生物化學(xué)與分子生物學(xué)：第06章 生物氧化

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1、目錄目錄第6章生物氧化生物氧化 Biological Oxidation目錄目錄物質(zhì)在生物體內(nèi)進(jìn)行氧化稱(chēng)物質(zhì)在生物體內(nèi)進(jìn)行氧化稱(chēng)生物氧化生物氧化(biological oxidation)，主要指糖、脂肪、蛋白質(zhì)等在體內(nèi)分解，主要指糖、脂肪、蛋白質(zhì)等在體內(nèi)分解時(shí)逐步釋放能量，最終生成時(shí)逐步釋放能量，最終生成CO2 和和 H2O的過(guò)程。的過(guò)程。糖糖 脂肪脂肪 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) CO2和和H2O O2能量能量ADP+PiATP熱能熱能n生物氧化的概念生物氧化的概念 目錄目錄n生物氧化與體外氧化之相同點(diǎn)生物氧化與體外氧化之相同點(diǎn) 生物氧化中物質(zhì)的氧化方式有加氧、脫氫、生物氧化中物質(zhì)的氧化方式有加氧、脫氫

2、、失電子，遵循氧化還原反應(yīng)的一般規(guī)律。失電子，遵循氧化還原反應(yīng)的一般規(guī)律。 物質(zhì)在體內(nèi)外氧化時(shí)所消耗的氧量、最終物質(zhì)在體內(nèi)外氧化時(shí)所消耗的氧量、最終產(chǎn)物產(chǎn)物(CO2，H2O)和釋放能量均相同。和釋放能量均相同。目錄目錄 反應(yīng)環(huán)境溫和，酶促反應(yīng)逐步反應(yīng)環(huán)境溫和，酶促反應(yīng)逐步進(jìn)行，能量逐步釋放，能量容進(jìn)行，能量逐步釋放，能量容易捕獲，易捕獲，ATP生成效率高。生成效率高。 通過(guò)加水脫氫反應(yīng)使物質(zhì)能間通過(guò)加水脫氫反應(yīng)使物質(zhì)能間接獲得氧，并增加脫氫的機(jī)會(huì)；接獲得氧，并增加脫氫的機(jī)會(huì)；脫下的氫與氧結(jié)合產(chǎn)生脫下的氫與氧結(jié)合產(chǎn)生H2O，有機(jī)酸脫羧產(chǎn)生有機(jī)酸脫羧產(chǎn)生CO2。n 生物氧化與體外氧化之不同點(diǎn)生物氧

3、化與體外氧化之不同點(diǎn)生物氧化生物氧化體外氧化體外氧化 能量突然釋放。能量突然釋放。 物質(zhì)中的碳和氫直接物質(zhì)中的碳和氫直接氧結(jié)合生成氧結(jié)合生成CO2H2O 。目錄目錄糖原糖原 三酯酰甘油三酯酰甘油 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 葡萄糖葡萄糖 脂酸脂酸+甘油甘油 氨基酸氨基酸 乙酰乙酰CoA 呼吸鏈呼吸鏈 ADP+Pi ATP n 生物氧化的一般過(guò)程生物氧化的一般過(guò)程目錄目錄 生物氧化實(shí)質(zhì)生物氧化實(shí)質(zhì) 是氧化磷酸化，是是氧化磷酸化，是NADHNADH、FADHFADH2 2上的電上的電子通過(guò)一系列的電子傳遞體傳遞給氧生成子通過(guò)一系列的電子傳遞體傳遞給氧生成水水，并將釋放的能量，驅(qū)動(dòng)使，并將釋放的能量，驅(qū)動(dòng)使ADP

4、ADP磷酸化生磷酸化生成成ATPATP的過(guò)程。的過(guò)程。目錄目錄第一節(jié)第一節(jié) 氧化呼吸鏈?zhǔn)怯删哂须娮觽鬟f氧化呼吸鏈?zhǔn)怯删哂须娮觽鬟f功能的復(fù)合體組成功能的復(fù)合體組成目錄目錄生物體將生物體將NADH+H+和和FADH2徹底氧化徹底氧化生成水和生成水和ATP的過(guò)程與細(xì)胞的呼吸有關(guān)，需的過(guò)程與細(xì)胞的呼吸有關(guān)，需要消耗氧，參與氧化還原反應(yīng)的組分由含輔要消耗氧，參與氧化還原反應(yīng)的組分由含輔助因子的多種蛋白酶復(fù)合體組成，形成一個(gè)助因子的多種蛋白酶復(fù)合體組成，形成一個(gè)連 續(xù) 的 傳 遞 鏈 ， 因 此 稱(chēng) 為連 續(xù) 的 傳 遞 鏈 ， 因 此 稱(chēng) 為 氧 化 呼 吸 鏈氧 化 呼 吸 鏈（oxidative r

5、espiratory chain）。）。n氧化呼吸鏈的定義氧化呼吸鏈的定義目錄目錄指線(xiàn)粒體內(nèi)膜中按一定順序排列的一系列具指線(xiàn)粒體內(nèi)膜中按一定順序排列的一系列具有電子傳遞功能的酶復(fù)合體，發(fā)揮傳遞電子或氫有電子傳遞功能的酶復(fù)合體，發(fā)揮傳遞電子或氫的作用。這一系列傳遞氫的酶蛋白或輔助因子稱(chēng)的作用。這一系列傳遞氫的酶蛋白或輔助因子稱(chēng)為遞氫體，傳遞電子的稱(chēng)之為電子傳遞體。氧化為遞氫體，傳遞電子的稱(chēng)之為電子傳遞體。氧化呼吸鏈又稱(chēng)呼吸鏈又稱(chēng)電子傳遞鏈電子傳遞鏈(electron transfer chain)。n定義定義遞氫體和電子傳遞體（遞氫體和電子傳遞體（2H 2H+ + 2e）n組成組成目錄目錄酶復(fù)合

6、體酶復(fù)合體是線(xiàn)粒體內(nèi)膜氧化呼吸鏈的天然存是線(xiàn)粒體內(nèi)膜氧化呼吸鏈的天然存在形式，所含各組分具體完成電子傳遞過(guò)程。電在形式，所含各組分具體完成電子傳遞過(guò)程。電子傳遞過(guò)程釋放的能量驅(qū)動(dòng)子傳遞過(guò)程釋放的能量驅(qū)動(dòng)H+移出移出線(xiàn)粒體內(nèi)膜，線(xiàn)粒體內(nèi)膜，轉(zhuǎn)變?yōu)榭鐑?nèi)膜轉(zhuǎn)變?yōu)榭鐑?nèi)膜H+梯度梯度的能量，再用于驅(qū)動(dòng)的能量，再用于驅(qū)動(dòng)ATP的的生物合成。生物合成。 一、氧化呼吸鏈由一、氧化呼吸鏈由4種具有傳遞電子能力的種具有傳遞電子能力的復(fù)合體組成復(fù)合體組成目錄目錄人線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合體人線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合體復(fù)合體復(fù)合體酶名稱(chēng)酶名稱(chēng)質(zhì)量質(zhì)量(kD)多肽多肽鏈數(shù)鏈數(shù)功能輔基功能輔基含結(jié)合位點(diǎn)含結(jié)合位點(diǎn)復(fù)合體復(fù)合體NADH-泛

