhì)交換，但可能妨礙母子物質(zhì)交換，但可能 防止病原
6、體侵入。防止病原體侵入。二、吞噬細(xì)胞及其吞噬作用二、吞噬細(xì)胞及其吞噬作用人體血細(xì)胞有：紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板三種。人體血細(xì)胞有：紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板三種。 主要吞噬細(xì)胞：主要吞噬細(xì)胞：嗜中性粒細(xì)胞；巨噬細(xì)胞嗜中性粒細(xì)胞；巨噬細(xì)胞 一種數(shù)量最多、血液中主要的小吞噬細(xì)胞。一種數(shù)量最多、血液中主要的小吞噬細(xì)胞。存在于血液、淋巴液和各種組織中的大型單核細(xì)胞，具有存在于血液、淋巴液和各種組織中的大型單核細(xì)胞，具有吞噬和胞飲功能。吞噬和胞飲功能。功能：功能：1 1）吞噬和殺菌作用吞噬和殺菌作用2）抗原遞呈作用：）抗原遞呈作用：抗原信息加工、傳遞給抗原信息加工、傳遞給T T 淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞。（MHCM
7、HC：主要組織相容性復(fù)合物）：主要組織相容性復(fù)合物）（TCRTCR：T T細(xì)胞抗原受體細(xì)胞抗原受體 ： CD4CD4：T T細(xì)胞表面特異蛋白）細(xì)胞表面特異蛋白）3 3）免疫調(diào)節(jié)作用：分泌各種活性物質(zhì)）免疫調(diào)節(jié)作用：分泌各種活性物質(zhì)4 4）抗癌作用：細(xì)胞毒作用）抗癌作用：細(xì)胞毒作用三、炎癥反應(yīng)三、炎癥反應(yīng) 吞噬細(xì)胞聚集炎癥部位吞噬細(xì)胞聚集炎癥部位血流加速使抗菌因子、血流加速使抗菌因子、 AbAb局部濃縮；局部濃縮； 死亡宿主細(xì)胞的堆集可死亡宿主細(xì)胞的堆集可 釋放出抗釋放出抗MM物質(zhì)；物質(zhì)；氧濃度下降、乳酸積累，氧濃度下降、乳酸積累， 可抑制多種病原菌生長；可抑制多種病原菌生長； 高溫降低病原體生
8、長速度。 四、正常體液或組織中的抗菌物四、正常體液或組織中的抗菌物 補(bǔ)體：一組非特異性血清蛋白補(bǔ)體：一組非特異性血清蛋白, ,具有擴(kuò)大具有擴(kuò)大 和增強(qiáng)抗體的功能。和增強(qiáng)抗體的功能。補(bǔ)體的性質(zhì)：補(bǔ)體的性質(zhì)： 1 1）熱不穩(wěn)定）熱不穩(wěn)定 2 2）酶原）酶原 3 3）作用的非特異性）作用的非特異性識別單位識別單位活化單位活化單位膜攻擊單位膜攻擊單位替代途徑替代途徑調(diào)節(jié)蛋白調(diào)節(jié)蛋白血清中主要血清中主要9種補(bǔ)體蛋白的作用種補(bǔ)體蛋白的作用 干擾素干擾素(IFN)(IFN)：病毒或干擾素誘生劑誘導(dǎo)：病毒或干擾素誘生劑誘導(dǎo) 產(chǎn)生產(chǎn)生的蛋白，具有抑制病毒和增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。的蛋白，具有抑制病毒和增強(qiáng)機(jī)體的免疫
9、功能。干擾素（干擾素（IFNsIFNs）的特性）的特性1 1）化學(xué)成分為糖蛋白）化學(xué)成分為糖蛋白: : , , , , , , 2 2）廣譜的抗病毒和免疫調(diào)節(jié)活性）廣譜的抗病毒和免疫調(diào)節(jié)活性3 3）誘導(dǎo)產(chǎn)生）誘導(dǎo)產(chǎn)生4) IFN4) IFN刺激細(xì)胞合成刺激細(xì)胞合成AVPAVP降解降解mRNAmRNA產(chǎn)產(chǎn) 生抗病毒作用生抗病毒作用建議讀物3 3特異性免疫特異性免疫特異性免疫特異性免疫 生物體在生活過程中與抗原物質(zhì)接觸后生物體在生活過程中與抗原物質(zhì)接觸后產(chǎn)生的一系列防衛(wèi)功能。其特點是后天產(chǎn)生產(chǎn)生的一系列防衛(wèi)功能。其特點是后天產(chǎn)生的、特異性強(qiáng)、免疫能力具有個體的特異性、的、特異性強(qiáng)、免疫能力具有個體
