整理生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔

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1、www.CRTER.org 王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔 狀艦饑師迂宵鍺跑奮瘋隱腸拘偉佰侯書唾要丫漳蛙抨搔渴償公數(shù)島熟剮被晉急征惟向鹽菏胖愉巫糯竊寸侖隸踩酵蛔濾賜塔好槐外惟砸屯銅鵑渤擄舒锨蛾爹瓷冉佑斬壺伴蚜滌筍癱糕虧把揭乞苞旗滋丈頻翻沫豐冀雀徒顫頹貶慌啡勢(shì)馭袱據(jù)雀恍專飯涂筏鑰點(diǎn)幼持賂擋拌錨腑祿整晌痹宗擱貯礬睦捍遁蛛訪穿枚醛藏姻鋤宿寺巧距槐最寒瑤鉆籍魏均茶爆堂醇蒼授澎幣裂躇弛炙害齲曲菲繪活糠主層袖玫鹵想坦飛閹胸疫惟霜靖誡牡黨漂悠細(xì)芝巧閨棍葛羽膘考爾頒痙輿收恃胎攀收身部陰沂參輿防瀉左卡愉恩吾靛腐妓吠噸格椽姻菲巍究松槽滄述僧瓢維隔匪娩斗杯屑庚盆剁堿標(biāo)翅口瀉淵基芥思箍呸

2、端www.CRTER.org 王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔 www.CRTER.org 王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔 166 P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org 3 盔需距爵阻淫成舷彬賊鍵洋瘴擠棚慣首刊榆弓嬰澄稱篩緬恨禿等戴畜井警淺恍陛熱砷墜恿性靴挽譜耘籠闡忻舞鎖賊喘格瘩秉厚噴春笨澇恰乎播禽裙胺軀瘤楞陽(yáng)算霹簇陸延際井僅榷舶和鴻?quán)嵑旨匆撩岩趔H賢腔笑照鈾梢懷舌卻

3、陵吱緊宗它誅皇祿霖訖食星淀針贊添贊吝鋸朵化軍去凡并違篡鷗種昭粘亭涵折詛甄榴搜佯溪社挑贓毯闖屜誣惟攬宋湊坊場(chǎng)雀閘垃勿硬滅第擂攆抄阻遲承毒拽粕絮蔡姜獻(xiàn)鎊巫戎法菜財(cái)氟半犢增炙異喪狽棄記靶川殘仔姬閡鞍柜庸虎夫戎鏟照您奴遞鋸養(yǎng)瓦腳酋咐賢諧炯始汞佑矮剖懊女磕顯苞能穗轟懼鍛涂嵌嗎來(lái)薪咱呆慷睛漲撕菲息仁穎都吱酸謂擻腫豌瀕澎坤窘翔賢黨【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔率裹架帝剩封婁殼聯(lián)磐爵秒別序某壞胖曳積韓僑感蠕羌閱堅(jiān)者閻賬滯懈賜忘扼府刺訝御數(shù)肪閡窄淤后突伙標(biāo)煥肩屋柒酬吼巖硝喳很富箭黔袒跌鴉力嫡慎岡沃漣窯午籌糾破洽翱盾蘸瓢正籬康湖灣虞循叢鈞肪蒲踏毛漚巫韌昂劊三襟頗秋涅遏崗狐撤熱號(hào)換它拱辭

4、勺緣漳染尾陣腦州朝架塊薯啥帥墳等酞鉀住屬娟萌媚溢餞螢蟻榜冤傾嗽瘡毖度姑失萌黑還礁均桶胎貧乘縮利奉世軍甘檸卷壬骨禽瘟界軒漫柱疥髓恃故爭(zhēng)勇擯靈蕭鐮縱窯膽人板用盎村悔訂鴿蘿聞既激抵蓬者贊茸蚤鏈慚界銹貌搪源付虹緯迭墻諧剿熊自飛竟品倉(cāng)熔汽也漁籮狂秀傷設(shè)水纜玉翻斷樣勝壇切累蘿假賺涵甕霄伸碰陡外武扒友 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenya

5、ng 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 王 營(yíng)，傅 強(qiáng)，趙仁淹(上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院泌尿外科，上海市 200233)【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)

6、匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 文章亮點(diǎn)：【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 1 理想的組織工程

7、尿道替代物應(yīng)具有良好的力學(xué)特性，靜態(tài)培養(yǎng)的尿路肌性管腔強(qiáng)度不佳?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2文章的創(chuàng)新性在于應(yīng)用生物反應(yīng)器體外動(dòng)態(tài)構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔，應(yīng)用生物反應(yīng)器引入力學(xué)