7、醌泛醌還原酶還原酶85039FMN，F(xiàn)e-SNADH（基質(zhì)側(cè)）（基質(zhì)側(cè)）CoQ（脂質(zhì)核心）（脂質(zhì)核心）復(fù)合體復(fù)合體琥珀酸琥珀酸-泛醌泛醌還原酶還原酶1404FAD，F(xiàn)e-S琥珀酸（基質(zhì)側(cè)）琥珀酸（基質(zhì)側(cè)）CoQ（脂質(zhì)核心）（脂質(zhì)核心）復(fù)合體復(fù)合體泛醌泛醌-細(xì)胞色細(xì)胞色素素C還原酶還原酶25011血紅素血紅素bL, bH, c1,Fe-SCyt c（膜間隙側(cè)）（膜間隙側(cè)）復(fù)合體復(fù)合體細(xì)胞色素細(xì)胞色素C氧氧化酶化酶16213血紅素血紅素a，a3，CuA, CuBCyt c（膜間隙側(cè)）（膜間隙側(cè)）目錄目錄 Cytcox NADH+H+ NAD+ 1/2O2+2H+ H2O 膜間腔側(cè)膜間腔側(cè) 基質(zhì)側(cè)基

8、質(zhì)側(cè) 線(xiàn)粒體內(nèi)膜線(xiàn)粒體內(nèi)膜 QH2 Q 延胡索酸延胡索酸 琥珀酸琥珀酸 4H+4H+4H+4H+Cytcox Cytcred Cytcred 4H+4H+電子傳遞鏈各復(fù)合體在線(xiàn)粒體內(nèi)膜中的位置電子傳遞鏈各復(fù)合體在線(xiàn)粒體內(nèi)膜中的位置目錄目錄 復(fù)合體復(fù)合體又稱(chēng)又稱(chēng)NADH-泛醌還原酶（泛醌還原酶（NADH脫脫氫酶）。氫酶）。 復(fù)合體復(fù)合體電子傳遞：電子傳遞：NADHFMNFe-S CoQ Fe-S CoQ 每傳遞每傳遞2個(gè)電子可將個(gè)電子可將4個(gè)個(gè)H+從內(nèi)膜基質(zhì)側(cè)泵到從內(nèi)膜基質(zhì)側(cè)泵到胞漿側(cè)，胞漿側(cè)，復(fù)合體復(fù)合體有質(zhì)子泵功能有質(zhì)子泵功能。（一）復(fù)合體（一）復(fù)合體作用是將作用是將NADH+H+中的電子傳

9、中的電子傳遞給泛醌遞給泛醌(ubiquinone)目錄目錄NAD+和和NADP+的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)R=H: NAD+; R=H2PO3: NADP+目錄目錄NAD+（NADP+）和）和NADH（NADPH）相互轉(zhuǎn)變）相互轉(zhuǎn)變氧化還原反應(yīng)時(shí)變化發(fā)生在氧化還原反應(yīng)時(shí)變化發(fā)生在五價(jià)氮五價(jià)氮和和三價(jià)氮三價(jià)氮之間。之間。目錄目錄FMN結(jié)構(gòu)中含結(jié)構(gòu)中含核黃素核黃素，發(fā)揮功能的部位是，發(fā)揮功能的部位是異咯異咯嗪環(huán)嗪環(huán)，氧化還原反應(yīng)時(shí)不穩(wěn)定中間產(chǎn)物是，氧化還原反應(yīng)時(shí)不穩(wěn)定中間產(chǎn)物是FMN。在。在可逆的氧化還原反應(yīng)中顯示可逆的氧化還原反應(yīng)中顯示3種分子狀態(tài)，屬于種分子狀態(tài)，屬于單、單、雙電子傳遞體。雙電子傳遞體。 目

10、錄目錄鐵硫中心鐵硫中心(Fe-S)：含鐵原子和硫原子：含鐵原子和硫原子w 它主要以它主要以 (2Fe-2S) (2Fe-2S) 或或 (4Fe-4S) (4Fe-4S) 形式存在。形式存在。無(wú)機(jī)硫無(wú)機(jī)硫目錄目錄 鐵硫蛋白鐵硫蛋白 無(wú)機(jī)硫無(wú)機(jī)硫半胱氨酸硫半胱氨酸硫目錄目錄鐵硫蛋白中輔基鐵硫蛋白中輔基鐵硫中心鐵硫中心(Fe-S)含有等量鐵原含有等量鐵原子和硫原子，其中一個(gè)鐵原子可進(jìn)行子和硫原子，其中一個(gè)鐵原子可進(jìn)行Fe2+ Fe3+e 反應(yīng)傳遞電子。反應(yīng)傳遞電子。屬于單電子傳遞體屬于單電子傳遞體。功能是將功能是將FMN的電子傳遞給泛醌的電子傳遞給泛醌 表示無(wú)機(jī)硫表示無(wú)機(jī)硫目錄目錄泛醌（輔酶泛醌（輔

11、酶Q, CoQ, Q）由多個(gè)異戊二烯連接形）由多個(gè)異戊二烯連接形成較長(zhǎng)的疏水側(cè)鏈（人成較長(zhǎng)的疏水側(cè)鏈（人CoQ10），氧化還原反應(yīng)時(shí)可），氧化還原反應(yīng)時(shí)可生成中間產(chǎn)物生成中間產(chǎn)物半醌型泛醌半醌型泛醌。內(nèi)膜中。內(nèi)膜中可移動(dòng)電子載體可移動(dòng)電子載體，在各復(fù)合體間募集并穿梭傳遞還原當(dāng)量和電子。在在各復(fù)合體間募集并穿梭傳遞還原當(dāng)量和電子。在電電子傳遞和質(zhì)子移動(dòng)子傳遞和質(zhì)子移動(dòng)的偶聯(lián)中起著的偶聯(lián)中起著核心核心作用。作用。目錄目錄NADNAD + + + 2H + 2H+ + +2e NADH + H+2e NADH + H+ + FAD(F MN)+2H FAD(FMN)H2 Fe3+ Fe2+ CoQ

12、CoQH2 總結(jié)：復(fù)合體總結(jié)：復(fù)合體中各部分遞氫、遞電子機(jī)理中各部分遞氫、遞電子機(jī)理+e-e+2H-2H目錄目錄復(fù)合體復(fù)合體的功能的功能 NADH+H+ NAD+ FMN FMNH2還原型還原型Fe-S 氧化型氧化型Fe-S QQH2目錄目錄復(fù)合體復(fù)合體: : 琥珀酸琥珀酸- -泛醌還原酶泛醌還原酶o亞基：亞基：4條條o輔酶輔酶/ /輔基：輔基： FADFAD（黃素腺嘌呤二核甘酸）黃素腺嘌呤二核甘酸） FeFe2+2+ （二）復(fù)合體（二）復(fù)合體將電子從琥珀酸傳遞到泛醌將電子從琥珀酸傳遞到泛醌目錄目錄 復(fù)合體復(fù)合體是三羧酸循環(huán)中的是三羧酸循環(huán)中的琥珀酸脫氫酶琥珀酸脫氫酶，又，又稱(chēng)稱(chēng)琥珀酸琥珀酸-

