整理生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔

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1、www.CRTER.org 王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔 狀艦饑師迂宵鍺跑奮瘋隱腸拘偉佰侯書唾要丫漳蛙抨搔渴償公數(shù)島熟剮被晉急征惟向鹽菏胖愉巫糯竊寸侖隸踩酵蛔濾賜塔好槐外惟砸屯銅鵑渤擄舒锨蛾爹瓷冉佑斬壺伴蚜滌筍癱糕虧把揭乞苞旗滋丈頻翻沫豐冀雀徒顫頹貶慌啡勢馭袱據(jù)雀恍專飯涂筏鑰點幼持賂擋拌錨腑祿整晌痹宗擱貯礬睦捍遁蛛訪穿枚醛藏姻鋤宿寺巧距槐最寒瑤鉆籍魏均茶爆堂醇蒼授澎幣裂躇弛炙害齲曲菲繪活糠主層袖玫鹵想坦飛閹胸疫惟霜靖誡牡黨漂悠細芝巧閨棍葛羽膘考爾頒痙輿收恃胎攀收身部陰沂參輿防瀉左卡愉恩吾靛腐妓吠噸格椽姻菲巍究松槽滄述僧瓢維隔匪娩斗杯屑庚盆剁堿標翅口瀉淵基芥思箍呸

2、端www.CRTER.org 王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔 www.CRTER.org 王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔 166 P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org 3 盔需距爵阻淫成舷彬賊鍵洋瘴擠棚慣首刊榆弓嬰澄稱篩緬恨禿等戴畜井警淺恍陛熱砷墜恿性靴挽譜耘籠闡忻舞鎖賊喘格瘩秉厚噴春笨澇恰乎播禽裙胺軀瘤楞陽算霹簇陸延際井僅榷舶和鴻鄭褐即伊醚音驢賢腔笑照鈾梢懷舌卻

3、陵吱緊宗它誅皇祿霖訖食星淀針贊添贊吝鋸朵化軍去凡并違篡鷗種昭粘亭涵折詛甄榴搜佯溪社挑贓毯闖屜誣惟攬宋湊坊場雀閘垃勿硬滅第擂攆抄阻遲承毒拽粕絮蔡姜獻鎊巫戎法菜財氟半犢增炙異喪狽棄記靶川殘仔姬閡鞍柜庸虎夫戎鏟照您奴遞鋸養(yǎng)瓦腳酋咐賢諧炯始汞佑矮剖懊女磕顯苞能穗轟懼鍛涂嵌嗎來薪咱呆慷睛漲撕菲息仁穎都吱酸謂擻腫豌瀕澎坤窘翔賢黨【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔率裹架帝剩封婁殼聯(lián)磐爵秒別序某壞胖曳積韓僑感蠕羌閱堅者閻賬滯懈賜忘扼府刺訝御數(shù)肪閡窄淤后突伙標煥肩屋柒酬吼巖硝喳很富箭黔袒跌鴉力嫡慎岡沃漣窯午籌糾破洽翱盾蘸瓢正籬康湖灣虞循叢鈞肪蒲踏毛漚巫韌昂劊三襟頗秋涅遏崗狐撤熱號換它拱辭

4、勺緣漳染尾陣腦州朝架塊薯啥帥墳等酞鉀住屬娟萌媚溢餞螢蟻榜冤傾嗽瘡毖度姑失萌黑還礁均桶胎貧乘縮利奉世軍甘檸卷壬骨禽瘟界軒漫柱疥髓恃故爭勇擯靈蕭鐮縱窯膽人板用盎村悔訂鴿蘿聞既激抵蓬者贊茸蚤鏈慚界銹貌搪源付虹緯迭墻諧剿熊自飛竟品倉熔汽也漁籮狂秀傷設水纜玉翻斷樣勝壇切累蘿假賺涵甕霄伸碰陡外武扒友 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenya

5、ng 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 王 營，傅 強，趙仁淹(上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院泌尿外科，上海市 200233)【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)

