2015-2016學(xué)年高中生物 專題一 基因工程 第1課時 DNA重組技術(shù)的基本工具學(xué)案 新人教版選修3

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1、 專題一 基因工程 第1課時　DNA重組技術(shù)的基本工具 [目標(biāo)導(dǎo)讀]　1.結(jié)合課本插圖，簡述DNA重組技術(shù)所需三種基本工具的作用。2.結(jié)合教材P6圖1－5，簡述基因工程中載體需要具備的條件。 [重難點(diǎn)擊]　DNA重組技術(shù)三種基本工具的作用和特點(diǎn)。 1．DNA分子的組成 2．DNA的平面結(jié)構(gòu) (1)配對的堿基，A與T之間形成兩個氫鍵，G與C之間形成三個氫鍵。C—G比例越大，DNA分子結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定。 (2)脫氧核苷酸聚合形成長鏈的過程中產(chǎn)生水，即脫氧核苷酸→DNA＋H2O。 (3)○和之間的化學(xué)鍵為磷酸二酯鍵。 (4)?—?之間的化學(xué)鍵為氫鍵，可用解旋酶斷裂，也可加

2、熱斷裂。 (5)每個脫氧核糖連接著2個磷酸，分別在3號、5號碳原子上相連接。 3．基因與DNA的關(guān)系 從上圖可知，S基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段。 [課堂導(dǎo)入]　 如圖為“黃金水稻”，是將類胡蘿卜素基因?qū)胨緝?nèi)培育而成的，這種技術(shù)就是基因工程，是一種精細(xì)的DNA拼接技術(shù)，需要一些特殊的工具才能進(jìn)行，今天我們就來學(xué)習(xí)DNA重組技術(shù)的基本工具。 探究點(diǎn)一　基因工程的概念及工具酶 1．基因工程的概念 圖1為我國擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，就是通過精心設(shè)計(jì)，用“分子工具”構(gòu)建成的。培育抗蟲棉首先要在體外對含有抗蟲基因的DNA分子進(jìn)行“切割”、改造、修飾和“拼接”，

3、然后，導(dǎo)入棉花體細(xì)胞內(nèi)，并使重組DNA在細(xì)胞中表達(dá)。 由上述資料填寫下表，理解基因工程的概念。 操作對象 基因(DNA) 操作環(huán)境 生物體外 操作水平 DNA分子水平 技術(shù)手段 DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù) 目的 創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品 2.基因工程的工具酶 (1)“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶) ①來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。 ②功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。 小貼士　限制酶所識別序列的特點(diǎn) 呈現(xiàn)堿基互補(bǔ)對稱，無論是奇數(shù)個堿基還是偶數(shù)個

4、堿基，都可以找到一條中心軸線，如圖所示，中心軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。如GCCG以中心線為軸，兩側(cè)堿基互補(bǔ)對稱；CGCGATGCGC以AT為軸，兩側(cè)堿基互補(bǔ)對稱。③作用結(jié)果：形成DNA片段末端。 a．黏性末端 是限制性核酸內(nèi)切酶在識別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時形成的，如圖所示。 b．平末端 是限制性核酸內(nèi)切酶在識別序列的中心軸線處切開時形成的，如圖所示。 ④觀察圖2，說明限制酶切割的位置在2、4(處)。 (2)“分子縫合針”——DNA連接酶 ①作用：將雙鏈DNA片段之間的磷酸二酯鍵連接起來。 ②DNA連接酶種類和作用的區(qū)別

5、 種類 來源 作用 E·coli DNA 連接酶 大腸桿菌 縫合黏性末端被切開的磷酸二酯鍵，不能連接平末端 T4 DNA連接酶 T4噬菌體 縫合黏性末端和平末端，但平末端之間連接的效率比較低 歸納提煉 1．DNA連接酶與限制性核酸內(nèi)切酶的比較 (1)區(qū)別 作用 應(yīng)用 限制性核酸內(nèi)切酶 使特定部位的磷酸二酯鍵斷裂 用于提取目的基因和切割載體 DNA連接酶 在DNA片段之間重新形成磷酸二酯鍵 用于基因表達(dá)載體的構(gòu)建 (2)兩者的關(guān)系可表示為： 2．DNA連接酶與DNA聚合酶的比較 DNA連接酶 DNA聚合酶 相同點(diǎn) 催化兩個脫氧核苷酸

