鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵實(shí)驗(yàn)報(bào)告

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實(shí)驗(yàn)一 鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵 一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵? 1、 掌握紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本操作； 2、 掌握鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵的原理和方法； 3、 掌握吸收曲線繪制及最大吸收波長(zhǎng)選擇； 4、 掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及應(yīng)用。 二．實(shí)驗(yàn)原理 鄰二氮菲（1,10—鄰二氮雜菲）是一種有機(jī)配位劑，可與Fe2+形成紅色配位離子 在pH=3~9范圍內(nèi)，該反應(yīng)能夠迅速完成，生成的紅色配位離子在510nm波長(zhǎng)附近有一吸收峰，摩爾吸收系數(shù)為1.1104，反應(yīng)十分靈敏，F(xiàn)e2+ 濃度與吸光度符合光吸收定律，適合于微量鐵的測(cè)定。 實(shí)驗(yàn)中，采用pH=4.5-5的緩沖溶液保持標(biāo)準(zhǔn)系列溶液及樣品溶液的酸度；采用鹽酸羥胺還原標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液及樣品溶液中的Fe3+并防止測(cè)定過(guò)程中Fe2+被空氣氧化。 三．實(shí)驗(yàn)儀器與試劑 1. 752型分光光度計(jì) 2. 標(biāo)準(zhǔn)鐵儲(chǔ)備溶液（1.0010-3mol/L） 3. 鄰二氮菲溶液（0.15%，新鮮配制） 4. 鹽酸羥胺溶液（10%，新鮮配制） 5. 醋酸鹽緩沖溶液 6. 50ml容量瓶7個(gè) 7. 5ml移液管4只 8．1cm玻璃比色皿2個(gè) 9. 鐵樣品溶液 四．實(shí)驗(yàn)步驟： 1、 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液及樣品溶液配制 按照下表配制鐵標(biāo)準(zhǔn)系列溶液及樣品溶液 編號(hào) 1 2 3 4 5 6 7（標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液） 1x10-3M標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液 0.00ml 1.00ml 2.00ml 3.00ml 4.00ml 5.00ml 2.50ml 10％鹽酸羥胺溶液 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 0.15％鄰二氮菲溶液 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 醋酸鹽緩沖溶液 5.00ml 5.ooml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 說(shuō)明 以上溶液均用移液管移取至50ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度并搖勻。 系列標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液濃度 0 0.02mol/ml 0.04mol/ml 0.06mol/ml 0.08mol/ml 0.10mol/ml ------- 2、 吸收曲線繪制 用1cm比色皿，以1號(hào)溶液作為參比溶液，測(cè)定4號(hào)溶液在各個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度，在坐標(biāo)紙上以測(cè)定的吸光度為縱坐標(biāo)，波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，繪制吸收曲線，并從吸光曲線上找出最大吸收波長(zhǎng)。 測(cè)定波長(zhǎng) 480nm 482nm 484nm 486nm 488nm 490nm 492nm 494nm 496nm 498nm 吸光度 0.636 0.637 0.639 0.641 0.644 0.652 0.656 0.656 0.658 0.673 測(cè)定波長(zhǎng) 500nm 502nm 504nm 506nm 508nm 510nm 512nm 514nm 516nm 518nm 吸光度 0.678 0.69 0.692 0.699 0.7 0.682 0.679 0.671 0.661 0.637 測(cè)定波長(zhǎng) 520nm 522nm 524nm 526nm 528nm 530nm 532nm 534nm 536nm 538nm 吸光度 0.613 0.601 0.566 0.534 0.503 0.468 0.445 0.396 0.362 0.33 選擇的最大吸收波長(zhǎng)為:508(nm) 繪圖如下： 3、 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 在選定最大吸收波長(zhǎng)處，用1cm比色皿，以1號(hào)溶液作為參比溶液，分別測(cè)定2至7號(hào)溶液的吸光度，在坐標(biāo)紙上以吸光度平均值為縱坐標(biāo)，系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)制圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 編號(hào) 2 3 4 5 6 7（樣品溶液） 吸光度A1 0.236 0.463 0.7 0.936 1.127 0.573 吸光度A2 0.236 0.463 0.7 0.936 1.127 0.573 吸光度A3 0.236 0.463 0.7 0.936 1.127 0.573 A平均值 0.236 0.463 0.7 0.936 1.127 0.573 繪圖如下： 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理： 1. 樣品溶液中鐵含量計(jì)算 C讀取值=（0.573-0.0159）/11.257=0.04952 Cx=C讀取值50.00/2.50=0.4920=0.99(mol/ml)=0.99x10-3(mol/L) 2.摩爾吸光系數(shù)計(jì)算 ε=(A2－A1)/(c2－c1)=(0.466—0.242)/(0.0410-3—0.0210-3)=11.275mL/(molcm) =1.1275x104 L/(mol.cm) 實(shí)驗(yàn)討論： 在本次實(shí)驗(yàn)中，比色皿在換裝不同濃度的溶液時(shí)，必須用待測(cè)的溶液潤(rùn)洗至少三次，裝入四分之三或五分之四左右，放入分光光度計(jì)樣品室前，必須用吸收紙將表面擦拭干凈，每更換一次比色皿要及時(shí)調(diào)零，等示數(shù)穩(wěn)定后，再讀取數(shù)據(jù)。我們組繪制吸收曲線時(shí)，最開(kāi)始選擇的吸收波長(zhǎng)是502nm，但是經(jīng)過(guò)我們重新實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)第二次數(shù)據(jù)和第一次數(shù)據(jù)完全不同，吸收波長(zhǎng)也由502nm變?yōu)榱?08nm,可能是由于第一次實(shí)驗(yàn)操作不規(guī)范，再加上儀器的不穩(wěn)定造成的。