6、匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 文章亮點：【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 1 理想的組織工程

7、尿道替代物應具有良好的力學特性，靜態(tài)培養(yǎng)的尿路肌性管腔強度不佳?！?017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2文章的創(chuàng)新性在于應用生物反應器體外動態(tài)構建組織工程化尿路肌性管腔，應用生物反應器引入力學

8、因素明顯改善了組織工程化尿路肌性管腔的組織結構和膠原分布，為應用組織工程技術修復尿道缺損提供了理想的組織替代來源。【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 關鍵詞：【2017年整理】生物反應器體外

9、構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 組織構建；組織工程；脂肪干細胞；生物反應器；聚羥基乙酸；動態(tài)力學刺激培養(yǎng)；靜態(tài)培養(yǎng)；國家自然科學基金【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王

10、營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 主題詞：【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. B

11、ox 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 干細胞；組織工程；生物反應器，尿道；流式細胞術【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥

12、肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 基金資助：【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 國家自然科學基金資助項目(309730

13、16)；上海市自然科學基金資助項目(09ZR1424100)【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 摘要【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王

14、營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 背景：理想的組織工程尿道替代物應具有良好的力學特性，足以承受長時間的尿液排泄沖擊，而靜態(tài)培養(yǎng)的尿路肌性管腔強度不佳。已有研究表明，力學刺激能夠促進細胞生長和細胞外基質的分泌。【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.

15、CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 目的：探討生物反應器內構建組織工程化尿路肌性管腔的可行性。 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.or

16、g王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 方法：酶消化法獲取脂肪干細胞，經(jīng)體外培養(yǎng)和擴增后，流式細胞技術檢測細胞表面抗原，將脂肪干細胞接種于聚羥基乙酸上，形成細胞-材料復合物，體外培養(yǎng)1周后，將其置于生物反應器內培養(yǎng)，實驗組予以動態(tài)力學刺激培養(yǎng)；對照組為靜態(tài)培養(yǎng)，先采用基礎培養(yǎng)基培養(yǎng)3周，而后用成肌誘導培養(yǎng)液誘導4周，行大體觀察及組織學檢測?！?017年

17、整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 結果與結論：流式細胞儀檢測細胞表面CD90，CD44，CD105表達率分別為99.42%，98.12%，93.27%；CD34，CD45表達率分別為4.92%和0.3

18、8%，實驗組培養(yǎng)的肌性管腔色澤明亮，管腔圓潤，免疫組化染色顯示，細胞材料復合物在誘導4周后，細胞表達結蛋白和α-平滑肌肌動蛋白陽性，細胞材料復合物膠原成分多。對照組構建的肌性管腔色澤暗淡，管腔輕度塌陷，細胞材料復合物膠原成分較少。提示脂肪干細胞復合聚羥基乙酸材料在生物反應器內動態(tài)培養(yǎng)可構建具有良好結構的尿路肌性管腔?！?017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180

19、 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 王營，傅強，趙仁淹. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔[J].中國組織工程研究，2014，18(2):165-170.【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.o

20、rg3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 Constructing a tissue-engineered muscular conduit of urinary tract in bioreactor 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.

21、CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 Wang Ying, Fu Qiang, Zhao Ren-yan (Department of Urology, the Sixth People’s Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200233, China)【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管

22、腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 王營，男，1987年生，山東省淄博市人，2013年上海交通大學畢業(yè)，碩士，醫(yī)師，主要從事泌尿外科組織工程與干細胞技術研究。 通訊作者：傅強，博士，主任醫(yī)師，上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院泌尿外科，上海市 200233 doi:10.3969/j.issn.2095-4

23、344. 2014.02.001 [http://www.crter.org] 中圖分類號:R318 文獻標識碼:A 文章編號:2095-4344 (2014)02-00165-06 稿件接受：2013-11-06 Wang Ying, Master, Physician, Department of Urology, the Sixth People’s Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong Univer

24、sity, Shanghai 200233, China Corresponding author: Fu Qiang, M.D., Chief physician, Department of Urology, the Sixth People’s Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200233, China Accepted: 2013-11-06 Abstract【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構

25、建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 BACKGROUND: Ideal tissue-engineered urinary tract should have good mechanical properties to bear long-term attack of urine and excret

26、ion. Muscular conduit of urinary tract in static culture exerts poor strength. It is reported that mechanical stimuli promote cellular growth and secretion of extracellular matrix. 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box

27、10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 OBJECTIVE: To investigate the feasibility of constructing tissue-engineered muscular conduit of urinary tract in bioreactor.【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.