6、之間形成磷酸二酯鍵 不 同 點(diǎn) 模板 不需要模板 需要DNA的一條鏈為模板 作用對象 游離的DNA片段 單個的脫氧核苷酸 作用結(jié)果 形成完整的DNA分子 形成DNA的一條鏈 用途 基因工程 DNA分子復(fù)制 活學(xué)活用 1．下圖為DNA分子的切割和連接過程，據(jù)圖回答下列問題。 (1)EcoRⅠ是一種____________酶，其識別序列是________________，切割位點(diǎn)是___________與___________之間的___________鍵。切割結(jié)果產(chǎn)生的DNA末端片段形式為_____________。 (2)不同來源的DNA片段結(jié)合，在這

7、里需要的酶是__________連接酶，此酶的作用是在__________和________之間形成__________鍵而起縫合作用的。還有一種連接平末端的連接酶是__________。 答案　(1)限制性核酸內(nèi)切　GAATTC　鳥嘌呤脫氧核苷酸　腺嘌呤脫氧核苷酸　磷酸二酯　黏性末端 (2)E·coliDNA　鳥嘌呤脫氧核苷酸　腺嘌呤脫氧核苷酸　磷酸二酯　T4DNA連接酶 解析　限制酶能識別特定的核苷酸序列(堿基序列)，并使兩個特定核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，DNA連接酶的作用是將不同來源的DNA片段連接起來。 方法鏈接　與DNA分子有關(guān)的四種酶的作用部位圖解： (1)作用于a

8、(磷酸二酯鍵)的酶：限制酶、DNA連接酶和DNA聚合酶。 (2)作用于b(氫鍵)的酶：解旋酶。 探究點(diǎn)二　“分子運(yùn)輸車”——載體 載體的作用是作為運(yùn)載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中去，并在受體細(xì)胞內(nèi)大量復(fù)制。常用的載體有細(xì)菌的質(zhì)粒、病毒等。 1．質(zhì)粒來源于許多細(xì)菌和酵母菌等生物，是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。 2．作為載體的條件有： (1)載體DNA要攜帶目的基因，因此要求載體DNA必須有一個至多個限制酶切割位點(diǎn)。 (2)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后要進(jìn)行DNA復(fù)制，因此要求攜帶目的基因的載體具有自我復(fù)制的特點(diǎn)

9、或能整合到染色體DNA上，隨染色體DNA進(jìn)行同步復(fù)制。 (3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后要進(jìn)行鑒定和選擇，一般利用質(zhì)粒上特殊的標(biāo)記基因。 (4)霍亂弧菌有強(qiáng)烈的致病性，也含有質(zhì)粒，但一般不用來做載體。因此，我們選擇的載體應(yīng)該對受體細(xì)胞無害。 3．常用載體種類 質(zhì)粒、λ噬菌體的洐生物和滅活的動植物病毒等。其中最常用的載體是質(zhì)粒。 歸納提煉 細(xì)胞膜上的載體與基因工程中的載體的區(qū)別 (1)化學(xué)本質(zhì)不同：細(xì)胞膜上的載體化學(xué)成分是蛋白質(zhì)；基因工程中的載體可能是物質(zhì)，如質(zhì)粒(DNA)、λ噬菌體的衍生物，也可能是生物，如動植物病毒等。 (2)功能不同：細(xì)胞膜上的載體功能是協(xié)助細(xì)胞膜控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)

