2019-2020年高中生物 專題5 課題3 血紅蛋白的提取和分離創(chuàng)新演練大沖關每課一練 新人教版選修1.doc
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2019-2020年高中生物 專題5 課題3 血紅蛋白的提取和分離創(chuàng)新演練大沖關每課一練 新人教版選修1 一、選擇題(每小題4分,共32分) 1.用凝膠色譜法分離蛋白質時,相對分子質量大的蛋白質( ) A.路程較長,移動速度較慢 B.路程較長,移動速度較快 C.路程較短,移動速度較慢 D.路程較短,移動速度較快 解析:凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質量的大小分離蛋白質的有效方法,當相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠時,相對分子質量較小的蛋白質容易進入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動速度較慢;而相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快。 答案:D 2.凝膠色譜分離法分離蛋白質時,凝膠的種類較多,但其作用的共同點是( ) A.改變蛋白質分子通過凝膠時的路徑 B.吸附一部分蛋白質,從而影響蛋白質分子的移動速度 C.將酶或細胞固定在凝膠中 D.與蛋白質分子進行化學反應,從而影響其移動速度 解析:凝膠的種類很多,但所有凝膠均是一些微小的多孔球體,小球內(nèi)部有許多貫穿的通道,由于不同蛋白質相對分子質量不同,在凝膠中走過的路徑不同,因而得以分離。 答案:A 3.相對分子質量不同的蛋白質在凝膠中的分離過程可表示為下圖中哪一個( ) 解析:根據(jù)分子篩效應可知,相對分子質量較大的蛋白質分子通過的路程較短,移動速度較快;相對分子質量較小的蛋白質分子通過的路程較長,移動速度較慢。因此,樣品中相對分子質量較大的蛋白質先流出,相對分子質量小的分子后流出。 答案:B 4.血紅蛋白的提取和分離一般分為四步,符合要求的是( ) A.粗分離→樣品處理→純化→純度鑒定 B.粗分離→純化→樣品處理→純度鑒定 C.樣品處理→粗分離→純化→純度鑒定 D.純化→純度鑒定→粗分離→樣品處理 解析:血紅蛋白的提取和分離一般可分為四大步,包括樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。 答案:C 5.樣品的加入和洗脫的操作不正確的是( ) A.加樣前,打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面的下面[ B.加樣后,打開下端出口,使樣品滲入凝膠柱內(nèi) C.等樣品完全進入凝膠層后,關閉下端出口 D.用吸管小心地將1 mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端,不要破壞凝膠面 解析:加樣前,打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊。 答案:A 6.使用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳過程中,不同蛋白質的電泳遷移率完全取決于 ( ) A.電荷的多少 B.分子的大小 C.肽鏈的多少 D.分子形狀的差異 解析:由于SDS能與各種蛋白質形成蛋白質—SDS復合物,SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量,因而掩蓋了不同蛋白質間的電荷差異,使電泳遷移率完全取決于分子的大小。 答案:B 7.(xx廣東高考)以下關于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是( ) A.洗滌紅細胞時,使用生理鹽水可防止紅細胞破裂 B.豬成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核,提純時雜蛋白較少 C.血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測 D.在凝膠色譜法分離過程中,血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動慢 解析:豬的成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核,提純時雜蛋白較少,是提純血紅蛋白的理想材料。提純血紅蛋白分四步:紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析,其中洗滌紅細胞時,要用生理鹽水反復洗滌,既要將紅細胞洗滌干凈,又要不破壞紅細胞,然后再用蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂,血紅蛋白是根據(jù)相對分子質量的大小來分離的,相對分子質量大的蛋白質移動速度較快。血紅蛋白的顏色可用于觀察紅色區(qū)帶的移動情況,據(jù)此判斷分離效果 答案:D 8.