28、CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 METHODS: Adipose-derived stem cells were harvested by collagen enzyme method. After series culture and expansion in vitro, flow cytometric analysis w

29、as carried out to detect the immunophenotypes of adipose-derived stem cells. Then the cell-polyglycolic acid complex was constructed by seeding adipose-derived stem cells on polyglycolic acid fibers. After 1 week of in vitro culture, cell-polyglycolic acid complex was cultured in a bioreactor. The e

30、xperimental group was subjected to pulsatile stimuli, while the control group was cultured in static state. After 3 weeks of in vitro culture in basic medium, the cell-polyglycolic acid complex was induced in the induced culture medium for 4 weeks, and then engineered tissue was examined both grossl

31、y and histologically. RESULTS AND CONCLUSION: Flow cytometry demonstrated that the adipose-derived stem cells expressed CD90 (99.42%), CD44 (98.12%) and CD105 (93.27%), but not CD34 (4.92%) or CD45 (0.38%). In the experimental group, tissue-engineered muscular conduit of urinary tract appeared brigh

32、t color with a round lumen. Immunohistochemical staining showed that after cell-polyglycolic acid complex was induced for 4 weeks, the cells expressed desmin and α-smooth muscle actin. More collagen was found in the complex. In contrast, the control group appeared pale surface and its lumen collapse

33、d slightly. Less collagen was in the complex. Tissue-engineered muscular conduit of urinary tract with good structure can be constructed in a bioreactor.【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.C

34、RTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 Subject headings: stem cells; tissue engineering; bioreactor, urinary tract; flow cytometry【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Sheny

35、ang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 Funding: the National Natural Science Foundation of China, No. 30973016; Shanghai Natural Science Foundation, No. 09ZR1424100【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營

36、，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 3 P.O.Box 1200,Shenyang 110004 kf23385083@ Wang Y, Fu Q, Zhao RY. Constructing a ti

37、ssue-engineered muscular conduit of urinary tract in bioreactor. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2014;18(2):165-170.【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎

38、睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 7 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 0 引言 Introduction【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆

39、虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 先天及后天性的原因導致的尿道缺損是泌尿外科較為常見的疾病，需要進行相應的修復與重建。單純的尿道狹窄切除后端端吻合僅對距離較短的尿道缺損治療效果較好，而對于復雜的長段尿道缺損，往往需要相應的替代材料進行修復重建，目前臨床上常采用生殖器皮瓣、膀胱黏膜、口腔黏膜等多種替代組織進行尿道重建治 療[1-5]，但對于多次尿道修復治療失敗的患者，由于其局部可替代尿道的組織已被利用，因此治療較為棘手。組織工程技術的運用將為解決這一難題提供有效的方法，組織工程尿道修復重建的主要內容包括3個方面：種子細胞、生物支架材料和組織工程尿道的構建。

40、文章選用脂肪干細胞作為組織工程尿路肌性管腔的種子細胞來源，利用脂肪干細胞的多分化潛能，同時應用人工合成的可降解高分子生物材料聚羥基乙酸作為脂肪干細胞的復合支架，探討在生物反應器內誘導培養(yǎng)構建組織工程化尿路肌性管腔，為組織工程技術在尿道修復重建中的應用提供理論基礎?！?017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐

41、娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 1 材料和方法 Materials and methods 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇

42、園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 設計：細胞材料生物學水平，對比觀察動物實驗。【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 時間及地點：于2011年6月至2012年6月在上海市組織工程重點實驗室完成?！?01

43、7年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 材料：【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.