10、胞；基因工程中的載體是一種“分子運(yùn)輸車”，把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。 活學(xué)活用 2．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識別序列及切割位點(diǎn)分別是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如圖表示四種質(zhì)粒和目的基因，其中，箭頭所指部位為限制酶的識別位點(diǎn)，質(zhì)粒的陰影部分表示標(biāo)記基因。適于作為圖示目的基因載體的質(zhì)粒是(　　) 問題導(dǎo)析　(1)據(jù)圖可知，能識別此目的基因的兩端序列的是限制酶MunⅠ和EcoRI。 (2)質(zhì)粒B上無標(biāo)記基因，不適合作為載體；質(zhì)粒A和C都有上述限制酶的識別位點(diǎn)，但是C的切割位點(diǎn)在標(biāo)記基因上。 答案　A 解析　由圖可知，質(zhì)粒B上無標(biāo)記基因，不適合作為載體；質(zhì)粒C

11、和D的標(biāo)記基因上都有限制酶的識別位點(diǎn)；只有質(zhì)粒A上既有標(biāo)記基因，且MunⅠ的切割位點(diǎn)不在標(biāo)記基因上。 基因工程的基本工具 ①限制性核,酸內(nèi)切酶(分子手術(shù)刀) ⑥D(zhuǎn)NA連接酶(分子縫合針) ⑧載體(分子運(yùn)輸車) 1．下圖表示一項(xiàng)重要的生物技術(shù)，對圖中物質(zhì)a、b、c、d的描述，正確的是(　　) A．通常情況下，a與d需要用同一種限制酶進(jìn)行切割 B．b能識別特定的核苷酸序列，并將A與T之間的氫鍵切開 C．c連接雙鏈間的A和T，使黏性末端處堿基互補(bǔ)配對 D．b代表的是限制性核酸內(nèi)切酶，c代表的是RNA聚合酶 答案　A 解析　b是限制性核酸內(nèi)切酶，能識別特定的核苷酸序列

12、并使DNA分子的每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，而不是使氫鍵斷開；c是DNA連接酶，能連接兩個DNA片段。 2．關(guān)于限制酶識別序列和切開部位的特點(diǎn)，敘述錯誤的是(　　) A．所識別的序列都可以找到一條中軸線 B．中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列 C．只識別和切割特定的核苷酸序列 D．在任何部位都能將DNA切開 答案　D 解析　一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子。 3．質(zhì)粒之所以能做基因工程的載體，是由于它(　　) A．含蛋白質(zhì)，從而能完成生命活動 B．能夠自我復(fù)制，且能保持連續(xù)性 C．含RNA，能

13、夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成 D．具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)，能夠攜帶目的基因 答案　B 解析　質(zhì)粒存在于細(xì)菌和酵母菌等微生物中，是一種很小的環(huán)狀DNA分子，其上有標(biāo)記基因，便于檢測。質(zhì)粒在受體細(xì)胞中，能隨受體細(xì)胞DNA的復(fù)制而復(fù)制，進(jìn)行目的基因的擴(kuò)增和表達(dá)。 4．通過DNA重組技術(shù)使原有基因得以改造的動物稱為轉(zhuǎn)基因動物。運(yùn)用這一技術(shù)使羊奶中含有人體蛋白質(zhì)，下圖表示了這一技術(shù)的基本過程，在該工程中所用的基因“剪刀”能識別的序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，請回答下列問題。 (1)從羊染色體中“剪下”羊蛋白質(zhì)基因的酶是________________。人體蛋白質(zhì)基因“插入”后連接在羊體細(xì)胞染色體中時需要的酶

14、是________________。 (2)請畫出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過程圖。 (3)人體蛋白質(zhì)基因之所以能“插入”到羊的染色體內(nèi)，原因是_______________________， “插入”時用的工具是________，其種類有__________________________。 答案　(1)限制酶　DNA連接酶 (2) (3)基因的組成、堿基配對方式和空間結(jié)構(gòu)是相同的　載體　質(zhì)粒、動植物病毒、λ噬菌體的衍生物等 解析　基因工程所用的工具酶是限制酶和DNA連接酶，不同生物的基因之所以能整合在一起，是因?yàn)榛虻慕M成、堿基配對方式和空間結(jié)構(gòu)是相同的。將目的基因?qū)胧荏w