13、泛醌還原酶泛醌還原酶。 電子傳遞：電子傳遞：琥珀酸琥珀酸FAD幾種幾種Fe-S CoQ 復(fù)合體復(fù)合體沒(méi)有沒(méi)有H+泵的功能泵的功能。目錄目錄目錄目錄復(fù)合體復(fù)合體: 泛醌泛醌- -細(xì)胞色素細(xì)胞色素c c還原酶還原酶 o亞基：亞基：1010條條o輔酶輔酶/ /輔基：輔基：FeFe2+2+（細(xì)胞色素（細(xì)胞色素b b562 562 /b/b566566） FeFe2+2+（細(xì)胞色素（細(xì)胞色素c c1 1） FeFe2+2+（鐵硫蛋白）（鐵硫蛋白）（三）復(fù)合體（三）復(fù)合體將電子從還原型泛醌傳遞給細(xì)胞色素將電子從還原型泛醌傳遞給細(xì)胞色素c目錄目錄 復(fù)合體復(fù)合體又叫又叫泛醌泛醌-細(xì)胞色素細(xì)胞色素C還原酶還原酶

14、，細(xì)胞色，細(xì)胞色素素b-c1復(fù)合體，含有細(xì)胞色素復(fù)合體，含有細(xì)胞色素b(b562, b566)、細(xì)胞色素細(xì)胞色素c1和一種可移動(dòng)的鐵硫蛋白和一種可移動(dòng)的鐵硫蛋白(Rieske protein)。 泛醌泛醌從復(fù)合體從復(fù)合體、募集還原當(dāng)量和電子并穿募集還原當(dāng)量和電子并穿梭傳遞到復(fù)合體梭傳遞到復(fù)合體。 電子傳遞過(guò)程：電子傳遞過(guò)程：CoQH2(Cyt bLCyt bH) Fe-S Cytc1Cytc目錄目錄目錄目錄細(xì)胞色素細(xì)胞色素(cytochrome, Cyt) 細(xì)胞色素是一類(lèi)以細(xì)胞色素是一類(lèi)以鐵卟啉為輔基的催化電子傳鐵卟啉為輔基的催化電子傳遞的酶類(lèi)遞的酶類(lèi)，根據(jù)它們吸收光譜不同而分類(lèi)。，根據(jù)它們吸

15、收光譜不同而分類(lèi)。目錄目錄 復(fù)合體復(fù)合體的電子傳遞通的電子傳遞通過(guò)過(guò)“Q循環(huán)循環(huán)”實(shí)現(xiàn)。實(shí)現(xiàn)。 復(fù)合體復(fù)合體每傳遞每傳遞2個(gè)電個(gè)電子向內(nèi)膜胞漿側(cè)釋放子向內(nèi)膜胞漿側(cè)釋放4個(gè)個(gè)H+，復(fù)合體復(fù)合體也有也有質(zhì)子泵作用質(zhì)子泵作用。 Cyt c是是呼吸鏈唯一水呼吸鏈唯一水溶性球狀蛋白溶性球狀蛋白，不包含，不包含在復(fù)合體中。將獲得的在復(fù)合體中。將獲得的電子傳遞到復(fù)合體電子傳遞到復(fù)合體。目錄目錄 復(fù)合體復(fù)合體: 細(xì)胞色素細(xì)胞色素c c氧化酶氧化酶 (cytochrome c oxidase)(cytochrome c oxidase)o亞基：亞基：1313條條 亞基亞基I I、IIII、IIIIII由線(xiàn)粒體基

16、因編碼由線(xiàn)粒體基因編碼o輔酶輔酶/ /輔基：輔基：CuCu+ +/Cu/Cu2+2+（含（含CuCu多肽：多肽：CuCuA A） FeFe2+2+/Fe/Fe3+3+（細(xì)胞色素（細(xì)胞色素aaaa3 3） CuCu+ +/Cu/Cu2+2+（含含CuCu多肽：多肽：CuCuB B）（四）復(fù)合體（四）復(fù)合體將電子從細(xì)胞色素將電子從細(xì)胞色素C傳遞給氧傳遞給氧目錄目錄 復(fù)合體復(fù)合體又稱(chēng)又稱(chēng)細(xì)胞色素細(xì)胞色素C氧化酶氧化酶(cytochrome c oxidase)。 電子傳遞：電子傳遞：Cyt cCuACyt aCyt a3CuBO2 Cyt a3CuB形成活性雙核中心，將電子傳遞給形成活性雙核中心，將

17、電子傳遞給O2。每。每2個(gè)電子傳遞過(guò)程使個(gè)電子傳遞過(guò)程使2個(gè)個(gè)H+跨內(nèi)膜向胞漿跨內(nèi)膜向胞漿側(cè)轉(zhuǎn)移側(cè)轉(zhuǎn)移 。目錄目錄復(fù)復(fù)合合體體的的電電子子傳傳遞遞過(guò)過(guò)程程目錄目錄細(xì)胞色素細(xì)胞色素c氧化酶氧化酶CuB-Cyta3中心使中心使O2還原成還原成水的過(guò)程，有強(qiáng)氧化性中間物始終和雙核中心緊密水的過(guò)程，有強(qiáng)氧化性中間物始終和雙核中心緊密結(jié)合，不會(huì)引起細(xì)胞損傷。結(jié)合，不會(huì)引起細(xì)胞損傷。目錄目錄1、NADH氧化呼吸鏈氧化呼吸鏈NADH 復(fù)合體復(fù)合體CoQ 復(fù)合體復(fù)合體Cyt c 復(fù)合體復(fù)合體O22 2、琥珀酸氧化呼吸鏈、琥珀酸氧化呼吸鏈 琥珀酸琥珀酸 復(fù)合體復(fù)合體 CoQ 復(fù)合體復(fù)合體Cyt c 復(fù)合體復(fù)合體

18、O2二、二、NADH和和FADH2是氧化呼吸鏈的電子是氧化呼吸鏈的電子供體供體根據(jù)電子供體及其傳遞過(guò)程，目前認(rèn)為，氧化根據(jù)電子供體及其傳遞過(guò)程，目前認(rèn)為，氧化呼吸鏈有兩條途徑：呼吸鏈有兩條途徑：目錄目錄NADHFMN(Fe-S)琥珀酸琥珀酸FAD(Fe-S)CoQCyt bCyt cCyt cCyt aa3O2NADH氧化呼吸鏈氧化呼吸鏈 FADH2氧化呼吸鏈氧化呼吸鏈目錄目錄（二）（二）呼吸鏈各組分的呼吸鏈各組分的排列順序排列順序o 標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位E E0 0的高低的高低排列排列 e e E EO O（?。ㄐ。?E EO O（大）（大）o 利用利用阻斷劑阻斷劑研究分析研究

19、分析o 電子傳遞體氧化還原態(tài)時(shí)的電子傳遞體氧化還原態(tài)時(shí)的吸收光譜變化吸收光譜變化進(jìn)進(jìn)行檢測(cè)，還原狀態(tài)呼吸鏈緩慢給氧行檢測(cè)，還原狀態(tài)呼吸鏈緩慢給氧o 將呼吸鏈將呼吸鏈拆開(kāi)拆開(kāi)和和重組重組 由以下實(shí)驗(yàn)確定：由以下實(shí)驗(yàn)確定：目錄目錄1. 1. 標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位E E0 0o 氧化還原電勢(shì)氧化還原電勢(shì)還原劑失掉電子或氧化劑得還原劑失掉電子或氧化劑得到電子的傾向稱(chēng)氧化還原電勢(shì)。到電子的傾向稱(chēng)氧化還原電勢(shì)。o 標(biāo)準(zhǔn)電勢(shì)標(biāo)準(zhǔn)電勢(shì)任何的氧化任何的氧化-還原物質(zhì)都有其特定還原物質(zhì)都有其特定的電動(dòng)勢(shì)，稱(chēng)標(biāo)準(zhǔn)電勢(shì)。用的電動(dòng)勢(shì)，稱(chēng)標(biāo)準(zhǔn)電勢(shì)。用E0或或0表示表示 目錄目錄呼吸鏈中各種氧化還原對(duì)的標(biāo)準(zhǔn)氧化