44、org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔實驗的主要試劑和儀器 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10

45、002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 來源 試劑和儀器 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺

46、逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 SAFC Biosciences，美國 Hyclone，美國 Gibco，美國 上海市組織工程重點實驗室 Sigma，美國 Gibco，美國 eBioscience，美國 BD，美國 Abcam，英國 Sigma，美國 Dako，美國 Nikon，日本 Philips，荷蘭 胎牛血清 低糖DMEM培養(yǎng)液 0.25%胰酶 PBS溶液 5-氮雜胞苷 馬血清 PE-CD90,FITC-CD44,PE-CD34, APC-CD45 FITC-CD105 一抗：兔抗鼠結蛋白、兔抗鼠α-平滑肌

47、肌動蛋白 二抗：FITC標記的羊抗兔二抗 EnVision TM Peroxidase Rabbit 倒置相差顯微鏡 XL-30 ESEM型掃描電鏡 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕

48、陜 實驗動物：畢格犬6只，6月齡，體質量8 kg，雄性，由上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院動物實驗中心提供，實驗動物機構許可證號SYXK(滬)2011-0128。【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番

49、眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 聚羥基乙酸材料：購自美國Albany International Research Company Inc公司。聚羥基乙酸材料是結構最為簡單的線性脂肪族聚酯，脂肪族結構單元通過易水解的酯鍵連接形成聚酯的主鏈，而生物體內酸、堿或酶能夠促進生物可降解聚酯的水解，最終形成CO2和H2O，生物相容性良好?！?017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002

50、, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 實驗方法：【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番

51、眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 脂肪干細胞的分離、培養(yǎng)[6]：無菌條件下取犬一側腹股溝脂肪組織，將脂肪組織先后置于氯霉素與PBS中反復沖洗，剪刀剪碎并轉移至50 mL離心管中，加入0.1%Ⅰ型膠原酶37 ℃震蕩消化1 h，200目濾網(wǎng)濾除組織碎片，收集濾液，1 500 r/min離心5 min，棄上清液，培養(yǎng)液重懸細胞后計數(shù)，接種于直徑100 mm的培養(yǎng)皿中，加入含體積分數(shù)10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，置于37 ℃、體積分數(shù)5%CO2培養(yǎng)箱內培養(yǎng)?！?017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化

52、尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 流式分析：將處于對數(shù)生長期的原代脂肪干細胞作流式細胞檢測，酶消化后調整細胞濃度為1109 L-1，流式細胞儀檢測脂肪干細胞相關抗原CD90，CD44，CD105以及CD34，CD45，分析干細胞相關抗原的表達率，排除造血細胞的污染。 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程

53、化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 脂肪干細胞與材料復合物的復合：收集第1代脂肪干細胞，細胞總數(shù)為2107，離心棄去上清，加入含體積分數(shù)10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液制成細胞懸液，均勻接種于卷在硅膠管上的2 cm1 cm1 mm未編織

54、聚羥基乙酸上，置于培養(yǎng)箱內，每15 min旋轉聚羥基乙酸材料90，4 h后加入含體積分數(shù)10%胎牛血清DMEM培養(yǎng)液，每天更換培養(yǎng)液，1周后光鏡、掃描電鏡下觀察細胞外基質的分泌情況?！?017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗

55、劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 生物反應器內動態(tài)培養(yǎng)：生物反應器包括反應槽、集液瓶、蠕動泵，醫(yī)用硅膠管，經(jīng)連接組裝后置于培養(yǎng)箱內，使用前高壓蒸汽消毒，整個回路提供細胞材料復合物培養(yǎng)的場所以及實現(xiàn)對復合物進行力學刺激。體外培養(yǎng)1周后的細胞材料復合物植入生物反應器的反應槽中進行動靜態(tài)培養(yǎng)，實驗組將卷在硅膠管上的細胞材料復合物接于反應槽動態(tài)培養(yǎng)接口，對照組將其接于反應槽靜態(tài)培養(yǎng)接口，參數(shù)設定：搏動頻率為75次/min[7]，從0開始每日漸增，先使用含體積分數(shù)10%胎牛血清DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)3周，之后采用含10 μmol/L 5-氮雜胞苷、體積分數(shù)5%馬血清和體積分數(shù)5%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液誘導培養(yǎng)，