15、細(xì)胞，離不開載體的協(xié)助，基因工程中常用的載體除質(zhì)粒外，還有動植物病毒、λ噬菌體的衍生物等。 基礎(chǔ)過關(guān) 知識點(diǎn)一　基因工程的概念和工具酶 1．實(shí)施基因工程的最終目的是(　　) A．提取生物體的DNA分子 B．對DNA分子進(jìn)行人工剪切 C．在生物體外對DNA分子進(jìn)行改造 D．創(chuàng)造符合人們需要的新生物類型和生物產(chǎn)品 答案　D 解析　A、B和C三項(xiàng)均為基因工程操作的具體內(nèi)容，但不是基因工程的目的。實(shí)施基因工程的最終目的是通過基因操作定向改造生物的遺傳物質(zhì)，創(chuàng)造符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。 2．下列關(guān)于限制酶的敘述中，錯誤的是(　　) A．它能在特殊位點(diǎn)切割DNA分子

16、 B．同一種限制酶切割不同的DNA產(chǎn)生的黏性末端能夠很好地進(jìn)行堿基配對 C．它能任意切割DNA，從而產(chǎn)生大量DNA片段 D．每一種限制酶只能識別特定的核苷酸序列 答案　C 解析　限制酶是基因工程的重要工具之一。每種限制酶只能識別特定的核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子。同一種限制酶切割不同的DNA產(chǎn)生的黏性末端能進(jìn)行互補(bǔ)配對。 3．下列有關(guān)限制酶的說法，正確的是(　　) A．限制酶主要是從真核生物中分離出來的 B．限制酶的識別序列只能由6個核苷酸組成 C．限制酶能識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開 D．限

17、制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端都為黏性末端 答案　C 解析　限制酶主要存在于微生物中。一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子，切開后形成兩種末端——黏性末端和平末端。少數(shù)限制酶的識別序列由4、5或8個核苷酸組成。 4．下列關(guān)于DNA連接酶的敘述，不正確的是(　　) A．催化相同黏性末端的DNA片段之間的連接 B．催化相同平末端的DNA片段之間的連接 C．催化兩個黏性末端互補(bǔ)堿基氫鍵的形成 D．催化DNA分子兩條鏈的脫氧核糖與磷酸之間磷酸二酯鍵的形成 答案　C 解析　氫鍵是分子間作用力，其斷裂和形成與DNA連接酶無關(guān)。 5．如圖，兩個核酸片段

18、在適宜條件下，經(jīng)X酶的催化作用，發(fā)生下述變化，則此酶是(　　) A．DNA連接酶 B．RNA聚合酶 C．DNA聚合酶 D．限制酶 答案　A 解析　DNA連接酶可以將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端連接起來。 知識點(diǎn)二　載體 6．作為基因工程中的“分子運(yùn)輸車”——載體，應(yīng)具備的條件是(　　) ①必須有一個至多個限制酶的切割位點(diǎn)，以便目的基因可以插入到載體上?、谳d體必須具備自我復(fù)制的能力，或整合到受體染色體DNA上隨染色體DNA的復(fù)制而同步復(fù)制?、郾仨殠в袠?biāo)記基因，以便進(jìn)行重組后的篩選 ④必須是安全的，不會對受體細(xì)胞有害，或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去?、荽笮?yīng)合適

19、，太大則不易操作 A．①②③④ B．①②③⑤ C．①②④⑤ D．①②③④⑤ 答案　D 解析　基因操作中要使載體攜帶目的基因，其上必須有一個至多個限制酶的切割位點(diǎn)，以便目的基因可以插入到載體上；載體必須具備自我復(fù)制的能力，或整合到受體染色體DNA上隨染色體DNA的復(fù)制而同步復(fù)制；必須帶有標(biāo)記基因，以便進(jìn)行重組后的篩選；必須是安全的；大小應(yīng)合適，太大則不易操作。 7．下列哪項(xiàng)不是基因工程中經(jīng)常使用的載體(　　) A．細(xì)菌質(zhì)粒 B．λ噬菌體的衍生物 C．動植物病毒 D．細(xì)菌擬核區(qū)的DNA 答案　D 解析　細(xì)菌擬核內(nèi)的DNA分子不具備載體的基本條件，不能用于基因工程。 8．

