自動生化分析儀分析技術人衛(wèi)

《自動生化分析儀分析技術人衛(wèi)》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《自動生化分析儀分析技術人衛(wèi)（55頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

1、衛(wèi) 生 部 “ 十 二 五 ” 規(guī) 劃 教 材 全 國 高 等 醫(yī) 藥 教 材 建 設 研 究 會 規(guī) 劃 教 材南 方 醫(yī) 科 大 學 曾 方 銀中 南 大 學 湘 雅 醫(yī) 學 院 唐 愛 國 學 習 要 求了 解 自 動 生 化 分 析 儀 的 分 類 及 系 統(tǒng) 完 整 性 的 要 求熟 悉 自 動 生 化 分 析 儀 的 分 析 原 理 、 分 析 技 術掌 握 自 動 生 化 分 析 儀 的 日 常 操 作 、 性 能 檢 定 第 一 節(jié) 自 動 生 化 分 析 儀 概 述自 動 生 化 分 析 儀 的 發(fā) 展 分 立 式 自 動 生 化 分 析 儀 的 分 析 原 理 干 式 自

2、動 生 化 分 析 儀 的 分 析 原 理全 自 動 化 實 驗 室 構 建 一 、 自 動 生 化 分 析 儀 的 發(fā) 展 按照反應裝置：連續(xù)流動式、離心式、分立式和干片式按照測定項目：單通道和多通道按照自動化程度：全自動和半自動按照儀器的復雜程度：小型、中型、大型及超大型按照程序可否更改：程序固定和程序可變型 自 動 生 化 分 析 儀 的 分 類 二 、 分 立 式 自 動 生 化 分 析 儀 順 序 分 析 示 意 圖 分立式自動生化分析儀的基本結構 樣 品 處 理 系 統(tǒng) l 樣 品 架 與 試 劑 盤 ：圓盤狀、傳送條帶狀、軌道式及鏈式進樣 l 加 樣 裝 置 ： 定 量 吸 量

3、器 與 加 樣 針l 混 勻 裝 置 ： 攪 拌 混 勻 與 超 聲 混 勻 檢 測 系 統(tǒng) 1.光 路 系 統(tǒng) 前 分 光 光 路 后 分 光 光 路 分光裝置 分 光 裝 置 吸 收 濾 光 片 濾 光 片 單 色 器 干 涉 濾 光 片 棱 鏡 光 柵復 合 濾 光 片 全 息 反 射 光 柵 凹 面 蝕 刻 光 柵 比 色 杯 l硬質石英玻璃l硬質玻璃l丙烯酸塑料 光徑0.51cm，自動沖洗備用 恒 溫 裝 置 l干式（空氣浴式） l水浴循環(huán)式 l恒溫液循環(huán)間接加熱式 工 作 原 理 多 層 薄 膜 固 相 試 劑 技 術測 定 方 法 ： 反 射 光 度 法 、 差 示 電 位 法

4、干 化 學 式 自 動 生 化 分 析 儀 干 化 學 式 自 動 生 化 分 析 儀分類：l反射光度法技術分析儀l膠片涂層技術分析儀l袋式分析儀 干 片 試 劑 結 構 示 意 圖 全自動化實驗室構建l前處理系統(tǒng)l標本運送系統(tǒng)l樣本分析系統(tǒng)l實驗數(shù)據(jù)/結果處理系統(tǒng)（包括LIS系統(tǒng)）l樣本保存系統(tǒng)和計算機硬件 一、生化分析儀常用分析方法l終點分析法（平衡法） l固定時間法 l連續(xù)監(jiān)測法 l比濁測定法 第二節(jié) 自動生化分析儀的分析技術 l一點終點法(一 ) 終 點 分 析 法 （ 平 衡 法 ）l兩點終點法A A 1 A2 (一 ) 波 長 的 選 擇 原 則 待 測 物 質 在 該 波 長 下

5、 的 光 吸 收 最 大 其 吸 收 峰 宜 較 寬 而 鈍 常 見 干 擾 物 在 該 波 長 下 的 光 吸 收 最 小 l單 波 長l雙 波 長l多 波 長 l有 25 、 30 、 37 三 種 溫 度l一 般 固 定 為 37 溫 度 的 選 擇 最小反應液總體積為80500l SVF=Vs/Vt SVF越大，線性范圍越窄，但靈敏度越高隨意改變SVF不盡可靠，尤其是酶活性測定樣 品 量 與 試 劑 量 l單 試 劑 法 l雙 試 劑 法 其 他 參 數(shù) 設 置測 定 方 法 的 選 擇 分 析 時 間 的 選 擇 線 性 范 圍 的 選 擇 校 正 方 法 的 選 擇 ： 一 點 、