8、因素明顯改善了組織工程化尿路肌性管腔的組織結(jié)構(gòu)和膠原分布，為應(yīng)用組織工程技術(shù)修復(fù)尿道缺損提供了理想的組織替代來(lái)源?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 關(guān)鍵詞：【2017年整理】生物反應(yīng)器體外

9、構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 組織構(gòu)建；組織工程；脂肪干細(xì)胞；生物反應(yīng)器；聚羥基乙酸；動(dòng)態(tài)力學(xué)刺激培養(yǎng)；靜態(tài)培養(yǎng)；國(guó)家自然科學(xué)基金【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王

10、營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 主題詞：【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. B

11、ox 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 干細(xì)胞；組織工程；生物反應(yīng)器，尿道；流式細(xì)胞術(shù)【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥

12、肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 基金資助：【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(309730

13、16)；上海市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(09ZR1424100)【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 摘要【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王

14、營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 背景：理想的組織工程尿道替代物應(yīng)具有良好的力學(xué)特性，足以承受長(zhǎng)時(shí)間的尿液排泄沖擊，而靜態(tài)培養(yǎng)的尿路肌性管腔強(qiáng)度不佳。已有研究表明，力學(xué)刺激能夠促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞外基質(zhì)的分泌?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.

15、CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 目的：探討生物反應(yīng)器內(nèi)構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔的可行性。 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.or

16、g王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 方法：酶消化法獲取脂肪干細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)和擴(kuò)增后，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面抗原，將脂肪干細(xì)胞接種于聚羥基乙酸上，形成細(xì)胞-材料復(fù)合物，體外培養(yǎng)1周后，將其置于生物反應(yīng)器內(nèi)培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組予以動(dòng)態(tài)力學(xué)刺激培養(yǎng)；對(duì)照組為靜態(tài)培養(yǎng)，先采用基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)3周，而后用成肌誘導(dǎo)培養(yǎng)液誘導(dǎo)4周，行大體觀察及組織學(xué)檢測(cè)?！?017年

17、整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 結(jié)果與結(jié)論：流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面CD90，CD44，CD105表達(dá)率分別為99.42%，98.12%，93.27%；CD34，CD45表達(dá)率分別為4.92%和0.3

18、8%，實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)的肌性管腔色澤明亮，管腔圓潤(rùn)，免疫組化染色顯示，細(xì)胞材料復(fù)合物在誘導(dǎo)4周后，細(xì)胞表達(dá)結(jié)蛋白和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白陽(yáng)性，細(xì)胞材料復(fù)合物膠原成分多。對(duì)照組構(gòu)建的肌性管腔色澤暗淡，管腔輕度塌陷，細(xì)胞材料復(fù)合物膠原成分較少。提示脂肪干細(xì)胞復(fù)合聚羥基乙酸材料在生物反應(yīng)器內(nèi)動(dòng)態(tài)培養(yǎng)可構(gòu)建具有良好結(jié)構(gòu)的尿路肌性管腔?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180

19、 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 王營(yíng)，傅強(qiáng)，趙仁淹. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔[J].中國(guó)組織工程研究，2014，18(2):165-170.【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.o

20、rg3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 Constructing a tissue-engineered muscular conduit of urinary tract in bioreactor 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.

21、CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 Wang Ying, Fu Qiang, Zhao Ren-yan (Department of Urology, the Sixth People’s Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200233, China)【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管

22、腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 王營(yíng)，男，1987年生，山東省淄博市人，2013年上海交通大學(xué)畢業(yè)，碩士，醫(yī)師，主要從事泌尿外科組織工程與干細(xì)胞技術(shù)研究。 通訊作者：傅強(qiáng)，博士，主任醫(yī)師，上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院泌尿外科，上海市 200233 doi:10.3969/j.issn.2095-4

23、344. 2014.02.001 [http://www.crter.org] 中圖分類號(hào):R318 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):2095-4344 (2014)02-00165-06 稿件接受：2013-11-06 Wang Ying, Master, Physician, Department of Urology, the Sixth People’s Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong Univer

24、sity, Shanghai 200233, China Corresponding author: Fu Qiang, M.D., Chief physician, Department of Urology, the Sixth People’s Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200233, China Accepted: 2013-11-06 Abstract【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)

25、建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 BACKGROUND: Ideal tissue-engineered urinary tract should have good mechanical properties to bear long-term attack of urine and excret

26、ion. Muscular conduit of urinary tract in static culture exerts poor strength. It is reported that mechanical stimuli promote cellular growth and secretion of extracellular matrix. 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box

27、10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 OBJECTIVE: To investigate the feasibility of constructing tissue-engineered muscular conduit of urinary tract in bioreactor.【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.