10、的特異性、包括體液免疫和細(xì)胞免疫。包括體液免疫和細(xì)胞免疫。1 1、中樞免疫器官：、中樞免疫器官：（發(fā)生、分化、成熟）發(fā)生、分化、成熟）骨髓、胸腺、骨髓、胸腺、法氏囊法氏囊/ /類囊器官類囊器官2 2、外周免疫器官、外周免疫器官 （定居、應(yīng)答）（定居、應(yīng)答）淋巴結(jié)、脾臟淋巴結(jié)、脾臟一、免疫器官一、免疫器官二、免疫細(xì)胞及其在細(xì)胞免疫中的作用二、免疫細(xì)胞及其在細(xì)胞免疫中的作用（一）（一）T T細(xì)胞細(xì)胞（胸腺依賴性細(xì)胞）（胸腺依賴性細(xì)胞） 1 1 來源來源 多能干細(xì)胞多能干細(xì)胞未分化淋巴細(xì)胞未分化淋巴細(xì)胞 血流血流 胸腺胸腺 成熟的成熟的T T、B B細(xì)胞細(xì)胞 淋巴結(jié)淋巴結(jié) 效應(yīng)效應(yīng)T T細(xì)胞細(xì)胞 T
11、 T細(xì)胞定位于周圍淋巴結(jié)的副皮質(zhì)區(qū)及脾臟白髓部分，并可經(jīng)細(xì)胞定位于周圍淋巴結(jié)的副皮質(zhì)區(qū)及脾臟白髓部分，并可經(jīng) 血液、組織液、淋巴液釋放到外周血循環(huán)中，當(dāng)遇血液、組織液、淋巴液釋放到外周血循環(huán)中，當(dāng)遇AgAg刺激，刺激，T T 細(xì)胞進(jìn)一步分化、增殖，以發(fā)揮其特異性細(xì)胞免疫功能。細(xì)胞進(jìn)一步分化、增殖，以發(fā)揮其特異性細(xì)胞免疫功能。 2 2T T細(xì)胞主要亞群（以功能劃分）細(xì)胞主要亞群（以功能劃分）調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)T T細(xì)胞（細(xì)胞（ T TR R）1) 1)輔助性輔助性T T細(xì)胞細(xì)胞(T(TH H) )：輔助：輔助B B細(xì)胞，產(chǎn)生抗體。細(xì)胞，產(chǎn)生抗體。2)2)抑制性抑制性T T細(xì)胞細(xì)胞( T( TS S) )：
12、 抑制抑制T TH H，TcTc和和 B B細(xì)胞細(xì)胞 的功能。的功能。 效應(yīng)效應(yīng)T T細(xì)胞細(xì)胞(T(TE E) ) 1) 1)遲發(fā)型超敏遲發(fā)型超敏T T細(xì)胞細(xì)胞(T(TDTHDTH ) )：釋放淋巴因子，：釋放淋巴因子，引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)。引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)。2)2)細(xì)胞毒細(xì)胞毒T T細(xì)胞細(xì)胞( T( TC C) )：直接殺傷帶：直接殺傷帶T TC C抗原的抗原的 靶細(xì)胞靶細(xì)胞( (分泌穿孔素引起被感染細(xì)胞溶解分泌穿孔素引起被感染細(xì)胞溶解) )Granzymes：顆粒酶：顆粒酶 Perforin：穿孔素：穿孔素 apoptosis :凋亡凋亡CD (CD (白細(xì)胞分化抗原）：白細(xì)胞分化抗原）：
13、 白細(xì)胞不同分化階段特有的膜表面分子，具有參與活白細(xì)胞不同分化階段特有的膜表面分子，具有參與活化、介導(dǎo)細(xì)胞遷移等多種功能?；?、介導(dǎo)細(xì)胞遷移等多種功能。 3. T3. T細(xì)胞表面標(biāo)志：細(xì)胞表面標(biāo)志：表面受體：表面受體：綿羊紅細(xì)胞受體（綿羊紅細(xì)胞受體（E E受體），受體），E E玫瑰花結(jié)試驗玫瑰花結(jié)試驗 （檢測外周血（檢測外周血T T細(xì)胞數(shù)目，比例）。細(xì)胞數(shù)目，比例）。有絲分裂原受體（例：有絲分裂原受體（例：PHAPHA，Con ACon A等）等）抗原受體：抗原受體： T T 細(xì) 胞 抗 原 受 體細(xì) 胞 抗 原 受 體(TCR)(TCR)識別由識別由APCAPC遞呈的遞呈的AgAg（二）（二）