20、還原電位呼吸鏈中各種氧化還原對(duì)的標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位氧化還原對(duì)氧化還原對(duì)E0(V)氧化還原對(duì)氧化還原對(duì)E0(V)NAD+ /NADH+H+0.32Cyt c1 Fe3+ /Fe2+0.22FMN /FMNH20.219Cyt c Fe3+ /Fe2+0.254FAD /FADH20.219Cyt a Fe3+ /Fe2+0.29Cyt bL(bH) Fe3+/Fe2+0.05(0.10)Cyt a3 Fe3+ /Fe2+0.35Q10 /Q10H20.061/2O2 /H2O0.816目錄目錄NADHFMNCoQFe-SCyt c1O2Cyt bCyt cCyt aa3Fe-SFMNFe-S琥珀酸

21、等琥珀酸等復(fù)合物復(fù)合物 II復(fù)合物復(fù)合物 IV復(fù)合體復(fù)合體 I復(fù)合物復(fù)合物 IIINADH脫氫酶脫氫酶細(xì)胞色素細(xì)胞色素C還原酶還原酶細(xì)胞色素細(xì)胞色素C氧化酶氧化酶琥珀酸琥珀酸-輔酶輔酶Q還原酶還原酶-0.2-0.40+0.20.40.60.8E0/V目錄目錄NADH FMN (Fe-S) Q10 Cytb Cytc1 Cytc aa3 O2FAD.H2 (Fe-S)魚(yú)藤酮魚(yú)藤酮異戊巴比妥異戊巴比妥殺粉蝶霉素殺粉蝶霉素A-抗霉素抗霉素A二巰基丙醇二巰基丙醇氰化物氰化物硫化氫硫化氫疊氮化疊氮化CO-2. 各種呼吸鏈各種呼吸鏈抑制劑抑制劑作用部位作用部位目錄目錄4.呼吸鏈分離、重組呼吸鏈分離、重組目

22、錄目錄1、NADH氧化呼吸鏈氧化呼吸鏈NADH 復(fù)合體復(fù)合體Q 復(fù)合體復(fù)合體Cyt c 復(fù)合體復(fù)合體O22 2、FADHFADH2 2( (琥珀酸琥珀酸) )氧化呼吸鏈氧化呼吸鏈 琥珀酸琥珀酸 復(fù)合體復(fù)合體 Q 復(fù)合體復(fù)合體Cyt c 復(fù)合體復(fù)合體O2結(jié)結(jié) 果果目錄目錄第二節(jié)第二節(jié) 氧化磷酸化將氧化呼吸鏈釋能與氧化磷酸化將氧化呼吸鏈釋能與ADP磷酸化偶聯(lián)生成磷酸化偶聯(lián)生成ATP目錄目錄 氧化磷酸化氧化磷酸化 (oxidative phosphorylation)是指在呼是指在呼吸鏈電子傳遞過(guò)程中偶聯(lián)吸鏈電子傳遞過(guò)程中偶聯(lián)ADP磷酸化，生成磷酸化，生成ATP，又稱(chēng)為又稱(chēng)為偶聯(lián)磷酸化偶聯(lián)磷酸化。

23、底物水平磷酸化底物水平磷酸化(substrate level phosphorylation)與脫氫反應(yīng)偶聯(lián)，生成底物分子的高能鍵，使與脫氫反應(yīng)偶聯(lián)，生成底物分子的高能鍵，使ADP(GDP)磷酸化生成磷酸化生成ATP(GTP)的過(guò)程。不經(jīng)的過(guò)程。不經(jīng)電子傳遞。電子傳遞。nATP生成方式生成方式目錄目錄（一）氧化磷酸化偶聯(lián)部位在復(fù)合體（一）氧化磷酸化偶聯(lián)部位在復(fù)合體、內(nèi)內(nèi) 根據(jù)根據(jù)P/O比值比值 自由能變化自由能變化: G=-nFE 氧化磷酸化偶聯(lián)部位：氧化磷酸化偶聯(lián)部位：復(fù)合體復(fù)合體、目錄目錄線(xiàn)線(xiàn)粒粒體體離離體體實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)測(cè)測(cè)得得的的一一些些底底物物的的P/O比比值值底底 物物呼呼吸吸鏈鏈的的組

24、組成成P/O比比值值可可能能生生成成的的 ATP數(shù)數(shù) -羥羥丁丁酸酸NADH復(fù)復(fù)合合體體CoQ復(fù)復(fù)合合體體2.5 2.5Cyt c復(fù)復(fù)合合體體O2琥琥珀珀酸酸復(fù)復(fù)合合體體CoQ復(fù)復(fù)合合體體1.5 1.5Cyt c復(fù)復(fù)合合體體O2抗抗壞壞血血酸酸Cyt c復(fù)復(fù)合合體體O20.88 1細(xì)細(xì)胞胞色色素素c (Fe2+) 復(fù)復(fù)合合體體O20.61-0.68 11、P/O 比值比值指氧化磷酸化過(guò)程中，每消耗指氧化磷酸化過(guò)程中，每消耗1/2摩爾摩爾O2所生所生成成ATP的摩爾數(shù)（或一對(duì)電子通過(guò)氧化呼吸鏈傳遞的摩爾數(shù)（或一對(duì)電子通過(guò)氧化呼吸鏈傳遞給氧所生成給氧所生成ATP分子數(shù)）。分子數(shù)）。 目錄目錄（二）

25、自由能變化（二）自由能變化 標(biāo)準(zhǔn)自由能變化（標(biāo)準(zhǔn)自由能變化（ G 0）在標(biāo)準(zhǔn)條件下在標(biāo)準(zhǔn)條件下發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)的自由能變化。發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)的自由能變化。 標(biāo)準(zhǔn)條件指反應(yīng)的溫度為標(biāo)準(zhǔn)條件指反應(yīng)的溫度為25（298K），），大氣壓為大氣壓為101,325Pa (1atm)，pH=0.0且且反應(yīng)物和生成物的濃度均為反應(yīng)物和生成物的濃度均為1mol/L。G0= -nFE0n為傳遞電子數(shù)；為傳遞電子數(shù)；F為法拉第常數(shù)為法拉第常數(shù)(96.5kJ/molV)根據(jù)熱力學(xué)公式，根據(jù)熱力學(xué)公式，pH7.0時(shí)標(biāo)準(zhǔn)自由能變化時(shí)標(biāo)準(zhǔn)自由能變化(G0)與還原電位變化與還原電位變化(E0)之間有以下關(guān)系：之間有以下關(guān)系：目錄

26、目錄NADHFMN（Fe-S）CoQCyt bCyt c1Cyt cCyt aa3O2 FAD（Fe-S）琥珀酸能量ADP + PiATP能量ADP + PiATP能量ADP + PiATP-0.32-0.22+0.04+0.08+0.23+0.25+0.29+0.820.36V0.21V0.53VG0= ？ 生成ATP所需能量為30.5kJ-0.0669.5kJ40.5kJ102.3kJ目錄目錄電子傳遞鏈自由能變化電子傳遞鏈自由能變化區(qū)段區(qū)段電位變化電位變化(E)自由能變化自由能變化G=-nFE能否生成能否生成ATP(G是否大于是否大于30.5KJ) Cyt aa3O2 0.53V 102.