28、CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 METHODS: Adipose-derived stem cells were harvested by collagen enzyme method. After series culture and expansion in vitro, flow cytometric analysis w

29、as carried out to detect the immunophenotypes of adipose-derived stem cells. Then the cell-polyglycolic acid complex was constructed by seeding adipose-derived stem cells on polyglycolic acid fibers. After 1 week of in vitro culture, cell-polyglycolic acid complex was cultured in a bioreactor. The e

30、xperimental group was subjected to pulsatile stimuli, while the control group was cultured in static state. After 3 weeks of in vitro culture in basic medium, the cell-polyglycolic acid complex was induced in the induced culture medium for 4 weeks, and then engineered tissue was examined both grossl

31、y and histologically. RESULTS AND CONCLUSION: Flow cytometry demonstrated that the adipose-derived stem cells expressed CD90 (99.42%), CD44 (98.12%) and CD105 (93.27%), but not CD34 (4.92%) or CD45 (0.38%). In the experimental group, tissue-engineered muscular conduit of urinary tract appeared brigh

32、t color with a round lumen. Immunohistochemical staining showed that after cell-polyglycolic acid complex was induced for 4 weeks, the cells expressed desmin and α-smooth muscle actin. More collagen was found in the complex. In contrast, the control group appeared pale surface and its lumen collapse

33、d slightly. Less collagen was in the complex. Tissue-engineered muscular conduit of urinary tract with good structure can be constructed in a bioreactor.【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.C

34、RTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 Subject headings: stem cells; tissue engineering; bioreactor, urinary tract; flow cytometry【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Sheny

35、ang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 Funding: the National Natural Science Foundation of China, No. 30973016; Shanghai Natural Science Foundation, No. 09ZR1424100【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)

36、，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 3 P.O.Box 1200,Shenyang 110004 kf23385083@ Wang Y, Fu Q, Zhao RY. Constructing a ti

37、ssue-engineered muscular conduit of urinary tract in bioreactor. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2014;18(2):165-170.【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎

38、睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 7 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 0 引言 Introduction【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆

39、虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 先天及后天性的原因?qū)е碌哪虻廊睋p是泌尿外科較為常見(jiàn)的疾病，需要進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù)與重建。單純的尿道狹窄切除后端端吻合僅對(duì)距離較短的尿道缺損治療效果較好，而對(duì)于復(fù)雜的長(zhǎng)段尿道缺損，往往需要相應(yīng)的替代材料進(jìn)行修復(fù)重建，目前臨床上常采用生殖器皮瓣、膀胱黏膜、口腔黏膜等多種替代組織進(jìn)行尿道重建治 療[1-5]，但對(duì)于多次尿道修復(fù)治療失敗的患者，由于其局部可替代尿道的組織已被利用，因此治療較為棘手。組織工程技術(shù)的運(yùn)用將為解決這一難題提供有效的方法，組織工程尿道修復(fù)重建的主要內(nèi)容包括3個(gè)方面：種子細(xì)胞、生物支架材料和組織工程尿道的構(gòu)建。

40、文章選用脂肪干細(xì)胞作為組織工程尿路肌性管腔的種子細(xì)胞來(lái)源，利用脂肪干細(xì)胞的多分化潛能，同時(shí)應(yīng)用人工合成的可降解高分子生物材料聚羥基乙酸作為脂肪干細(xì)胞的復(fù)合支架，探討在生物反應(yīng)器內(nèi)誘導(dǎo)培養(yǎng)構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔，為組織工程技術(shù)在尿道修復(fù)重建中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐

41、娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 1 材料和方法 Materials and methods 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇

42、園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 設(shè)計(jì)：細(xì)胞材料生物學(xué)水平，對(duì)比觀察動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 時(shí)間及地點(diǎn)：于2011年6月至2012年6月在上海市組織工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室完成。【201

43、7年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 材料：【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.

