6第6章沉淀反應(yīng)

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1、第六章第六章 沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)第六章第六章 沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)第一節(jié)第一節(jié) 沉淀反應(yīng)的特點(diǎn)沉淀反應(yīng)的特點(diǎn)第二節(jié)液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)第二節(jié)液體內(nèi)沉淀試驗(yàn) 一、絮狀沉淀試驗(yàn)一、絮狀沉淀試驗(yàn) 二、免疫濁度測(cè)定二、免疫濁度測(cè)定第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn) 一、單向擴(kuò)散試驗(yàn)一、單向擴(kuò)散試驗(yàn) 二、雙向擴(kuò)散試驗(yàn)二、雙向擴(kuò)散試驗(yàn)第四節(jié)第四節(jié) 免疫電泳技術(shù)免疫電泳技術(shù) 一、對(duì)流免疫電泳一、對(duì)流免疫電泳 二、火箭免疫電泳二、火箭免疫電泳 三、免疫電泳三、免疫電泳 四、免疫固定電泳四、免疫固定電泳思考題思考題小結(jié)小結(jié)第一節(jié)第一節(jié) 沉淀反應(yīng)原理及特點(diǎn)沉淀反應(yīng)原理及特點(diǎn)沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)（precipitation）

2、是指可溶性是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在適當(dāng)條件下發(fā)生特抗原與相應(yīng)抗體在適當(dāng)條件下發(fā)生特異性結(jié)合而出現(xiàn)的沉淀現(xiàn)象異性結(jié)合而出現(xiàn)的沉淀現(xiàn)象, ,其特性與其特性與經(jīng)典的抗原抗體反應(yīng)相同。經(jīng)典的抗原抗體反應(yīng)相同。形成肉眼可見(jiàn)的大的免疫形成肉眼可見(jiàn)的大的免疫復(fù)合物。沉淀線或沉淀環(huán)復(fù)合物。沉淀線或沉淀環(huán)的觀察以及免疫比濁法中的觀察以及免疫比濁法中的終點(diǎn)法就是測(cè)定此階段的終點(diǎn)法就是測(cè)定此階段形成的復(fù)合物形成的復(fù)合物第一階段第一階段第二階段第二階段沉淀反應(yīng)分兩個(gè)階段沉淀反應(yīng)分兩個(gè)階段抗原抗體特異性結(jié)合，快抗原抗體特異性結(jié)合，快速但不可見(jiàn)。免疫比濁法速但不可見(jiàn)。免疫比濁法中的速率法就是利用此階中的速率法就是利用此

3、階段測(cè)定免疫復(fù)合物形成的段測(cè)定免疫復(fù)合物形成的速率。速率。免疫免疫濁度濁度測(cè)定測(cè)定絮狀絮狀沉淀沉淀試驗(yàn)試驗(yàn)單向單向擴(kuò)散擴(kuò)散試驗(yàn)試驗(yàn)雙向雙向擴(kuò)散擴(kuò)散試驗(yàn)試驗(yàn)對(duì)流免疫電泳對(duì)流免疫電泳火箭免疫電泳火箭免疫電泳免疫電泳免疫電泳免疫固定電泳免疫固定電泳液體內(nèi)沉液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)淀試驗(yàn)?zāi)z內(nèi)沉凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)淀試驗(yàn)?zāi)z免疫凝膠免疫電泳技術(shù)電泳技術(shù)沉淀反應(yīng)可分三類沉淀反應(yīng)可分三類第二節(jié)液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)第二節(jié)液體內(nèi)沉淀試驗(yàn) 絮狀沉淀試驗(yàn)是將抗原與相應(yīng)抗體混絮狀沉淀試驗(yàn)是將抗原與相應(yīng)抗體混合，在電解質(zhì)存在的條件下，抗原抗體合，在電解質(zhì)存在的條件下，抗原抗體結(jié)合形成肉眼可見(jiàn)的絮狀沉淀物。結(jié)合形成肉眼可見(jiàn)的絮狀沉淀物。方法