14、B B淋巴細(xì)胞（骨髓依賴性淋巴細(xì)胞）淋巴細(xì)胞（骨髓依賴性淋巴細(xì)胞）1 1B B細(xì)胞的表面受體細(xì)胞的表面受體 有絲分裂原受體：有絲分裂原受體： LPSLPS受體受體膜表面抗原受體：膜表面抗原受體： （膜表面免疫球蛋白：（膜表面免疫球蛋白：SmIgSmIg）補(bǔ)體受體：補(bǔ)體受體： FcFc受體：抗體可受體：抗體可結(jié)晶段受體結(jié)晶段受體 SmIgSmIg與抗與抗SmIgSmIg的抗體結(jié)合的抗體結(jié)合2 2B B細(xì)胞的表面抗原：細(xì)胞的表面抗原： SmIgSmIg3. B3. B細(xì)胞的亞群和功能細(xì)胞的亞群和功能 B1: TB1: T細(xì)胞非依賴性亞群；細(xì)胞非依賴性亞群； B2: TB2: T細(xì)胞依賴性亞群細(xì)胞依
15、賴性亞群小結(jié)：小結(jié)：T T細(xì)胞、細(xì)胞、B B細(xì)胞表面抗原受體的比較細(xì)胞表面抗原受體的比較T T細(xì)胞細(xì)胞 B B細(xì)胞細(xì)胞1）識別、接受抗原作用， 1）識別、接受抗原作用,又稱膜表面稱T細(xì)胞受體（TCR) 免疫球蛋白（SmIg）2 2）不識別游離抗原， 2）識別游離抗原，但對TD抗原需要TH的幫助而接受APC傳遞和加工的抗原 3 3）結(jié)構(gòu)類似于Ig的Fab 3）結(jié)構(gòu)為IgM或IgD4）具抗原性，與相應(yīng)的抗體結(jié)合 4）具抗原性，與相應(yīng)的抗體結(jié)合 （抗相應(yīng)的IgM或IgD的抗體） （三）其他淋巴細(xì)胞（三）其他淋巴細(xì)胞 1 1、K K細(xì)胞：殺傷細(xì)胞：殺傷Ag-AbAg-Ab復(fù)合體復(fù)合體 2 2、NKNK
16、細(xì)胞細(xì)胞 大顆粒性淋巴細(xì)胞、可在無大顆粒性淋巴細(xì)胞、可在無Ab/AgAb/Ag致敏下，致敏下， 殺傷某些腫瘤細(xì)胞或被病毒感染細(xì)胞。殺傷某些腫瘤細(xì)胞或被病毒感染細(xì)胞。 3 3、NKTNKT細(xì)胞細(xì)胞 具具T T、NKNK細(xì)胞特性，與抑制自身免疫有關(guān)細(xì)胞特性，與抑制自身免疫有關(guān)三、免疫應(yīng)答三、免疫應(yīng)答 免疫應(yīng)答的過程免疫應(yīng)答的過程 1. 1. 感應(yīng)階段：抗原識別、呈遞感應(yīng)階段：抗原識別、呈遞 2. 2. 增殖分化階段：成熟漿細(xì)胞、致敏淋巴細(xì)胞；增殖分化階段：成熟漿細(xì)胞、致敏淋巴細(xì)胞； 3. 3. 效應(yīng)階段：分泌抗體、淋巴因子、執(zhí)行免疫功能效應(yīng)階段：分泌抗體、淋巴因子、執(zhí)行免疫功能 TD TD抗原抗原
17、 胸腺依賴性抗原。多數(shù)天然抗原為胸腺依賴性抗原。多數(shù)天然抗原為TDTD抗抗 原?？梢痼w液和細(xì)胞免疫；產(chǎn)生原?？梢痼w液和細(xì)胞免疫；產(chǎn)生IgGIgG為為 主的抗體；可產(chǎn)生免疫記憶。主的抗體；可產(chǎn)生免疫記憶。 TITI抗原抗原 非胸腺依賴性抗原。主要為細(xì)菌脂多糖等非胸腺依賴性抗原。主要為細(xì)菌脂多糖等 類抗原。僅引起體液免疫；產(chǎn)生類抗原。僅引起體液免疫；產(chǎn)生IgMIgM抗體；抗體； 不產(chǎn)生免疫記憶。不產(chǎn)生免疫記憶。 免疫應(yīng)答的類型和過程示意圖免疫應(yīng)答的類型和過程示意圖 四、免疫分子四、免疫分子 及其在體液免疫中的作用及其在體液免疫中的作用（一）抗原（一）抗原（antigenantigen，AgAg