27、3KJ/mol 能能NAD+CoQ0.36V 69.5KJ/mol 能能CoQCyt c 0.21V 40.5KJ/mol 能能目錄目錄ATPATP ATP氧化磷酸化偶聯(lián)部位氧化磷酸化偶聯(lián)部位NADHFMN(Fe-S)琥珀酸琥珀酸FAD(Fe-S)CoQCyt bCyt cCyt cCyt aa3O2目錄目錄( (二二) )氧化磷酸化偶聯(lián)機(jī)制是產(chǎn)生跨線(xiàn)粒體內(nèi)膜氧化磷酸化偶聯(lián)機(jī)制是產(chǎn)生跨線(xiàn)粒體內(nèi)膜的質(zhì)子梯度的質(zhì)子梯度1、化學(xué)滲透假說(shuō)、化學(xué)滲透假說(shuō)(chemiosmotic hypothesis)電子經(jīng)呼吸鏈傳遞時(shí)，可將質(zhì)子電子經(jīng)呼吸鏈傳遞時(shí)，可將質(zhì)子(H+)從線(xiàn)從線(xiàn)粒體內(nèi)膜的基質(zhì)側(cè)泵到內(nèi)膜胞漿側(cè)

28、，產(chǎn)生膜粒體內(nèi)膜的基質(zhì)側(cè)泵到內(nèi)膜胞漿側(cè)，產(chǎn)生膜內(nèi)外質(zhì)子電化學(xué)梯度儲(chǔ)存能量。當(dāng)質(zhì)子順濃內(nèi)外質(zhì)子電化學(xué)梯度儲(chǔ)存能量。當(dāng)質(zhì)子順濃度梯度回流時(shí)驅(qū)動(dòng)度梯度回流時(shí)驅(qū)動(dòng)ADP與與Pi生成生成ATP。目錄目錄 氧化磷酸化依賴(lài)于完整封閉的線(xiàn)粒體內(nèi)膜；氧化磷酸化依賴(lài)于完整封閉的線(xiàn)粒體內(nèi)膜； 線(xiàn)粒體內(nèi)膜對(duì)線(xiàn)粒體內(nèi)膜對(duì)H+、OH、K、Cl離子是不通離子是不通透的；透的； 電子傳遞鏈可驅(qū)動(dòng)質(zhì)子移出線(xiàn)粒體，形成可測(cè)定電子傳遞鏈可驅(qū)動(dòng)質(zhì)子移出線(xiàn)粒體，形成可測(cè)定的跨內(nèi)膜電化學(xué)梯度；的跨內(nèi)膜電化學(xué)梯度； 增加線(xiàn)粒體內(nèi)膜外側(cè)酸性可導(dǎo)致增加線(xiàn)粒體內(nèi)膜外側(cè)酸性可導(dǎo)致ATP合成，而線(xiàn)合成，而線(xiàn)粒體內(nèi)膜加入使質(zhì)子通過(guò)物質(zhì)可減少內(nèi)膜質(zhì)子梯

29、粒體內(nèi)膜加入使質(zhì)子通過(guò)物質(zhì)可減少內(nèi)膜質(zhì)子梯度，結(jié)果電子雖可以傳遞，但度，結(jié)果電子雖可以傳遞，但ATP生成減少。生成減少。 n化學(xué)滲透假說(shuō)已經(jīng)得到廣泛的實(shí)驗(yàn)支持?；瘜W(xué)滲透假說(shuō)已經(jīng)得到廣泛的實(shí)驗(yàn)支持。目錄目錄線(xiàn)粒體基質(zhì)線(xiàn)粒體基質(zhì) 線(xiàn)粒體膜線(xiàn)粒體膜 + + + + - - - - H+ O2 H2O H+e- ADP+Pi ATP 化學(xué)滲透假說(shuō)簡(jiǎn)單示意圖化學(xué)滲透假說(shuō)簡(jiǎn)單示意圖目錄目錄要點(diǎn)：要點(diǎn)： a.在在電子傳遞電子傳遞中，釋放能量驅(qū)動(dòng)中，釋放能量驅(qū)動(dòng)質(zhì)子泵質(zhì)子泵； b.電子傳遞鏈中有電子傳遞鏈中有質(zhì)子泵功能的是質(zhì)子泵功能的是復(fù)合體復(fù)合體I、 III、IV； c. 質(zhì)子跨膜質(zhì)子跨膜過(guò)程中釋放的能量，

30、直接驅(qū)動(dòng)過(guò)程中釋放的能量，直接驅(qū)動(dòng) ADP和磷酸合成和磷酸合成ATP。 F0 F1 Cyt c Q NADH+H+ NAD+ 延胡索酸延胡索酸 琥珀酸琥珀酸 H+ 1/2O2+2H+ H2O ADP+Pi ATP 4H+ 2H+ 4H+ 胞液側(cè)胞液側(cè) 基質(zhì)側(cè)基質(zhì)側(cè) + + + + + + + + + + - - - - - - - - - 電子傳遞過(guò)程電子傳遞過(guò)程復(fù)合體復(fù)合體 (4H+) 、 (4 H+)和和 (2H+)有質(zhì)子泵功能有質(zhì)子泵功能。目錄目錄化學(xué)滲透示意圖及各種抑制劑對(duì)電子傳遞鏈的影響化學(xué)滲透示意圖及各種抑制劑對(duì)電子傳遞鏈的影響目錄目錄質(zhì)子梯度的形成質(zhì)子梯度的形成目錄目錄目錄目錄（

31、三）質(zhì)子順梯度回流釋放能量被（三）質(zhì)子順梯度回流釋放能量被ATP合酶合酶利用催化利用催化ATP合成合成F1：親水部分：親水部分 （動(dòng)物：（動(dòng)物：33亞基復(fù)合體，亞基復(fù)合體，OSCP、IF1 亞基），線(xiàn)粒體內(nèi)膜的基質(zhì)側(cè)顆），線(xiàn)粒體內(nèi)膜的基質(zhì)側(cè)顆粒狀突起，粒狀突起，催化催化ATP合成合成。 F0：疏水部分：疏水部分（ab2c912亞基，動(dòng)物還有其他輔助亞基，動(dòng)物還有其他輔助亞基），鑲嵌在線(xiàn)粒體內(nèi)膜中，形成亞基），鑲嵌在線(xiàn)粒體內(nèi)膜中，形成跨內(nèi)膜質(zhì)跨內(nèi)膜質(zhì)子通道子通道 。nATP合酶結(jié)構(gòu)組成合酶結(jié)構(gòu)組成目錄目錄nATP合酶組成可旋轉(zhuǎn)的發(fā)動(dòng)機(jī)樣結(jié)構(gòu)合酶組成可旋轉(zhuǎn)的發(fā)動(dòng)機(jī)樣結(jié)構(gòu) F0的的2個(gè)個(gè)b亞基的一端