4、受抗原抗體比例的影響非常明顯方法受抗原抗體比例的影響非常明顯應(yīng)用于測(cè)定抗原抗體反應(yīng)的最適比例應(yīng)用于測(cè)定抗原抗體反應(yīng)的最適比例( (三種類型三種類型) )一、一、 絮狀沉淀試驗(yàn)絮狀沉淀試驗(yàn)抗原稀釋法：抗原最適比例抗原稀釋法：抗原最適比例抗體稀釋法：抗體最適比例抗體稀釋法：抗體最適比例方陣滴定法：抗原抗體最適比例方陣滴定法：抗原抗體最適比例絮狀沉淀試驗(yàn)絮狀沉淀試驗(yàn)表表6-1 6-1 最適比方陣測(cè)定法最適比方陣測(cè)定法抗體抗體稀釋度稀釋度1/51/51/101/101/201/201/401/401/801/80抗原稀釋度抗原稀釋度1/101/10+ + + +1/201/20+ + + + + +

5、+1/401/40+ + + + + + + + + +1/801/80+ + + + + + + + + +1/1601/160+ + + + + + + + + + + + + +1/3201/320+ + + + + + + + + + +1/6401/640+ + + + + +對(duì)照對(duì)照 當(dāng)當(dāng)可溶性抗原可溶性抗原與相應(yīng)抗體特異結(jié)合，二者比例與相應(yīng)抗體特異結(jié)合，二者比例合適時(shí)，在特殊的緩沖液中它們快速形成一定合適時(shí)，在特殊的緩沖液中它們快速形成一定大小的抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液體出現(xiàn)濁度。大小的抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液體出現(xiàn)濁度。利用現(xiàn)代光學(xué)測(cè)量?jī)x器對(duì)濁度進(jìn)行測(cè)定從而檢利用現(xiàn)代光學(xué)測(cè)量?jī)x

6、器對(duì)濁度進(jìn)行測(cè)定從而檢測(cè)抗原含量測(cè)抗原含量。 原原 理理二、免疫濁度測(cè)定二、免疫濁度測(cè)定1.1.抗原抗體的比例：反應(yīng)體系中保持抗體過(guò)量抗原抗體的比例：反應(yīng)體系中保持抗體過(guò)量2.2.抗體的質(zhì)量抗體的質(zhì)量 ：特異性強(qiáng)，效價(jià)高，親和力：特異性強(qiáng)，效價(jià)高，親和力強(qiáng)并使用強(qiáng)并使用R R型抗體型抗體 3.3.抗原抗體反應(yīng)液的最適抗原抗體反應(yīng)液的最適PHPH為為6.56.58.5 8.5 4.4.使用增濁劑使用增濁劑影響因素影響因素免疫濁度測(cè)定免疫濁度測(cè)定1.1.透射免疫比濁法透射免疫比濁法2.2.散射免疫比濁法散射免疫比濁法 3.3.免疫膠乳比濁法免疫膠乳比濁法 分類分類免疫濁度測(cè)定免疫濁度測(cè)定第三節(jié)凝膠

7、內(nèi)沉淀試驗(yàn)第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn) 可溶性抗原和相應(yīng)抗體在凝膠中擴(kuò)散，形成可溶性抗原和相應(yīng)抗體在凝膠中擴(kuò)散，形成濃度梯度，在抗原抗體相遇并且濃度比例適濃度梯度，在抗原抗體相遇并且濃度比例適當(dāng)?shù)奈恢眯纬扇庋劭梢?jiàn)的沉淀線或沉淀環(huán)。當(dāng)?shù)奈恢眯纬扇庋劭梢?jiàn)的沉淀線或沉淀環(huán)。 常用的凝膠有瓊脂、瓊脂糖、葡聚糖或聚丙常用的凝膠有瓊脂、瓊脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝膠。烯酰胺凝膠。原理原理原理：抗體與待測(cè)的抗原原理：抗體與待測(cè)的抗原, ,在兩者比例合適的部位結(jié)在兩者比例合適的部位結(jié)合形成沉淀環(huán)。合形成沉淀環(huán)。環(huán)的大小與抗原的濃度成正環(huán)的大小與抗原的濃度成正相關(guān)。相關(guān)。技術(shù)要點(diǎn)：將抗體混入技術(shù)要點(diǎn)：將抗體混入0.9%