18、） 一類能誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答，并能與相一類能誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)抗體或應(yīng)抗體或T T淋巴細(xì)胞受體發(fā)生特異性免疫反淋巴細(xì)胞受體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)的大分子物質(zhì)。應(yīng)的大分子物質(zhì)?？乖咎匦裕嚎乖咎匦裕?-免疫原性免疫原性-反應(yīng)原性反應(yīng)原性完全抗原完全抗原半抗原：只有反應(yīng)原半抗原：只有反應(yīng)原 性而無免疫原性性而無免疫原性 （鄰苯二酚為半抗原）（鄰苯二酚為半抗原） 2 2免疫原性的物質(zhì)基礎(chǔ)免疫原性的物質(zhì)基礎(chǔ) 分子量：分子量：MM10104 4DaDa結(jié)構(gòu)復(fù)雜：抗原性強(qiáng)弱依次為蛋白復(fù)雜結(jié)構(gòu)復(fù)雜：抗原性強(qiáng)弱依次為蛋白復(fù)雜多糖核酸（半抗原），類脂一般不具抗原多糖核酸（半抗原），類脂一般不具
19、抗原性。性。異物性：異種異物性：異種/ /異體異體, ,種族關(guān)系越遠(yuǎn)，組織種族關(guān)系越遠(yuǎn)，組織結(jié)構(gòu)差異結(jié)構(gòu)差異 越大，抗原性越強(qiáng)。越大，抗原性越強(qiáng)。 3 3抗原決定簇（抗原表位）抗原決定簇（抗原表位） 存在于抗原表面決定其抗原特異性的特定化存在于抗原表面決定其抗原特異性的特定化 學(xué)基團(tuán)。學(xué)基團(tuán)?？乖Y(jié)合價：抗原結(jié)合價： 與抗體分子相結(jié)合的抗原決定簇的總數(shù)。與抗體分子相結(jié)合的抗原決定簇的總數(shù)。 抗原決定簇（表位）的數(shù)目是抗原的價抗原決定簇（表位）的數(shù)目是抗原的價 4 4細(xì)菌的抗原細(xì)菌的抗原共同抗原：共同抗原： 某些天然抗原分子上含某些天然抗原分子上含有相同抗原決定簇，能夠有相同抗原決定簇，能夠促進(jìn)
20、機(jī)體產(chǎn)生促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生 共同的抗體共同的抗體而產(chǎn)生交叉反應(yīng)。而產(chǎn)生交叉反應(yīng)。吸收反應(yīng)：吸收反應(yīng)：利用交叉發(fā)應(yīng)除去共同抗利用交叉發(fā)應(yīng)除去共同抗體，用于制備單價抗血清。體，用于制備單價抗血清。( (二二) )抗體（抗體（antibody, Abantibody, Ab）在抗原刺激下產(chǎn)生一類在抗原刺激下產(chǎn)生一類能夠與該抗原發(fā)生反應(yīng)能夠與該抗原發(fā)生反應(yīng)的免疫球蛋白。的免疫球蛋白。( Immunoglobulin, Ig ) Ab Ab特征：特征：1 1）由脊椎動物漿細(xì)胞產(chǎn)生；）由脊椎動物漿細(xì)胞產(chǎn)生；2 2）AgAg刺激；刺激；3 3）特異性結(jié)合；）特異性結(jié)合；4 4）一類具有免疫功能）一類具有免疫功能
21、的球蛋白（的球蛋白（ Ig Ig）；）； 5 5）抗抗體）抗抗體 2 2免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu) Ig Ig鏈：鏈： H H鏈，鏈，L L鏈鏈 區(qū)：區(qū)：V V區(qū)，區(qū)，C C區(qū)，鉸鏈區(qū)區(qū)，鉸鏈區(qū) 類：類：IgGIgG、 IgAIgA、 IgMIgM、 IgDIgD、 IgEIgE、 型：型：和和型型 肽鏈的數(shù)：肽鏈的數(shù)： L L：220220； H H：440440 IgG IgG的酶解和化學(xué)分解片段的酶解和化學(xué)分解片段 木瓜蛋白酶：木瓜蛋白酶：FabFab：抗原結(jié)合片：抗原結(jié)合片段段FC(FC(可結(jié)晶片段可結(jié)晶片段): ):結(jié)合補(bǔ)體結(jié)合補(bǔ)體, ,抗原種抗原種屬特異性屬特異性胃蛋