20、下列有關(guān)細(xì)菌質(zhì)粒的敘述，正確的是(　　) A．質(zhì)粒是存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀的細(xì)胞器 B．質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子 C．質(zhì)粒只有在侵入宿主細(xì)胞后在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制 D．細(xì)菌質(zhì)粒的復(fù)制過程一定是在宿主細(xì)胞外獨(dú)立進(jìn)行的 答案　B 解析　質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子，可以在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)或宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。 能力提升 9．下列對基因工程的理解，正確的是(　　) ①它是一種按照人們的意愿，定向改造生物遺傳特性的工程　②對基因進(jìn)行人為改造?、凼求w外進(jìn)行的人為的基因重組?、茉趯?shí)驗(yàn)室內(nèi)，利用相關(guān)的酶和原料合成DNA?、葜饕夹g(shù)為體外DNA重組技術(shù)和轉(zhuǎn)基

21、因技術(shù) ⑥在DNA分子水平進(jìn)行操作?、咭坏┏晒?，便可遺傳 A．①②③④⑤⑥ B．①③④⑤⑥⑦ C．①②③⑤⑥⑦ D．①③⑤⑥⑦ 答案　D 解析　基因工程可以對生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無性繁殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生出人類所需要的基因產(chǎn)物，而不是對基因進(jìn)行人為改造。 10．基因工程在操作過程中需要限制酶、DNA連接酶、載體三種工具。以下有關(guān)基本工具的敘述，正確的是(　　) A．所有限制酶的識別序列均由6個核苷酸組成 B．所有DNA連接酶均能連接黏性末端和平末端 C．真正被用作載體的質(zhì)粒都是天然質(zhì)粒 D．原核生物內(nèi)的限制酶可切割入侵的D

22、NA分子而保護(hù)自身 答案　D 解析　大多數(shù)限制酶的識別序列由6個核苷酸組成，也有少數(shù)限制酶的識別序列由4、5或8個核苷酸組成；DNA連接酶包括E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶，前者只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端連接起來；在基因工程操作中真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的。 11．現(xiàn)有一長度為1 000堿基對(bp)的DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ 單獨(dú)酶切后得到的DNA分子仍是1 000 bp，用Kpn Ⅰ 單獨(dú)酶切得到400 bp和600 bp兩種長度的DNA分子，用EcoRⅠ、KpnⅠ同時酶切后得到200 bp和600 bp兩種長度的

23、DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是(　　) 答案　D 解析　由題干條件可知用EcoRⅠ酶切后，并不能將DNA分為兩段，故可判斷為環(huán)狀DNA，再根據(jù)“用EcoRⅠ、KpnⅠ同時酶切后得到200 bp和600 bp兩種長度的DNA分子”可得到答案D。 12．下列黏性末端是由同一種限制酶切割而成的是(　　) ①TCGGACTTAA ②ACTGTCCA ③AATTCG ④AGCTTCAG A．①② B．①③ C．①④ D．②③ 答案　B 解析　只有①和③兩個黏性末端的堿基是互補(bǔ)的，可以說明一般情況下是由同一種限制酶切開。 13．基因工程中，需要使用限制酶切割

24、目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。 (1)根據(jù)已知條件和圖回答下列問題： ①上述質(zhì)粒用限制酶________切割，目的基因用限制酶__________切割。 ②將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，還要加入適量的__________。 ③請指出質(zhì)粒上至少要有一個標(biāo)記基因的理由：______________________________ ________________________________________________________________________。 (