8、0.9%瓊瓊脂糖內(nèi)（脂糖內(nèi)（5050），未凝固前傾），未凝固前傾注成平板，凝固后打孔（直徑注成平板，凝固后打孔（直徑3 35mm 5mm ），孔中加入抗原溶），孔中加入抗原溶液和不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，置濕液和不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，置濕盒內(nèi)盒內(nèi)37,2437,2448h 48h 觀察孔周觀察孔周圍是否出現(xiàn)沉淀環(huán)。圍是否出現(xiàn)沉淀環(huán)。定量試驗(yàn)定量試驗(yàn) 一、單向擴(kuò)散試驗(yàn)一、單向擴(kuò)散試驗(yàn) （平板法）（平板法）傾注平板打孔加樣傾注平板打孔加樣 放置放置3737242448h48h觀察沉淀環(huán)觀察沉淀環(huán) 單向擴(kuò)散試驗(yàn)（平板法）單向擴(kuò)散試驗(yàn)（平板法）沉淀環(huán)的直徑與待測(cè)標(biāo)本含量?jī)煞N計(jì)算方法沉淀環(huán)的直徑與待測(cè)標(biāo)本含量?jī)煞N計(jì)

9、算方法ManciniMancini曲線：曲線：大分子抗原（大分子抗原（IgMIgM） 時(shí)間擴(kuò)散時(shí)間擴(kuò)散48h48h，常數(shù)常數(shù)K KCdCd2 2普通坐標(biāo)紙曲線普通坐標(biāo)紙曲線 FaheyFahey曲線：曲線：小分子抗原（小分子抗原（IgG,IgAIgG,IgA）擴(kuò)散時(shí)間擴(kuò)散時(shí)間24h24h常數(shù)常數(shù)K KlogCd logCd 半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙曲線半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙曲線 C C為抗原濃度，為抗原濃度， d d為沉淀環(huán)直徑為沉淀環(huán)直徑單向擴(kuò)散試驗(yàn)單向擴(kuò)散試驗(yàn) （平板法）（平板法）T T1 1為為161624h24h；T T2 2為為242448h48h；T T3 3為為48h48h以以上上, ,可見(jiàn)可見(jiàn)T T

10、3 3為直線，為直線，T T1 1為反拋物線為反拋物線t t1 1為為161624h24h；t t2 2為為242448h48h；t t3 3為為48h48h以上以上, ,可見(jiàn)可見(jiàn)t t1 1為直線，為直線，t t3 3為反拋物線為反拋物線ManciniMancini曲線曲線FaheyFahey曲線曲線影響因素：影響因素：抗體質(zhì)量抗體質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線 ，質(zhì)控血清，質(zhì)控血清結(jié)果與真實(shí)含量不符結(jié)果與真實(shí)含量不符單克隆抗體；多克隆抗體；單克隆抗體；多克隆抗體；可出現(xiàn)假性降低與增高可出現(xiàn)假性降低與增高 雙環(huán)現(xiàn)象雙環(huán)現(xiàn)象不同擴(kuò)散率抗原性相同的兩不同擴(kuò)散率抗原性相同的兩個(gè)組分個(gè)組分 單向擴(kuò)散試驗(yàn)單向擴(kuò)

11、散試驗(yàn)上排為上排為5 5個(gè)不同濃度的參考品；個(gè)不同濃度的參考品；下排為患者血清，下排右下排為患者血清，下排右2 2為異常病為異常病理血清理血清 單向擴(kuò)散試驗(yàn)單向擴(kuò)散試驗(yàn) （平板法）（平板法） 原理：將抗原抗體原理：將抗原抗體分別加在瓊脂糖分別加在瓊脂糖不同的對(duì)應(yīng)孔中，不同的對(duì)應(yīng)孔中，兩者在凝膠中自兩者在凝膠中自由擴(kuò)散，在比例由擴(kuò)散，在比例合適處形成白色合適處形成白色沉淀線。沉淀線。 技術(shù)要點(diǎn)：平板玻璃上傾注一層均技術(shù)要點(diǎn)：平板玻璃上傾注一層均勻的瓊脂糖薄層，凝固后打孔，孔勻的瓊脂糖薄層，凝固后打孔，孔徑為徑為3mm3mm，孔間距在，孔間距在3 35 mm5 mm之間，之間，在相對(duì)的孔中加入抗原