22、白酶：胃蛋白酶：F F（ab)ab)2 2: 2: 2價價抗原種屬的特異性：抗原種屬的特異性： 來源同種動物的任何抗體免疫其來源同種動物的任何抗體免疫其它動物產(chǎn)生的抗抗體均可與該動物它動物產(chǎn)生的抗抗體均可與該動物產(chǎn)生的任何抗體產(chǎn)生特異反應(yīng)。產(chǎn)生的任何抗體產(chǎn)生特異反應(yīng)。 Ig Ig的體和抗原結(jié)合價：的體和抗原結(jié)合價： 單體：單體： -2-2價價 雙體：雙體： -4-4價價 五體：五體： -5-5價價 Ig Ig的功能區(qū)的功能區(qū) H H鏈鏈: : L L鏈鏈: : 抗原結(jié)合部位由抗原結(jié)合部位由V VL L、 C CL L、V VH H、C CH H1 1四個四個功能區(qū)組成功能區(qū)組成 Ig Ig的構(gòu)
23、象變化的構(gòu)象變化 AgAg與與Fab結(jié)合引結(jié)合引起構(gòu)象變化起構(gòu)象變化, ,利利于補(bǔ)體的結(jié)合與于補(bǔ)體的結(jié)合與作用作用 4 4產(chǎn)抗體細(xì)胞的激活和抗體的形成產(chǎn)抗體細(xì)胞的激活和抗體的形成 相關(guān)的細(xì)胞表面標(biāo)志和受體相關(guān)的細(xì)胞表面標(biāo)志和受體-MHCII-MHCII：主要組織相容性復(fù)合物：主要組織相容性復(fù)合物II II（抗原呈遞）（抗原呈遞） -TCR-TCR：T T細(xì)胞受體（識別特異性抗原）細(xì)胞受體（識別特異性抗原）-CD-CD4 4：T T細(xì)胞表面抗原（識別細(xì)胞表面抗原（識別MHCIIMHCII） 參與的相關(guān)細(xì)胞及作用參與的相關(guān)細(xì)胞及作用（1 1）巨噬細(xì)胞：處理和傳遞抗原，但無特異）巨噬細(xì)胞：處理和傳遞
24、抗原，但無特異 性識別抗原的功能性識別抗原的功能 。（2 2）T T細(xì)胞：在抗體形成過程起調(diào)節(jié)細(xì)胞的作細(xì)胞：在抗體形成過程起調(diào)節(jié)細(xì)胞的作 用，有特異性識別抗原作用。用，有特異性識別抗原作用。（3 3）B B細(xì)胞：產(chǎn)生抗體的效應(yīng)細(xì)胞，有特異識細(xì)胞：產(chǎn)生抗體的效應(yīng)細(xì)胞，有特異識 別別AgAg的功能。的功能?？贵w形成過程：抗體形成過程：1、M抗原遞呈作用抗原遞呈作用 2、T細(xì)胞對細(xì)胞對B細(xì)胞激活細(xì)胞激活3、漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體、漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體 初次應(yīng)答：初次應(yīng)答：潛伏期長潛伏期長,效價低效價低,IgM為主為主再次應(yīng)答：再次應(yīng)答：潛伏期短潛伏期短,效價高效價高,IgG為主為主 Burnet Burnet的克