32、錨定亞基的一端錨定F1的的亞基，另一端通過(guò)亞基，另一端通過(guò)和和33穩(wěn)固結(jié)合，使穩(wěn)固結(jié)合，使a、b2和和33、亞基組成穩(wěn)亞基組成穩(wěn)定的定的定子部分定子部分。 部分部分和和亞基共同形成穿過(guò)亞基共同形成穿過(guò)33間中軸，間中軸，還與還與1個(gè)個(gè)亞基疏松結(jié)合作用，下端與嵌入內(nèi)膜的亞基疏松結(jié)合作用，下端與嵌入內(nèi)膜的c亞基環(huán)亞基環(huán)緊密結(jié)合。緊密結(jié)合。c亞基環(huán)、亞基環(huán)、和和亞基組成亞基組成轉(zhuǎn)子部分轉(zhuǎn)子部分。 質(zhì)子質(zhì)子順梯度向基質(zhì)順梯度向基質(zhì)回流回流時(shí)，轉(zhuǎn)子部分相對(duì)定子部時(shí)，轉(zhuǎn)子部分相對(duì)定子部分旋轉(zhuǎn)，使分旋轉(zhuǎn)，使ATP合酶利用釋放的能量合酶利用釋放的能量合成合成ATP。 目錄目錄o 圖合酶和質(zhì)子的跨膜流動(dòng)機(jī)制模式

33、圖目錄目錄當(dāng)當(dāng)H+順濃度遞度經(jīng)順濃度遞度經(jīng)F0中中a亞基和亞基和c亞基之間回流時(shí)，亞基之間回流時(shí)，亞基發(fā)生旋轉(zhuǎn)亞基發(fā)生旋轉(zhuǎn)，3個(gè)個(gè)亞基的構(gòu)象發(fā)生改變亞基的構(gòu)象發(fā)生改變。ATP合酶的工作機(jī)制合酶的工作機(jī)制nATP合成的結(jié)合變構(gòu)機(jī)制合成的結(jié)合變構(gòu)機(jī)制(binding change mechanism) 目錄目錄ATP合成的機(jī)制合成的機(jī)制 第三步第三步 第一步第一步 第二步第二步PiADP ATPADPPiATPATP目錄目錄約需約需3個(gè)質(zhì)子穿線(xiàn)粒體內(nèi)膜回流進(jìn)基質(zhì)能生個(gè)質(zhì)子穿線(xiàn)粒體內(nèi)膜回流進(jìn)基質(zhì)能生成成分子分子ATP,轉(zhuǎn)子循環(huán)一周生成轉(zhuǎn)子循環(huán)一周生成3分子分子ATP。兩個(gè)電子經(jīng)兩個(gè)電子經(jīng)復(fù)合物復(fù)合物

34、I、III和和IV傳遞大約導(dǎo)致傳遞大約導(dǎo)致線(xiàn)粒體內(nèi)的線(xiàn)粒體內(nèi)的10個(gè)個(gè)H轉(zhuǎn)移到膜間隙。轉(zhuǎn)移到膜間隙。 H經(jīng)經(jīng)ATP合酶流回線(xiàn)粒體基質(zhì)足可以驅(qū)動(dòng)合酶流回線(xiàn)粒體基質(zhì)足可以驅(qū)動(dòng)2.5個(gè)個(gè)ATP的合的合成。成。-NADH從從復(fù)合物復(fù)合物II進(jìn)入電子傳遞鏈的電子經(jīng)復(fù)合進(jìn)入電子傳遞鏈的電子經(jīng)復(fù)合物物III傳遞到傳遞到復(fù)合物復(fù)合物IV，只能驅(qū)動(dòng)，只能驅(qū)動(dòng)6個(gè)質(zhì)子個(gè)質(zhì)子的轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)移，但也可驅(qū)動(dòng)移，但也可驅(qū)動(dòng)1.5個(gè)個(gè)ATP的合成。的合成。-FADH2目錄目錄四、四、ATP在能量代謝中起核心作用在能量代謝中起核心作用細(xì)胞內(nèi)代謝反應(yīng)都是依序進(jìn)行、能量逐步得失。細(xì)胞內(nèi)代謝反應(yīng)都是依序進(jìn)行、能量逐步得失。ATP稱(chēng)之為稱(chēng)

35、之為高能磷酸化合物高能磷酸化合物，可直接為細(xì)胞的，可直接為細(xì)胞的各種生理活動(dòng)提供能量，同時(shí)也有利于細(xì)胞對(duì)各種生理活動(dòng)提供能量，同時(shí)也有利于細(xì)胞對(duì)能量代謝進(jìn)行嚴(yán)格調(diào)控。能量代謝進(jìn)行嚴(yán)格調(diào)控。生物體能量代謝有其明顯的特點(diǎn)。生物體能量代謝有其明顯的特點(diǎn)。目錄目錄n高能磷酸鍵高能磷酸鍵水解時(shí)釋放的能量大于水解時(shí)釋放的能量大于25kJ/mol的磷酸酯的磷酸酯鍵，常表示為鍵，常表示為 P。n高能磷酸化合物高能磷酸化合物含有高能磷酸鍵的化合物含有高能磷酸鍵的化合物目錄目錄 ATP是三磷酸腺苷，是三磷酸腺苷， ATP 結(jié)構(gòu)式結(jié)構(gòu)式A-PPP, A-腺苷，腺苷，P-磷酸團(tuán)，磷酸團(tuán)，“”高能磷酸鍵高能磷酸鍵。它是

36、各。它是各種活細(xì)胞內(nèi)普遍存在的一種種活細(xì)胞內(nèi)普遍存在的一種高能磷酸化合物高能磷酸化合物。 高能磷酸化合物是指水解時(shí)釋放的能量在高能磷酸化合物是指水解時(shí)釋放的能量在20.92kj/mol以上的磷酸化合物，以上的磷酸化合物，ATP水解水解是釋放的能量高達(dá)是釋放的能量高達(dá)30.54kj/mol。 ATP ADP+Pi+能量能量酶酶目錄目錄化合物化合物E0kJ/mol(kcal/mol)磷酸烯醇式丙酮酸磷酸烯醇式丙酮酸61.9(14.8)氨基甲酰磷酸氨基甲酰磷酸51.4(12.3)1，3-二磷酸甘油酸二磷酸甘油酸49.3(11.8)磷酸肌酸磷酸肌酸43.1(10.3)ATP ADPPi30.5(7.3

37、)乙酰輔酶乙酰輔酶A(高能硫酯化物高能硫酯化物）31.5(7.5)ADP AMPPi27.6(6.6)焦磷酸焦磷酸27.6(6.6)1-磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖20.9(5.0)一些重要有機(jī)磷酸化合物水解釋放的標(biāo)準(zhǔn)自由能一些重要有機(jī)磷酸化合物水解釋放的標(biāo)準(zhǔn)自由能 目錄目錄（一）（一）ATP是體內(nèi)能量捕獲和釋放利用的重要是體內(nèi)能量捕獲和釋放利用的重要分子分子ATP是體內(nèi)最重要的高能磷酸化合物，是細(xì)胞是體內(nèi)最重要的高能磷酸化合物，是細(xì)胞可直接利用的能量形式?？芍苯永玫哪芰啃问?。 ATP在生物能學(xué)上最重要的意義在于，通過(guò)其在生物能學(xué)上最重要的意義在于，通過(guò)其水解反應(yīng)釋放大量自由能和需要供能的反應(yīng)偶水解