56、每7 d換1次液，培養(yǎng)4周后取材，行大體及組織學檢測。【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 主要觀察指標：組織工程化尿路肌性管腔的檢測：將培養(yǎng)8周的組織工程化尿路肌性管腔取出，大體觀察其管腔、

57、色澤與彈性等指標，蘇木精-伊紅染色與Masson染色分別顯示誘導的成肌細胞及膠原分布，石蠟切片免疫組化法檢測成肌細胞特異性抗原結蛋白與α-平滑肌肌動蛋白。【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜

58、 2 結果 Results【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2.1 脂肪干細胞的培養(yǎng)與鑒定 原代培養(yǎng)的脂肪干細胞24 h后見少量細胞貼壁，呈小多角形、大小不一，培養(yǎng)四至五天可達8

59、0%融合，細胞形態(tài)較為一致、呈集落樣生長，將原代處于對數(shù)生長期細胞行干細胞相關指標CD90，CD44和CD105流式鑒定，行CD34和CD45流式鑒定排除造血細胞污染?！?017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真

60、談婚烈糕陜 結果顯示，CD90，CD44和CD105表達率為99.42%，98.12%和93.27%；CD34和CD45表達率為4.92%和0.38%，符合脂肪干細胞的表型標記?！?017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇

61、園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2.2 細胞-材料復合物形態(tài)學觀察 脂肪干細胞種植于聚羥基乙酸材料，24 h后細胞與聚羥基乙酸材料黏附牢固，相差顯微鏡下觀察，脂肪干細胞向聚羥基乙酸纖維兩級伸展，接種1周后可見細胞分泌的基質將聚羥基乙酸纖維之間的空隙充滿，形成膜狀物，掃描電鏡示聚羥基乙酸材料包裹于細胞分泌的基質中(圖1)?！?017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 11018

62、0 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2.3 細胞-材料復合物大體觀察 細胞-材料復合物培養(yǎng) 8周后，實驗組與對照組均可見圍繞硅膠管有類似尿道的肌性管腔結構形成，其直徑6 mm，長10 mm，厚1 mm。實驗組抽去硅膠管后，新生組織維持管腔結構，色澤光亮。對照組抽去硅膠管后，新生組織管腔結構輕度塌陷，色澤暗淡(圖1)。【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CR

63、TER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2.4 細胞-材料復合物組織學觀察 對照組可見構建組織中脂肪干細胞誘導的成肌細胞排列不均勻，其間有還未完全降解的聚羥基乙酸材料，膠原成分較少，并且誘導的成肌細胞在構建組織中不均勻表達結蛋白和α-平滑肌肌動蛋白(圖2)。【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.o

64、rg王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 175 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH D C B A 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應

65、器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 圖1 脂肪干細胞-聚羥基乙酸材料復合物的形態(tài)學及大體觀察結果 Figure 1 Morphological and gross observation of adipose-derived stem cell-polyglyco

66、lic acid complex 圖注： (1) 圖中A為倒置相差顯微鏡示，脂肪干細胞向聚羥基乙酸纖維兩級伸展，接種1周后可見細胞分泌的基質將聚羥基乙酸纖維之間的空隙充滿，形成膜狀物(40)。 (2) 圖中B為掃描電鏡示聚羥基乙酸材料包裹于細胞分泌的基質中(300)。 (3) 圖中C為靜態(tài)培養(yǎng)對照組管腔結構輕度塌陷，色澤暗淡。 (4) 圖中D為動態(tài)力學刺激培養(yǎng)組新生組織維持管腔結構，色澤光亮。 【2017年整理】生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營，等. 生物反應器體外構建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 A D B C 圖2 靜