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質分子,其分子大小、電荷的性質和數(shù)量情況如圖所示,下列有關蛋白質分離的敘述正確的是( ) A.將樣品裝入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋內(nèi), 則分子丙也保留在袋內(nèi) B.若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質,則分子甲移動速度最快 C.若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min,分子戊存在于沉淀中,則分子甲也存在于沉淀中 D.若用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質分子,則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠 解析:分子丙的相對分子質量大于分子乙,所以若分子乙保留在袋內(nèi),則丙也保留在袋內(nèi);甲相對分子質量最小,容易進入凝膠內(nèi)部,則移動速度最慢;分子戊的相對分子質量大于甲,所以若分子戊存在于沉淀中,分子甲不一定存在于沉淀中;SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳過程中,蛋白質的遷移速度完全取決于分子的大小,因此,分子甲與丙形成的電泳帶相距最遠。 答案:A 二、非選擇題(共18分) 9.(18分)蛋白質分子中,氨基酸的α-氨基和α-羧基雖然大部分都能結合形成肽鍵,但是蛋白質分子內(nèi)仍含有各種酸性基團和堿性基團,如肽鏈末端的α-氨基和α-羧基、天冬氨酸和谷氨酸殘基中的羧基、賴氨酸和組氨酸殘基中的各種堿性基團,所以蛋白質是兩性電解質。在酸性溶液中,堿性基團的解離程度增大,使蛋白質帶正電荷;在堿性溶液中,酸性基團的解離程度加強,使蛋白質帶負電荷。當溶液到達某一pH時,蛋白質可因內(nèi)部酸性或堿性基團的解離程度相等而呈等電狀態(tài),這時溶液的pH叫做蛋白質的等電點。不處于等電點狀態(tài)的蛋白質分子的正、負電荷量是不相同的。試回答下列問題。 (1)多數(shù)蛋白質的等電點近于5,一般含堿性基團較多的蛋白質的等電點________(“偏高”還是“偏低”) (2)根據(jù)等電點的不同,可用________方法將不同種類的蛋白質分子分開。 (3)簡述根據(jù)等電點分離不同種類的蛋白質分子的原理。 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)在血紅蛋白提取和分離實驗中,對分離得到的血紅蛋白溶液要進行透析,除去相對分子質量較小的雜質蛋白質。請利用所給的實驗材料對該透析實驗進行驗證。 實驗目的:驗證透析的基本原理和操作。 實驗原理: ①_______________________________________________________________________; ②_______________________________________________________________________。 實驗材料:①透析管或透析袋?、跓、鄄AО? ④電磁攪拌器 ⑤試管及試管架 實驗試劑:①1 mL血紅蛋白溶液?、?00 mL的物質的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0) 實驗步驟: ①________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________; ②________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析:含堿性基團較多的蛋白質溶液,在pH近于5時解離程度較大,蛋白質帶正電荷。要使蛋白質內(nèi)部酸性和堿性基團解離程度相等,呈等電狀態(tài),必須提高溶液的pH,使酸性基團解離程度增大,故蛋白質的等電點提高。根據(jù)等電點不同,可以利用電泳法將特定的蛋白質分離出來。 透析是應用半透膜的選擇性,去除分子質量相對較小的雜質,從而達到對血紅蛋白的粗分離。 答案:(1)偏高 (2)電泳 (3)調節(jié)電泳槽中緩沖液的pH,使某種蛋白質處于等電點狀態(tài),而其他蛋白質帶有電荷,在電場作用下,帶有正、負電荷的蛋白質分別移向兩極,而不帶電荷的蛋白質留在原處。 (4)實驗原理:①蛋白質是大分子物質,不能透過透析袋,而小分子物質可以自由透過 ②在分離提純蛋白質的過程中,常利用透析的方法使蛋白質與其中夾雜的小分子物質分開 實驗步驟:①取1 mL的血紅蛋白溶液裝入透析袋中,將透析袋放入盛有300 mL的物質的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液的燒杯中 ②不斷更換燒杯中的緩沖液,并用電磁攪拌器不斷攪動緩沖液,以加速透析過程,透析12 h- 配套講稿:
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