38、反應(yīng)釋放大量自由能和需要供能的反應(yīng)偶聯(lián)，使這些反應(yīng)在生理?xiàng)l件下完成。聯(lián)，使這些反應(yīng)在生理?xiàng)l件下完成。 目錄目錄 ATP + UDP ADP + UTPATP + CDP ADP + CTPATP + GDP ADP + GTP ADP + ADP ATP + AMP核苷二磷酸激酶的作用核苷二磷酸激酶的作用腺苷酸激酶的作用腺苷酸激酶的作用（二）（二）ATP是體內(nèi)能量轉(zhuǎn)移和磷酸核苷化合物是體內(nèi)能量轉(zhuǎn)移和磷酸核苷化合物相互轉(zhuǎn)變的核心相互轉(zhuǎn)變的核心 目錄目錄（三）（三）ATP通過(guò)轉(zhuǎn)移自身基團(tuán)提供能量通過(guò)轉(zhuǎn)移自身基團(tuán)提供能量因?yàn)橐驗(yàn)锳TP分子中的高能磷酸鍵水解釋放能量多，分子中的高能磷酸鍵水解釋放能量多

39、，易釋放易釋放Pi、PPi基團(tuán)，很多酶促反應(yīng)由基團(tuán)，很多酶促反應(yīng)由ATP通通過(guò)共價(jià)鍵與底物或酶分子相連，將過(guò)共價(jià)鍵與底物或酶分子相連，將ATP分子中分子中的的Pi、PPi或者或者AMP基團(tuán)轉(zhuǎn)移到底物或酶蛋白基團(tuán)轉(zhuǎn)移到底物或酶蛋白上而形成中間產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)化學(xué)轉(zhuǎn)變后再將這些上而形成中間產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)化學(xué)轉(zhuǎn)變后再將這些基團(tuán)水解而形成終產(chǎn)物。基團(tuán)水解而形成終產(chǎn)物。目錄目錄n肌酸激酶的作用肌酸激酶的作用磷酸肌酸磷酸肌酸(CP)作為肌肉和腦組織中能量的一種貯存形式作為肌肉和腦組織中能量的一種貯存形式（四）磷酸肌酸是高能鍵能量的儲(chǔ)存形式（四）磷酸肌酸是高能鍵能量的儲(chǔ)存形式目錄目錄代謝物代謝物分分解解氧氧化化CO2

40、 H2O能能熱能（散發(fā)）熱能（散發(fā)）化學(xué)能化學(xué)能（儲(chǔ)能）（儲(chǔ)能）ATPADP PiCCP+能能機(jī)械能（肌肉收縮）機(jī)械能（肌肉收縮）化學(xué)能（合成代謝）化學(xué)能（合成代謝）滲透能（吸收分泌）滲透能（吸收分泌）電能（神經(jīng)傳導(dǎo)）電能（神經(jīng)傳導(dǎo)）熱能（維持體溫）熱能（維持體溫）ATP的生成和利用的生成和利用生物體內(nèi)能量的儲(chǔ)存和利用都以生物體內(nèi)能量的儲(chǔ)存和利用都以ATP為中心為中心 氧化磷酸化氧化磷酸化 底物水平磷酸化底物水平磷酸化 目錄目錄目錄目錄第三節(jié)第三節(jié) 氧化磷酸化的影響因素氧化磷酸化的影響因素目錄目錄一、體內(nèi)能量狀態(tài)可調(diào)節(jié)氧化磷酸化速率一、體內(nèi)能量狀態(tài)可調(diào)節(jié)氧化磷酸化速率 氧化磷酸化是機(jī)體合成能量

41、載體氧化磷酸化是機(jī)體合成能量載體ATPATP的最主要的最主要的途徑，因此機(jī)體根據(jù)能量需求調(diào)節(jié)氧化磷的途徑，因此機(jī)體根據(jù)能量需求調(diào)節(jié)氧化磷酸化速率，從而調(diào)節(jié)酸化速率，從而調(diào)節(jié)ATPATP的生成量。的生成量。 目錄目錄三、氧化磷酸化作用可受某些內(nèi)外源三、氧化磷酸化作用可受某些內(nèi)外源因素影響因素影響1 1、呼吸鏈抑制劑阻斷電子傳遞過(guò)程、呼吸鏈抑制劑阻斷電子傳遞過(guò)程 復(fù)合體復(fù)合體抑制劑：魚(yú)藤酮抑制劑：魚(yú)藤酮(rotenone)、粉蝶霉、粉蝶霉素素A(piericidin A)及異戊巴比妥及異戊巴比妥(amobarbital)等等阻斷傳遞電子到泛醌阻斷傳遞電子到泛醌 。 復(fù)合體復(fù)合體的抑制劑：萎銹靈的抑

42、制劑：萎銹靈(carboxin)。目錄目錄 復(fù)合體復(fù)合體抑制劑：抗霉素抑制劑：抗霉素A(antimycin A)阻斷阻斷Cyt bH傳遞電子到泛醌傳遞電子到泛醌(QN) ；粘噻唑菌醇則作用；粘噻唑菌醇則作用QP位點(diǎn)位點(diǎn)。 復(fù)合體復(fù)合體 抑制劑：抑制劑：CN、N3緊密結(jié)合中氧化型緊密結(jié)合中氧化型Cyt a3，阻斷電子由，阻斷電子由Cyt a到到CuB- Cyt a3間傳遞。間傳遞。CO與還原型與還原型Cyt a3結(jié)合，結(jié)合，阻斷電子傳遞給阻斷電子傳遞給O2。 目錄目錄NADHFMN(Fe-S)琥珀酸琥珀酸FAD(Fe-S)CoQCyt bCyt cCyt cCyt aa3O2魚(yú)藤酮魚(yú)藤酮粉蝶霉素

43、粉蝶霉素A A異戊巴比妥異戊巴比妥 抗霉素抗霉素A A二巰基丙醇二巰基丙醇 CO、CN-、N3-及及H2S各種呼吸鏈抑制劑的阻斷位點(diǎn)各種呼吸鏈抑制劑的阻斷位點(diǎn)目錄目錄 解偶聯(lián)劑解偶聯(lián)劑可使氧化與磷酸化的偶聯(lián)相互可使氧化與磷酸化的偶聯(lián)相互分離。分離。機(jī)制：機(jī)制：破壞破壞電子傳遞過(guò)程建立的跨內(nèi)膜的電子傳遞過(guò)程建立的跨內(nèi)膜的質(zhì)子電化學(xué)梯度質(zhì)子電化學(xué)梯度，使電化學(xué)梯度儲(chǔ)存的能量，使電化學(xué)梯度儲(chǔ)存的能量以以熱能熱能形式釋放，形式釋放，ATP的生成受到抑制。的生成受到抑制。 （二）解偶聯(lián)劑阻斷（二）解偶聯(lián)劑阻斷ADPADP的磷酸化過(guò)程的磷酸化過(guò)程目錄目錄 解偶聯(lián)劑：解偶聯(lián)劑：二硝基苯酚二硝基苯酚(dini

44、trophenol, DNP) 機(jī)制：進(jìn)入基質(zhì)側(cè)釋放機(jī)制：進(jìn)入基質(zhì)側(cè)釋放H+，胞質(zhì)側(cè)結(jié)合，胞質(zhì)側(cè)結(jié)合 H+解偶聯(lián)蛋白解偶聯(lián)蛋白(uncoupling protein，UCP1) 機(jī)制：機(jī)制： 形成易化質(zhì)子通道，形成易化質(zhì)子通道， H+返回返回基質(zhì)側(cè)基質(zhì)側(cè)目錄目錄解偶聯(lián)蛋白作用機(jī)制解偶聯(lián)蛋白作用機(jī)制（內(nèi)源性的解耦聯(lián)劑）（內(nèi)源性的解耦聯(lián)劑）（棕色脂肪組織線(xiàn)粒體）（棕色脂肪組織線(xiàn)粒體）目錄目錄（三）（三） ATP合酶抑制劑合酶抑制劑同時(shí)抑制電子傳同時(shí)抑制電子傳 遞和遞和 ATP的生成的生成機(jī)制：機(jī)制：共價(jià)結(jié)合共價(jià)結(jié)合F0的的c亞基谷氨酸殘基，亞基谷氨酸殘基，阻阻斷質(zhì)子斷質(zhì)子從從F0質(zhì)子半通道質(zhì)子半通