12、或抗體，放在相對(duì)的孔中加入抗原或抗體，放置濕盒置濕盒3718371824h 24h 后，觀察孔周后，觀察孔周圍是否出現(xiàn)沉淀環(huán)。圍是否出現(xiàn)沉淀環(huán)。鑒定抗原抗體的最基本、最常見(jiàn)的方法之一鑒定抗原抗體的最基本、最常見(jiàn)的方法之一 二、雙向擴(kuò)散試驗(yàn)二、雙向擴(kuò)散試驗(yàn) （平板法）（平板法）應(yīng)用應(yīng)用1.1.抗原或抗體的存在與抗原或抗體的存在與否以及相對(duì)含量的估計(jì)否以及相對(duì)含量的估計(jì) 2.2.抗原或抗體相對(duì)分子抗原或抗體相對(duì)分子量的估計(jì)量的估計(jì) 雙向擴(kuò)散試驗(yàn)雙向擴(kuò)散試驗(yàn) （平板法）（平板法）應(yīng)用應(yīng)用3.3.抗原性質(zhì)的分析抗原性質(zhì)的分析 雙向擴(kuò)散試驗(yàn)雙向擴(kuò)散試驗(yàn) （平板法）（平板法）應(yīng)用應(yīng)用4.4.抗體效價(jià)的滴定

13、抗體效價(jià)的滴定 5.5.抗原或抗體純度抗原或抗體純度的鑒定的鑒定 雙向擴(kuò)散試驗(yàn)雙向擴(kuò)散試驗(yàn) （平板法）（平板法）第四節(jié)免疫電泳技術(shù)第四節(jié)免疫電泳技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)： 1.1.加快反應(yīng)的速度。加快反應(yīng)的速度。 2.2.提高了靈敏度。提高了靈敏度。3.3.增加了分辨率。增加了分辨率。 電泳分析電泳分析沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)的高度特異性的高度特異性電泳技術(shù)的高電泳技術(shù)的高分辨率、快速、分辨率、快速、微量微量免疫電泳技術(shù)免疫電泳技術(shù)原理：雙向擴(kuò)散原理：雙向擴(kuò)散+ + 電泳電泳比雙向擴(kuò)散試驗(yàn)靈比雙向擴(kuò)散試驗(yàn)靈敏度提高敏度提高8 8 1616倍倍技術(shù)要點(diǎn)：制備技術(shù)要點(diǎn)：制備1.2%1.2%巴

14、比妥巴比妥瓊脂凝膠板，在其上成對(duì)打瓊脂凝膠板，在其上成對(duì)打孔，孔徑孔，孔徑3mm3mm，孔距，孔距6 mm6 mm，于陰極側(cè)孔內(nèi)加待測(cè)血清，于陰極側(cè)孔內(nèi)加待測(cè)血清，陽(yáng)性側(cè)孔加抗血清，電泳條陽(yáng)性側(cè)孔加抗血清，電泳條件件3 34mA/cm4mA/cm，30min30min1h1h。一、對(duì)流免疫電泳一、對(duì)流免疫電泳通電通電蛋白質(zhì)抗原常蛋白質(zhì)抗原常帶較強(qiáng)的負(fù)電帶較強(qiáng)的負(fù)電荷，在電場(chǎng)中荷，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)向正極移動(dòng)抗體球蛋白抗體球蛋白帶負(fù)電荷較少，帶負(fù)電荷較少，籍電滲作用向籍電滲作用向負(fù)極泳動(dòng)負(fù)極泳動(dòng) 對(duì)流免疫電泳對(duì)流免疫電泳結(jié)果分析：結(jié)果分析：無(wú)沉淀線出現(xiàn)則表明無(wú)相無(wú)沉淀線出現(xiàn)則表明無(wú)相應(yīng)的抗原。應(yīng)