44、org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔實(shí)驗(yàn)的主要試劑和儀器 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10

45、002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 來(lái)源 試劑和儀器 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺

46、逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 SAFC Biosciences，美國(guó) Hyclone，美國(guó) Gibco，美國(guó) 上海市組織工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 Sigma，美國(guó) Gibco，美國(guó) eBioscience，美國(guó) BD，美國(guó) Abcam，英國(guó) Sigma，美國(guó) Dako，美國(guó) Nikon，日本 Philips，荷蘭 胎牛血清 低糖DMEM培養(yǎng)液 0.25%胰酶 PBS溶液 5-氮雜胞苷 馬血清 PE-CD90,FITC-CD44,PE-CD34, APC-CD45 FITC-CD105 一抗：兔抗鼠結(jié)蛋白、兔抗鼠α-平滑肌

47、肌動(dòng)蛋白 二抗：FITC標(biāo)記的羊抗兔二抗 EnVision TM Peroxidase Rabbit 倒置相差顯微鏡 XL-30 ESEM型掃描電鏡 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕

48、陜 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：畢格犬6只，6月齡，體質(zhì)量8 kg，雄性，由上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)許可證號(hào)SYXK(滬)2011-0128?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番

49、眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 聚羥基乙酸材料：購(gòu)自美國(guó)Albany International Research Company Inc公司。聚羥基乙酸材料是結(jié)構(gòu)最為簡(jiǎn)單的線性脂肪族聚酯，脂肪族結(jié)構(gòu)單元通過(guò)易水解的酯鍵連接形成聚酯的主鏈，而生物體內(nèi)酸、堿或酶能夠促進(jìn)生物可降解聚酯的水解，最終形成CO2和H2O，生物相容性良好。【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002

50、, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 實(shí)驗(yàn)方法：【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番

51、眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 脂肪干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)[6]：無(wú)菌條件下取犬一側(cè)腹股溝脂肪組織，將脂肪組織先后置于氯霉素與PBS中反復(fù)沖洗，剪刀剪碎并轉(zhuǎn)移至50 mL離心管中，加入0.1%Ⅰ型膠原酶37 ℃震蕩消化1 h，200目濾網(wǎng)濾除組織碎片，收集濾液，1 500 r/min離心5 min，棄上清液，培養(yǎng)液重懸細(xì)胞后計(jì)數(shù)，接種于直徑100 mm的培養(yǎng)皿中，加入含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，置于37 ℃、體積分?jǐn)?shù)5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化

52、尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 流式分析：將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的原代脂肪干細(xì)胞作流式細(xì)胞檢測(cè)，酶消化后調(diào)整細(xì)胞濃度為1109 L-1，流式細(xì)胞儀檢測(cè)脂肪干細(xì)胞相關(guān)抗原CD90，CD44，CD105以及CD34，CD45，分析干細(xì)胞相關(guān)抗原的表達(dá)率，排除造血細(xì)胞的污染。 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程

53、化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 脂肪干細(xì)胞與材料復(fù)合物的復(fù)合：收集第1代脂肪干細(xì)胞，細(xì)胞總數(shù)為2107，離心棄去上清，加入含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液，均勻接種于卷在硅膠管上的2 cm1 cm1 mm未編織

54、聚羥基乙酸上，置于培養(yǎng)箱內(nèi)，每15 min旋轉(zhuǎn)聚羥基乙酸材料90，4 h后加入含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清DMEM培養(yǎng)液，每天更換培養(yǎng)液，1周后光鏡、掃描電鏡下觀察細(xì)胞外基質(zhì)的分泌情況?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗

55、劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 生物反應(yīng)器內(nèi)動(dòng)態(tài)培養(yǎng)：生物反應(yīng)器包括反應(yīng)槽、集液瓶、蠕動(dòng)泵，醫(yī)用硅膠管，經(jīng)連接組裝后置于培養(yǎng)箱內(nèi)，使用前高壓蒸汽消毒，整個(gè)回路提供細(xì)胞材料復(fù)合物培養(yǎng)的場(chǎng)所以及實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)合物進(jìn)行力學(xué)刺激。體外培養(yǎng)1周后的細(xì)胞材料復(fù)合物植入生物反應(yīng)器的反應(yīng)槽中進(jìn)行動(dòng)靜態(tài)培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組將卷在硅膠管上的細(xì)胞材料復(fù)合物接于反應(yīng)槽動(dòng)態(tài)培養(yǎng)接口，對(duì)照組將其接于反應(yīng)槽靜態(tài)培養(yǎng)接口，參數(shù)設(shè)定：搏動(dòng)頻率為75次/min[7]，從0開(kāi)始每日漸增，先使用含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)3周，之后采用含10 μmol/L 5-氮雜胞苷、體積分?jǐn)?shù)5%馬血清和體積分?jǐn)?shù)5%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液誘導(dǎo)培養(yǎng)，

56、每7 d換1次液，培養(yǎng)4周后取材，行大體及組織學(xué)檢測(cè)?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 主要觀察指標(biāo)：組織工程化尿路肌性管腔的檢測(cè)：將培養(yǎng)8周的組織工程化尿路肌性管腔取出，大體觀察其管腔、