25、2)不同生物的基因可以拼接的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是____________________________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)①Ⅰ　Ⅱ?、贒NA連接酶?、蹤z測重組質(zhì)粒(或目的基因)是否導(dǎo)入受體細(xì)胞　(2)DNA結(jié)構(gòu)基本相同(其他合理答案均可) 解析　要形成重組質(zhì)粒，質(zhì)粒只能出現(xiàn)一個切口，并且至少保留一個標(biāo)記基因，因序列在GeneⅡ上，因此用限制酶Ⅰ切割質(zhì)粒，保留GeneⅠ標(biāo)記基因；目的基因必須切割兩次，切割后產(chǎn)生的黏性末端能與質(zhì)粒的黏性末端互補(bǔ)

26、，序列中有酶Ⅱ的切割序列，因此用酶Ⅱ，產(chǎn)生的末端互補(bǔ)。 14．下圖表示兩種限制性核酸內(nèi)切酶識別DNA分子特定序列，并在特定位點(diǎn)對DNA進(jìn)行切割的示意圖，請回答以下問題： 甲： 5′—T—C—G—A—A—T—T—C－ 3′—A—G—C—T—T—A—A—G－ 　　　 ↓ —T—C—G—　　　　—A—A—T—T—C— —A—G—C—T—T—A—A—　　　　—G— 乙： 5′—G—T—T—A—A—C— 3′—C—A—A—T—T—G— 　　　 ↓ —G—T—T—　　　—A—A—C— —C—A—A—　　　—T—T—G— (1)圖中甲和乙代表________

27、________________________________________________。 (2)EcoRⅠ、HpaⅠ代表____________________________________________________。 (3)圖中甲和乙經(jīng)過相應(yīng)操作均形成兩個片段，切口的類型分別為______________、____________。 (4)由圖解可以看出，限制酶的作用特點(diǎn)是____________________________________ _____________________________________________________________

28、___________。 答案　(1)有特殊脫氧核苷酸序列的DNA片段　(2)兩種不同的限制酶　(3)黏性末端　平末端　(4)每種限制酶都能識別特定的脫氧核苷酸序列并從特定的位點(diǎn)將DNA分子切開 解析　從圖解可以看出，甲和乙代表的是不同的DNA片段，在相應(yīng)的限制酶(EcoRⅠ、HpaⅠ)的作用下，在特定的位點(diǎn)被剪切成兩部分。前者是在識別序列的中心軸線兩側(cè)分別切開，形成的末端是黏性末端；后者是在識別序列的中心軸線處切開，則產(chǎn)生平末端。EcoRⅠ能將甲片段以圖中方式剪切成兩部分，但不能將乙片段剪切成兩部分，說明每種限制酶的識別序列和切點(diǎn)具有高度的專一性。 個性拓展 15．根據(jù)模擬制作重

29、組DNA分子的活動，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRⅠ酶(識別序列為GAATTC，并在G與A之間切開)切后，即可獲得所需的目的基因和質(zhì)粒，回答以下問題： (1)綠色硬紙板(甲DNA分子)的堿基序列為： ……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC…… ……TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG…… 紅色硬紙板(乙DNA分子)的堿基序列為： ……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC…… ……AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG…… 其中，________DNA分子含有“目的基因”，________

30、__DNA分子是“質(zhì)?！薄? (2)用“剪刀”進(jìn)行切割。酶切割位點(diǎn)在______(“a處”還是“b處”)，請用“‖”在甲、乙兩DNA分子上標(biāo)出EcoRⅠ酶的作用位點(diǎn)。 (3)你模擬插入的DNA片段能稱得上一個基因嗎？____________________。 答案　(1)乙　甲　(2)a處 綠色硬紙板(甲DNA分子)的堿基序列為： ……ATAGCATGCTATCCATG　‖AATTCGGCATAC…… ……TATCGTACGATAGGTACTTAA　‖GCCGTATG…… 紅色硬紙板(乙DNA分子)的堿基序列為： ……TCCTAG‖AATTCTCGGTATG‖AATTCCATAC…… ……AGGATCTTAA‖GAGCCATACTTAA‖GGTATG…… (3)不能 13