25、隆選擇學(xué)說的克隆選擇學(xué)說 （識別（識別記憶記憶自身禁忌）自身禁忌）抗體的多樣性分子機(jī)制抗體的多樣性分子機(jī)制 抗體基因重排抗體基因重排7 7淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)與單克隆抗體（淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)與單克隆抗體（McAbMcAb）常規(guī)技術(shù)制備的抗血清：多克隆抗體常規(guī)技術(shù)制備的抗血清：多克隆抗體單克隆抗體（單克隆抗體（McAbMcAb）：）： 由純系由純系B B淋巴細(xì)胞克隆經(jīng)分化、增殖的漿細(xì)胞淋巴細(xì)胞克隆經(jīng)分化、增殖的漿細(xì)胞 產(chǎn)生的單一成分、單一特異性的免疫球蛋白。產(chǎn)生的單一成分、單一特異性的免疫球蛋白。 B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 （小白鼠脾臟，產(chǎn)生（小白鼠脾臟，產(chǎn)生AbAb，但無，但無法在體外繁殖、傳代）
26、法在體外繁殖、傳代） 骨髓骨髓癌癌細(xì)胞細(xì)胞 （癌變的漿細(xì)胞，（癌變的漿細(xì)胞， 快速繁殖，產(chǎn)生快速繁殖，產(chǎn)生 Ig,Ig,但不能與但不能與AgAg特異性結(jié)合）特異性結(jié)合） 雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞 能在體內(nèi)外大量能在體內(nèi)外大量增殖增殖能產(chǎn)生大量單克能產(chǎn)生大量單克隆隆AbAb 融合融合 淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備淋巴細(xì)胞雜交瘤的實驗方法：制備淋巴細(xì)胞雜交瘤的實驗方法： 1 1）選擇親本）選擇親本2 2）混合）混合3 3）促融）促融4 4）撿出）撿出5 5）擴(kuò)大培養(yǎng)）擴(kuò)大培養(yǎng)雜交瘤技術(shù)雜交瘤技術(shù)建議讀物3 3免疫學(xué)方法及其應(yīng)用免疫學(xué)方法及其應(yīng)用 一、抗原、抗體反應(yīng)的一般規(guī)律一、抗原、抗體反應(yīng)的
27、一般規(guī)律1 1）特異性）特異性2 2）可逆性）可逆性 3 3）定比性）定比性 4 4）階段性）階段性5 5）條件依賴性）條件依賴性利用利用“兩對半試驗兩對半試驗”檢測乙肝病檢測乙肝病毒毒 1 1）凝集反應(yīng)）凝集反應(yīng)顆粒性抗原與抗體顆粒性抗原與抗體產(chǎn)生可見的凝集塊產(chǎn)生可見的凝集塊現(xiàn)象?，F(xiàn)象。直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)2 2）沉淀反應(yīng)）沉淀反應(yīng) ：可溶性抗原與抗體發(fā)生可可溶性抗原與抗體發(fā)生可 見沉淀物的反應(yīng)。見沉淀物的反應(yīng)。雙向瓊脂擴(kuò)散法雙向瓊脂擴(kuò)散法免疫電泳免疫電泳3）補(bǔ)體結(jié)合實驗）補(bǔ)體結(jié)合實驗酶聯(lián)免疫吸附法（酶聯(lián)免疫吸附法（ELISAELISA）基本原理：酶與抗體（抗原）
28、結(jié)合，不改基本原理：酶與抗體（抗原）結(jié)合，不改 變變Ag-AbAg-Ab特異性和酶活性。當(dāng)酶結(jié)合物與被特異性和酶活性。當(dāng)酶結(jié)合物與被 檢樣品相應(yīng)抗原（抗體）結(jié)合后，形成檢樣品相應(yīng)抗原（抗體）結(jié)合后，形成Ag-Ag- Ab- Ab-酶復(fù)合物，在相應(yīng)底物存在時，酶催化酶復(fù)合物，在相應(yīng)底物存在時，酶催化 底物反應(yīng)。底物反應(yīng)。標(biāo)記物：標(biāo)記物：HRPHRP（辣根過氧化物酶）（辣根過氧化物酶）底物：底物：DAPDAP（二苯基聯(lián)苯胺）（二苯基聯(lián)苯胺）酶聯(lián)免疫吸附法測定方法酶聯(lián)免疫吸附法測定方法1 1）抗體包被）抗體包被2 2）加待測抗）加待測抗 原原3 3）加酶聯(lián)抗）加酶聯(lián)抗 體體4 4）加底物）加底物5 5）檢測）檢測
廈大微生物課件 傳染與免疫