15、的抗原。沉淀線位于抗原抗體孔中沉淀線位于抗原抗體孔中間，說(shuō)明兩者比例較適合。間，說(shuō)明兩者比例較適合。沉淀線偏向抗原孔一方，沉淀線偏向抗原孔一方，表示抗體濃度抗原，反表示抗體濃度抗原，反之，則是抗體濃度抗原之，則是抗體濃度抗原濃度。濃度。對(duì)流免疫電泳對(duì)流免疫電泳電泳時(shí)凝膠中抗體不移動(dòng)，樣品孔中的電泳時(shí)凝膠中抗體不移動(dòng)，樣品孔中的抗原向正極泳動(dòng)，隨著抗原量的逐漸減抗原向正極泳動(dòng)，隨著抗原量的逐漸減少，抗原泳動(dòng)的基底區(qū)越來(lái)越窄，抗原少，抗原泳動(dòng)的基底區(qū)越來(lái)越窄，抗原抗體分子復(fù)合物形成的沉淀線逐漸變窄，抗體分子復(fù)合物形成的沉淀線逐漸變窄，形成一個(gè)形狀如火箭的不溶性復(fù)合物沉形成一個(gè)形狀如火箭的不溶性復(fù)合

16、物沉淀峰，抗體濃度固定時(shí)，峰的高度與抗淀峰，抗體濃度固定時(shí)，峰的高度與抗原量呈正相關(guān)。原量呈正相關(guān)。 原理原理單向免疫擴(kuò)散電泳單向免疫擴(kuò)散電泳, ,定量檢測(cè)技術(shù)定量檢測(cè)技術(shù)二、火箭免疫電泳二、火箭免疫電泳1.2%1.2%巴比妥瓊脂糖約巴比妥瓊脂糖約5555，加入適量抗血，加入適量抗血清，混勻后制板，打孔，孔內(nèi)加待測(cè)樣品，清，混勻后制板，打孔，孔內(nèi)加待測(cè)樣品，樣品孔放負(fù)極側(cè)，樣品孔放負(fù)極側(cè)， 6h6h后觀察瓊脂板上沉后觀察瓊脂板上沉淀峰，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出待測(cè)樣品濃度。淀峰，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出待測(cè)樣品濃度。技術(shù)要點(diǎn)技術(shù)要點(diǎn)火箭免疫電泳火箭免疫電泳1.1.瓊脂（無(wú)電滲或電滲很小的）影響火箭形狀不規(guī)

17、瓊脂（無(wú)電滲或電滲很小的）影響火箭形狀不規(guī)則。則。2.2.電泳終點(diǎn)時(shí)間的確定。電泳終點(diǎn)時(shí)間的確定。3.3.標(biāo)本數(shù)量多時(shí)應(yīng)先通電后加樣標(biāo)本數(shù)量多時(shí)應(yīng)先通電后加樣, ,防止寬底峰形防止寬底峰形. .4.IgG4.IgG定量時(shí)，可用甲醛與定量時(shí)，可用甲醛與IgGIgG上的氨基結(jié)合（甲酰上的氨基結(jié)合（甲?；窒穗姖B作用?；?，抵消了電滲作用。 影響因素影響因素火箭免疫電泳火箭免疫電泳火箭免疫電泳圖火箭免疫電泳圖為標(biāo)準(zhǔn)抗原；為標(biāo)準(zhǔn)抗原；為標(biāo)本為標(biāo)本- -+ +火箭免疫電泳示意圖火箭免疫電泳示意圖原理：區(qū)帶電泳雙向擴(kuò)散原理：區(qū)帶電泳雙向擴(kuò)散1 1、將蛋白質(zhì)抗原在凝膠中、將蛋白質(zhì)抗原在凝膠中電泳分成肉