6、 兩 點 、 多 點 三 、 生 化 分 析 儀 的 校 準l 校 準 品 ： 配 套 校 準 品 、 第 三 方 校 準 品l 酶 活 性 測 定 的 校 準 ： 理 論 K值 與 校 準 K值l 校 準 頻 率 ： 更 換 試 劑 (批 號 )、 重 要 儀 器 部件 的 保 養(yǎng) 維 護 和 更 換 、 質 控 結 果 失 控 及 其它 糾 正 措 施 無 效 時 、 每 6個 月 計 量 部 門 對 儀 器 進 行 的 計 量 學 檢 定 或 校 準 l 波 長l 反 應 溫 度l 加 樣 (試 劑 和 樣 本 )精 度l 吸 光 度 準 確 性 (半 峰 寬 )l 基 線 漂 移 一

7、、 安 裝 及 使 用 前 準 備（ 一 ） 工 作 環(huán) 境 周 圍 有 足 夠 空 間 ， 避 免 陽 光 直 射 ， 防 塵 、 煙 霧 和 振 動電 源 電 壓 波 動 應 小 于 10%， 可 靠 接 地電 源 頻 率 、 功 率 應 符 合 要 求 ， 應 使 用 UPS遠 離 強 烈 電 磁 場溫 度 18 32 之 間 （ 波 動 小 于 2 ） ， 濕 度 40%80%之 間 ； 空 調 出 風 口 不 宜 直 對 儀 器 第 三 節(jié) 自 動 生 化 分 析 儀 的 日 常 操 作 （ 二 ） 實 驗 用 水 超 純 水 一 般 要 求 電 阻 率 10 M-cm總 有 機 碳

8、 （ TOC） 應 50ppb使 用 0.5m或 更 細 的 濾 膜 過 濾 除 菌 ，細 菌 水 平 5cfu/ml干 擾 元 素 越 少 越 好 儀 器 簡 介 儀 器 的 工 作 原 理 儀 器 工 作 環(huán) 境 要 求 授 權 操 作 人 開 機 程 序 室 內 質 控 程 序 常 規(guī) 樣 本 檢 測 程 序 樣 本 檢 驗 結 果 的 處 理 程 序 工 作 后 保 養(yǎng) 與 關 機 程 序 其 他 支 持 性 文 件 ： 如 校 準 程 序 、 維 護 與 保 養(yǎng) 程 序 等 （ 四 ） 操 作 程 序 文 件 的 主 要 內 容 二 、 基 本 操 作 步 驟 l 儀 器 自 檢 l

9、 加 試 劑 、 取 樣 和 混 勻 l 保 溫 反 應 與 吸 光 度 檢 測l 計 算 、 顯 示 或 打 印 結 果 檢 查 試 劑 注 射 器 、 樣 品 注 射 器 等 有 無 滲 漏檢 查 純 水 是 否 正 常 或 足 量 、 各 種 清 洗 劑 是 否 足 夠檢 查 各 項 分 析 試 劑 是 否 充 足 、檢 查 試 劑 針 、 加 樣 針 等 是 否 需 要 特 別 清 潔 處 理檢 查 樣 品 運 行 通 道 是 否 通 暢 無 障 礙 （ 二 ） 質 控 品 測 定檢 測 頻 率 ： 每 批 次質 控 品 個 數(shù) ： 單 、 雙 、 三 水 平質 控 規(guī) 則 ： 出 現(xiàn)

10、 12s為 警 告 ， 出 現(xiàn) 13s、 22s、 R4s、 41s、 10 x為 失 控 （ 三 ） 患 者 標 本 的 測 定n 項 目 錄 入 ： 手 工 錄 入 ： 逐 項 錄 入 ， 組 合 項 目 錄 入 ， 批 量 錄 入 條 形 碼 識 別n 急 診 優(yōu) 先 檢 驗 1.每 天 維 護 檢 查 樣 品 針 、 試 劑 針 、 攪 拌 棒 有 無 明 顯 磨 損 ，位 置 是 否 正 確 ， 需 否 特 殊 清 潔 添 加 或 更 換 試 劑 添 加 清 洗 劑 清 洗 ISE單 元 ： 用 CLEAN液 執(zhí) 行 每 日 清 洗 程 序 ， 然 后 關 機 2.每 周 維 護u執(zhí)