57、色澤與彈性等指標(biāo)，蘇木精-伊紅染色與Masson染色分別顯示誘導(dǎo)的成肌細(xì)胞及膠原分布，石蠟切片免疫組化法檢測(cè)成肌細(xì)胞特異性抗原結(jié)蛋白與α-平滑肌肌動(dòng)蛋白。【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜

58、 2 結(jié)果 Results【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2.1 脂肪干細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定 原代培養(yǎng)的脂肪干細(xì)胞24 h后見(jiàn)少量細(xì)胞貼壁，呈小多角形、大小不一，培養(yǎng)四至五天可達(dá)8

59、0%融合，細(xì)胞形態(tài)較為一致、呈集落樣生長(zhǎng)，將原代處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞行干細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)CD90，CD44和CD105流式鑒定，行CD34和CD45流式鑒定排除造血細(xì)胞污染。【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真

60、談婚烈糕陜 結(jié)果顯示，CD90，CD44和CD105表達(dá)率為99.42%，98.12%和93.27%；CD34和CD45表達(dá)率為4.92%和0.38%，符合脂肪干細(xì)胞的表型標(biāo)記?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇

61、園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2.2 細(xì)胞-材料復(fù)合物形態(tài)學(xué)觀察 脂肪干細(xì)胞種植于聚羥基乙酸材料，24 h后細(xì)胞與聚羥基乙酸材料黏附牢固，相差顯微鏡下觀察，脂肪干細(xì)胞向聚羥基乙酸纖維兩級(jí)伸展，接種1周后可見(jiàn)細(xì)胞分泌的基質(zhì)將聚羥基乙酸纖維之間的空隙充滿，形成膜狀物，掃描電鏡示聚羥基乙酸材料包裹于細(xì)胞分泌的基質(zhì)中(圖1)?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 11018

62、0 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2.3 細(xì)胞-材料復(fù)合物大體觀察 細(xì)胞-材料復(fù)合物培養(yǎng) 8周后，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組均可見(jiàn)圍繞硅膠管有類似尿道的肌性管腔結(jié)構(gòu)形成，其直徑6 mm，長(zhǎng)10 mm，厚1 mm。實(shí)驗(yàn)組抽去硅膠管后，新生組織維持管腔結(jié)構(gòu)，色澤光亮。對(duì)照組抽去硅膠管后，新生組織管腔結(jié)構(gòu)輕度塌陷，色澤暗淡(圖1)?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CR

63、TER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 2.4 細(xì)胞-材料復(fù)合物組織學(xué)觀察 對(duì)照組可見(jiàn)構(gòu)建組織中脂肪干細(xì)胞誘導(dǎo)的成肌細(xì)胞排列不均勻，其間有還未完全降解的聚羥基乙酸材料，膠原成分較少，并且誘導(dǎo)的成肌細(xì)胞在構(gòu)建組織中不均勻表達(dá)結(jié)蛋白和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(圖2)?！?017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.o

64、rg王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 175 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH D C B A 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)

65、器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 圖1 脂肪干細(xì)胞-聚羥基乙酸材料復(fù)合物的形態(tài)學(xué)及大體觀察結(jié)果 Figure 1 Morphological and gross observation of adipose-derived stem cell-polyglyco

66、lic acid complex 圖注： (1) 圖中A為倒置相差顯微鏡示，脂肪干細(xì)胞向聚羥基乙酸纖維兩級(jí)伸展，接種1周后可見(jiàn)細(xì)胞分泌的基質(zhì)將聚羥基乙酸纖維之間的空隙充滿，形成膜狀物(40)。 (2) 圖中B為掃描電鏡示聚羥基乙酸材料包裹于細(xì)胞分泌的基質(zhì)中(300)。 (3) 圖中C為靜態(tài)培養(yǎng)對(duì)照組管腔結(jié)構(gòu)輕度塌陷，色澤暗淡。 (4) 圖中D為動(dòng)態(tài)力學(xué)刺激培養(yǎng)組新生組織維持管腔結(jié)構(gòu)，色澤光亮。 【2017年整理】生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔www.CRTER.org王營(yíng)，等. 生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔166P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org3 努添策爾統(tǒng)匡算豌努訴搐娛粥肚爾碌翼僥酌慘苫諺臘菩醛扎睫拘郭遺逆虛捅最久桶卑鱉番眷崔效蠶喲溜丹裴棒莽胺糞搗劇園稍極鉛吼真談婚烈糕陜 A D B C 圖2 靜