18、眼不可見(jiàn)的若干電泳分成肉眼不可見(jiàn)的若干區(qū)帶區(qū)帶 2 2、沿電泳方向挖一與之平、沿電泳方向挖一與之平行的抗體槽，加入相應(yīng)抗血行的抗體槽，加入相應(yīng)抗血清進(jìn)行雙向擴(kuò)散清進(jìn)行雙向擴(kuò)散 。 技術(shù)要點(diǎn)：制備瓊脂板技術(shù)要點(diǎn)：制備瓊脂板打孔，加樣于孔內(nèi)，電打孔，加樣于孔內(nèi)，電泳泳2 23mA/cm 3mA/cm ，0.50.51h1h后，槽內(nèi)加入相應(yīng)抗血后，槽內(nèi)加入相應(yīng)抗血清作雙向擴(kuò)散。清作雙向擴(kuò)散。三、免疫電泳三、免疫電泳純化抗原和抗體成分的分析及正常和純化抗原和抗體成分的分析及正常和異常免疫球蛋白的識(shí)別與鑒定異常免疫球蛋白的識(shí)別與鑒定影響因素影響因素抗原抗體比例不當(dāng)抗原抗體比例不當(dāng), ,需測(cè)抗原抗體最適比

19、需測(cè)抗原抗體最適比 抗血清的的抗體譜抗血清的的抗體譜 ，混合抗血清的使用，混合抗血清的使用電泳條件直接影響分辨率電泳條件直接影響分辨率應(yīng)用應(yīng)用免疫電泳免疫電泳- -+ +免疫電泳示意圖免疫電泳示意圖免疫電泳原理，不同之處是將免疫電泳原理，不同之處是將抗血清直接加于電泳后的蛋白抗血清直接加于電泳后的蛋白質(zhì)區(qū)帶表面，抗原抗體在凝膠質(zhì)區(qū)帶表面，抗原抗體在凝膠中直接發(fā)生沉淀反應(yīng)，在適當(dāng)中直接發(fā)生沉淀反應(yīng)，在適當(dāng)位置形成抗原抗體復(fù)合物，經(jīng)位置形成抗原抗體復(fù)合物，經(jīng)染色后，可對(duì)各類免疫球蛋白染色后，可對(duì)各類免疫球蛋白及其輕鏈進(jìn)行分型及其輕鏈進(jìn)行分型 原理原理區(qū)帶電泳沉淀反應(yīng)區(qū)帶電泳沉淀反應(yīng)四、免疫固定電泳

20、四、免疫固定電泳先將患者血清或血漿在醋纖膜或先將患者血清或血漿在醋纖膜或瓊脂上作區(qū)帶電泳，根據(jù)血清蛋瓊脂上作區(qū)帶電泳，根據(jù)血清蛋白質(zhì)的電荷不同將其分開(kāi)，然后白質(zhì)的電荷不同將其分開(kāi)，然后將將IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM、輕鏈和輕鏈和輕輕鏈的抗血清加于分離的蛋白質(zhì)泳鏈的抗血清加于分離的蛋白質(zhì)泳道，參考泳道則加蛋白質(zhì)固定劑，道，參考泳道則加蛋白質(zhì)固定劑，用于區(qū)帶對(duì)照，作用一定時(shí)間后用于區(qū)帶對(duì)照，作用一定時(shí)間后洗去游離蛋白質(zhì)，染色后則可見(jiàn)洗去游離蛋白質(zhì)，染色后則可見(jiàn)被固定的相應(yīng)被固定的相應(yīng)M M蛋白成分。蛋白成分。 技術(shù)要點(diǎn)技術(shù)要點(diǎn)免疫固定電泳免疫固定電泳左圖為左圖為IgG IgG 型型,

21、 , 中圖為中圖為IgG IgG 型，右為正常型，右為正常 SP G AM SP G AM SPG AM 免疫固定電泳示意圖免疫固定電泳示意圖分辨率強(qiáng)，敏感度高，操作周期短，僅分辨率強(qiáng)，敏感度高，操作周期短，僅需數(shù)小時(shí)，結(jié)果易于分析。需數(shù)小時(shí)，結(jié)果易于分析。 應(yīng)用應(yīng)用最常用于最常用于M M蛋白的鑒定與分型，也蛋白的鑒定與分型，也用于尿中本周氏蛋白質(zhì)的檢測(cè)與用于尿中本周氏蛋白質(zhì)的檢測(cè)與、 分型，腦脊液中寡克隆蛋白的檢分型，腦脊液中寡克隆蛋白的檢測(cè)與分型。測(cè)與分型。優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)免疫固定電泳免疫固定電泳1.1.主要用于血液、體液中蛋白質(zhì)的測(cè)定。主要用于血液、體液中蛋白質(zhì)的測(cè)定。2.2.優(yōu)點(diǎn)：穩(wěn)定性好，敏