11、 行 比 色 杯 清 洗 程 序 對 比 色 杯 進 行 清 洗u對 比 色 杯 進 行 空 白 吸 光 度 檢 查 ， 了 解 透 光 性 的改 變 情 況u清 洗 樣 品 探 針 、 試 劑 探 針 、 攪 拌 棒 、 電 極 管 道u清 洗 恒 溫 水 槽 3.每月維護對清洗裝置本身、純水桶、供水過濾器、散熱器過濾網(wǎng)等進行清洗清洗電極模塊 4.不定期維護檢查進樣注射器是否需要更換、各沖洗管路是否暢通、各機械運轉部分是否工作正常徹底清洗比色杯和比色杯輪盤，檢查比色杯是否需要更換更換光源燈更換樣品探針和試劑探針、攪拌棒更換電極、蠕動泵管 1.雜 散 光 50g/L亞 硝 酸 鈉 溶 液 直

12、接 加 入 比 色 杯 ， 測定 波 長 340nm的 吸 光 度 * 吸 光 度 應 不 小 于 2.3 2 溫 度 準 確 度 測 定 l 比 色 杯 中 加 入 500l去 離 子 水 ， 溫 度 穩(wěn) 定 ， 測溫 儀 每 隔 30s讀 數(shù) 一 次 ， 連 續(xù) 20次 。 求 出 平 均溫 度 和 20次 中 最 大 值 與 最 小 值 之 差 -波 動 度 。* 溫 度 應 在 設 定 值 的 0.3 內 ， 波 動 度 不 大 于0.2 l 將 色 素 原 液 稀 釋 成 11個 濃 度 梯 度 ， 各 梯 度 液 重復 測 定 5次 吸 光 度 ， 計 算 平 均 值 。 以 稀

13、釋 比 例為 橫 坐 標 ， 吸 光 度 平 均 值 為 縱 坐 標 ， 畫 出 散 點圖 ， 用 最 小 二 乘 法 先 對 前 4個 點 進 行 線 性 擬 合 ，并 計 算 5 11點 的 相 對 偏 倚 。* 各 測 定 值 的 相 對 偏 倚 在 5%范 圍 內 的 最 大 吸 光度 應 不 小 于 2.0。 l 340nm吸 光 度 為 0.5的 重 鉻 酸 鉀 標 準 溶 液 ，600nm 700nm波 長 范 圍 內 任 一 波 長 的 吸 光 度為 0.5的 硫 酸 銅 標 準 溶 液 。 設 定 最 小 試 劑 量 、最 小 樣 本 量 ， 最 長 反 應 時 間 或 10

14、min， 讀 數(shù) 間隔 為 儀 器 的 測 定 周 期 或 30s， 測 定 上 述 溶 液 的吸 光 度 值* 最 大 與 最 小 值 吸 光 度 之 差 應 不 大 于 0.01 l 以 蒸 餾 水 空 白 ， 340nm處 吸 光 度 分 別 約 為 0.5和 1.0的 重 鉻 酸 鉀 標 準 溶 液 ， 重 復 測 定 3次 ， 計算 3次 測 量 的 算 術 平 均 值 與 標 準 值 之 差* 吸 光 度 為 0.5的 允 許 誤 差 為 0.025， 吸 光 度 應 為1.0的 允 許 誤 差 應 為 0.07 6 吸 光 度 重 復 性 檢 定 l 吸 光 度 為 0.5的 重

15、 鉻 酸 鉀 標 準 溶 液 同 時 作 為樣 品 和 試 劑 ， 加 入 量 為 分 析 儀 標 稱 的 最 小反 應 體 積 ， 反 應 時 間 為 分 析 儀 最 長 反 應 時間 或 10min， 340nm連 續(xù) 測 定 20條 反 應 曲 線的 最 后 一 個 讀 點 的 吸 光 度 值* 該 吸 光 度 的 變 異 系 數(shù) CV應 不 大 于 1.5% 7 試 劑 加 樣 精 確 度 與 重 復 性 檢 定采 用 稱 量 法 ： 恒 溫 、 恒 濕 的 實 驗 室 內 ， 帶 蓋 容 器在 高 精 度 電 子 天 平 調 零 。 控 制 試 劑 針 或 樣 本 針往 該 容 器

16、中 加 入 規(guī) 定 量 除 氣 蒸 餾 水 ， 蓋 蓋 再 稱重 。 每 種 規(guī) 定 加 入 量 重 復 稱 量 20次 ， 求 出 實 際加 入 量 (l)， 計 算 加 樣 誤 差* 儀 器 的 最 小 、 最 大 試 劑 加 樣 量 ， 準 確 度 誤 差 應不 超 過 %， 變 異 系 數(shù) 應 不 超 過 2%。 8.樣 品 加 樣 準 確 性 與 重 復 性 檢 定l 稱 量 法l 比 色 法 9 樣 品 攜 帶 污 染 率 檢 定以 去 離 子 水 為 試 劑 ， 以 高 濃 度 orange G原 液 和 去離 子 水 為 樣 品 ， 樣 品 的 加 入 量 為 分 析 儀 最