22、感度高，精確度高，簡(jiǎn)便快優(yōu)點(diǎn)：穩(wěn)定性好，敏感度高，精確度高，簡(jiǎn)便快速，易于自動(dòng)化，無(wú)放射性核素污染，適合大批量速，易于自動(dòng)化，無(wú)放射性核素污染，適合大批量標(biāo)本檢測(cè)。標(biāo)本檢測(cè)。3.3.對(duì)流免疫電泳與火箭免疫電泳技術(shù)由于電滲的緣對(duì)流免疫電泳與火箭免疫電泳技術(shù)由于電滲的緣故已不推薦使用。故已不推薦使用。4.4.免疫電泳擴(kuò)散時(shí)間長(zhǎng)，影響因素多，結(jié)果不易分免疫電泳擴(kuò)散時(shí)間長(zhǎng)，影響因素多，結(jié)果不易分析。析。5.5.免疫固定電泳分辨力強(qiáng)，敏感度高，結(jié)果易于分免疫固定電泳分辨力強(qiáng)，敏感度高，結(jié)果易于分析，常用于析，常用于M M蛋白的鑒定與分型。蛋白的鑒定與分型。 沉淀反應(yīng)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用沉淀反應(yīng)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中

23、的應(yīng)用1.1.什么是沉淀反應(yīng)？什么是沉淀反應(yīng)？2.2.沉淀反應(yīng)的特點(diǎn)？沉淀反應(yīng)的特點(diǎn)？3.3.免疫濁度法的原理、方法與分類？免疫濁度法的原理、方法與分類？4.4.單向擴(kuò)散試驗(yàn)的原理和應(yīng)用？單向擴(kuò)散試驗(yàn)的原理和應(yīng)用？5.5.免疫固定電泳的原理及臨床應(yīng)用價(jià)值？免疫固定電泳的原理及臨床應(yīng)用價(jià)值？6.6.何謂何謂ManciniMancini曲線？曲線？7.7.何謂何謂FaheyFahey曲線？曲線？8.8.影響免疫比濁測(cè)定的因素有哪些？影響免疫比濁測(cè)定的因素有哪些？9.9.抗原性質(zhì)分析出現(xiàn)哪三種結(jié)果現(xiàn)象？結(jié)果解釋？抗原性質(zhì)分析出現(xiàn)哪三種結(jié)果現(xiàn)象？結(jié)果解釋？10.10.自動(dòng)化免疫比濁法發(fā)展趨勢(shì)和應(yīng)用前景

24、？自動(dòng)化免疫比濁法發(fā)展趨勢(shì)和應(yīng)用前景？思考題思考題 沉淀反應(yīng)是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在適當(dāng)條件下發(fā)沉淀反應(yīng)是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在適當(dāng)條件下發(fā)生特異性結(jié)合而出的沉淀現(xiàn)象生特異性結(jié)合而出的沉淀現(xiàn)象. .根據(jù)沉淀反應(yīng)介質(zhì)和根據(jù)沉淀反應(yīng)介質(zhì)和檢測(cè)方法的不同，將其分為液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)、凝膠內(nèi)檢測(cè)方法的不同，將其分為液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)、凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)和凝膠免疫電泳試驗(yàn)三大基本類型。沉淀試驗(yàn)和凝膠免疫電泳試驗(yàn)三大基本類型。 免疫濁法度測(cè)定為液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)；單向擴(kuò)散試驗(yàn)平免疫濁法度測(cè)定為液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)；單向擴(kuò)散試驗(yàn)平板法是一種定量的凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)，免疫電泳技術(shù)是板法是一種定量的凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)，免疫電泳技術(shù)是電泳分析與沉淀反應(yīng)的結(jié)合產(chǎn)物，常見(jiàn)的有對(duì)流免疫電泳分析與沉淀反應(yīng)的結(jié)合產(chǎn)物，常見(jiàn)的有對(duì)流免疫電泳、火箭免疫電泳、免疫電泳、免疫固定電泳等。電泳、火箭免疫電泳、免疫電泳、免疫固定電泳等。小小 結(jié)結(jié)