17、大樣 品 量 ， 按 照 原 液 、 原 液 、 原 液 、 去 離 子 水 、去 離 子 水 、 去 離 子 水 的 順 序 為 一 組 ， 測 定 上述 樣 品 反 應 結 束 時 的 吸 光 度 ， 共 進 行 5組 測 定 ，按 照 相 應 公 式 計 算 攜 帶 污 染 率* 5組 的 平 均 攜 帶 污 染 率 ， 其 值 應 小 于 0.5% 10 臨 床 項 目 批 內 與 批 間 精 密 度 檢 定l 雙 水 平 質 控 血 清 ， 測 定 不 同 的 檢 測 項 目采 用 某 種 試 劑 時 的 批 內 與 批 間 平 均 值 、SD值 及 CV值 。l 不 同 項 目 不

18、 同 濃 度 水 平 的 CV有 不 同 要 求 l（ 一 ） 生 化 測 定 結 果 的 量 值 溯 源生 化 分 析 系 統(tǒng) 的 概 念 一 個 完 整 和 有 效 的 生 化 分 析 系 統(tǒng) ， 是 指生 化 分 析 儀 、 試 劑 、 校 準 品 、 及 相 關 的操 作 程 序 、 質 量 控 制 程 序 、 設 備 維 護 程序 等 的 組 合 ； 若 是 手 工 操 作 ， 還 包 括 具體 的 操 作 人 員 。 （ 二 ） 保 證 生 化 分 析 系 統(tǒng) 的 完 整 性 與 有 效 性 的 方 法l 分 析 系 統(tǒng) 的 性 能 核 實 （ demonstration）l 分

19、析 系 統(tǒng) 的 性 能 確 認 （ validation or verification） l 分 析 系 統(tǒng) 的 性 能 評 價 （ evaluation） 小 結 （ 1）自 動 生 化 分 析 儀 是 臨 床 生 化 檢 驗 最 常 用 的 設 備 ， 目 前 以 分立 式 最 為 普 遍 。 現(xiàn) 代 生 化 分 析 儀 已 能 達 到 很 高 的 精 度 。既 可 采 用 比 色 杯 作 為 反 應 和 檢 測 的 載 體 ， 也 可 采 用 干 片試 劑 進 行 檢 測 ， 還 可 采 用 透 射 比 濁 法 測 定 更 加 微 量 的 標志 物 。兩 點 終 點 法 結 合 雙 波

20、 長 測 定 等 能 有 效 消 除 樣 品 溶 血 、 黃 疸和 脂 濁 等 造 成 的 光 吸 收 干 擾 。 連 續(xù) 監(jiān) 測 法 以 時 間 -吸 光度 曲 線 中 線 性 反 應 期 的 單 位 時 間 內 吸 光 度 變 化 值（ A/min） 乘 以 K值 來 計 算 結 果 ， 采 用 校 準 K值 常 優(yōu) 于理 論 K值 和 實 測 K值 。 小 結（2） 分 析 儀 的 基 本 參 數(shù) 設 置 包 括 試 驗 名 稱 、 分 析 方 法 、 主 波 長 、次 波 長 、 樣 品 量 、 R1量 、 R2量 、 稀 釋 液 量 、 讀 數(shù) 時 間 、 線性 范 圍 、 校 準

21、參 數(shù) 和 質 控 參 數(shù) 等 。 測 定 患 者 樣 品 前 需 進 行 檢 查 和 （ 或 ） 校 準 ， 每 分 析 批 應 測定 質 控 品 并 確 保 結 果 在 控 。 分 析 儀 還 需 進 行 定 期 與 非 定 期 的 保 養(yǎng) 和 維 護 。 性 能 檢 定 主 要 針 對 系 統(tǒng) 硬 件 的 技 術 性 能 指 標 ， 通 常 包 括 雜散 光 、 吸 光 度 穩(wěn) 定 性 與 準 確 度 及 線 性 范 圍 、 溫 度 準 確 度 與波 動 度 、 樣 品 和 試 劑 加 樣 的 準 確 度 與 重 復 性 、 樣 品 攜 帶 污染 率 、 臨 床 項 目 的 批 內 精 密 度 等 。 注 重 生 化 檢 測 系 統(tǒng) 的 完 整 性 和 有 效 性 ， 獲 得 有 溯 源 性 的 結 果 臨 床 生 化 檢 測 的 重 要 任 務 。 謝 謝 ！