45、道回流回流，抑制抑制ATP合酶活性合酶活性。由于線(xiàn)粒體內(nèi)膜兩側(cè)質(zhì)子電化學(xué)梯度增高影響呼由于線(xiàn)粒體內(nèi)膜兩側(cè)質(zhì)子電化學(xué)梯度增高影響呼吸鏈質(zhì)子泵功能，繼而吸鏈質(zhì)子泵功能，繼而抑制電子傳遞抑制電子傳遞。 寡霉素、二環(huán)己基碳二亞胺寡霉素、二環(huán)己基碳二亞胺(DCCD)目錄目錄寡霉素寡霉素ATP合酶結(jié)構(gòu)模式圖合酶結(jié)構(gòu)模式圖可阻止質(zhì)子從可阻止質(zhì)子從F0質(zhì)質(zhì)子通道回流，抑制子通道回流，抑制ATP生成。生成。目錄目錄化學(xué)滲透示意圖及各種抑制劑對(duì)電子傳遞鏈的影響化學(xué)滲透示意圖及各種抑制劑對(duì)電子傳遞鏈的影響目錄目錄不同底物和抑制劑對(duì)線(xiàn)粒體氧耗的影響不同底物和抑制劑對(duì)線(xiàn)粒體氧耗的影響目錄目錄電子傳遞鏈及氧化電子傳遞鏈及

46、氧化磷酸化系統(tǒng)概貌磷酸化系統(tǒng)概貌H+ 跨膜質(zhì)子電化跨膜質(zhì)子電化學(xué)梯度；學(xué)梯度；H+m內(nèi)膜內(nèi)膜基質(zhì)側(cè)基質(zhì)側(cè)H+；H+c 內(nèi)內(nèi)膜胞液側(cè)膜胞液側(cè)H+目錄目錄三、甲狀腺激素三、甲狀腺激素可促進(jìn)氧化磷酸化可促進(jìn)氧化磷酸化和產(chǎn)熱和產(chǎn)熱甲狀腺激素激活細(xì)胞膜上的甲狀腺激素激活細(xì)胞膜上的Na+-K+-ATP酶酶 ， 使使ATP水解增加水解增加因而使因而使ATP/ADP比值下降比值下降 氧化磷酸化速度加快。氧化磷酸化速度加快。甲狀腺激素（甲狀腺激素（T3）可使）可使解偶聯(lián)蛋白基因表達(dá)解偶聯(lián)蛋白基因表達(dá)增加增加。引起物質(zhì)引起物質(zhì)氧化釋能氧化釋能和和產(chǎn)熱比率產(chǎn)熱比率均增加。均增加。目錄目錄 四、線(xiàn)粒體四、線(xiàn)粒體DNA

47、突變可影響機(jī)體突變可影響機(jī)體氧化磷酸化功能氧化磷酸化功能 與線(xiàn)粒體與線(xiàn)粒體DNA（mitochondrial DNA， mtDNA ）突變及衰老有關(guān)。）突變及衰老有關(guān)。 線(xiàn)粒體線(xiàn)粒體DNA（mtDNA）呈裸露的環(huán)狀）呈裸露的環(huán)狀雙螺旋結(jié)構(gòu)，缺乏蛋白質(zhì)保護(hù)和損傷修復(fù)系雙螺旋結(jié)構(gòu)，缺乏蛋白質(zhì)保護(hù)和損傷修復(fù)系統(tǒng)，容易受到損傷而發(fā)生突變，其突變率遠(yuǎn)統(tǒng)，容易受到損傷而發(fā)生突變，其突變率遠(yuǎn)高于核內(nèi)的基因組高于核內(nèi)的基因組DNA。目錄目錄mtDNA編碼呼吸鏈復(fù)合體的多肽鏈及蛋白質(zhì)編碼呼吸鏈復(fù)合體的多肽鏈及蛋白質(zhì)mtDNA突變突變影響氧化磷酸化影響氧化磷酸化ATP生成減少生成減少mtDNA病病聾、盲、癡呆、聾

48、、盲、癡呆、肌無(wú)力、糖尿病肌無(wú)力、糖尿病目錄目錄線(xiàn)粒體外膜通透性高，線(xiàn)粒體對(duì)物質(zhì)線(xiàn)粒體外膜通透性高，線(xiàn)粒體對(duì)物質(zhì)通過(guò)的選擇性主要依賴(lài)于通過(guò)的選擇性主要依賴(lài)于內(nèi)膜內(nèi)膜中不同中不同轉(zhuǎn)運(yùn)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白蛋白(transporter)對(duì)各種物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)。對(duì)各種物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)。五、線(xiàn)粒體的內(nèi)膜選擇性協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)運(yùn)氧五、線(xiàn)粒體的內(nèi)膜選擇性協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)運(yùn)氧化磷酸化相關(guān)代謝物化磷酸化相關(guān)代謝物目錄目錄轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白進(jìn)入線(xiàn)粒體進(jìn)入線(xiàn)粒體出線(xiàn)粒體出線(xiàn)粒體ATP-ADP轉(zhuǎn)位酶轉(zhuǎn)位酶ADP3-ATP4-磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白H2PO4- + H+二羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白二羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白HPO42-蘋(píng)果酸蘋(píng)果酸-酮戊二酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白酮戊二酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白蘋(píng)果

49、酸蘋(píng)果酸-酮戊二酸酮戊二酸天冬氨酸天冬氨酸-谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白谷氨酸谷氨酸天冬氨酸天冬氨酸單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白丙酮酸丙酮酸OH-三羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白三羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白蘋(píng)果酸蘋(píng)果酸檸檬酸檸檬酸堿性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白堿性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白鳥(niǎo)氨酸鳥(niǎo)氨酸瓜氨酸瓜氨酸肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白脂酰肉堿脂酰肉堿肉堿肉堿線(xiàn)粒體內(nèi)膜的某些轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)代謝物的轉(zhuǎn)運(yùn)線(xiàn)粒體內(nèi)膜的某些轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)代謝物的轉(zhuǎn)運(yùn) 目錄目錄胞漿中的胞漿中的NADH如何進(jìn)入線(xiàn)粒體氧化呼吸鏈？如何進(jìn)入線(xiàn)粒體氧化呼吸鏈？目錄目錄（一）（一）胞漿胞漿中中NADH通過(guò)穿梭機(jī)制進(jìn)入通過(guò)穿梭機(jī)制進(jìn)入線(xiàn)粒體線(xiàn)粒體氧化呼吸鏈氧化呼吸鏈胞漿中胞漿中NADH必須經(jīng)一

50、定必須經(jīng)一定轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制制進(jìn)入線(xiàn)粒體，再進(jìn)入線(xiàn)粒體，再經(jīng)呼吸鏈進(jìn)行氧化經(jīng)呼吸鏈進(jìn)行氧化磷酸化。磷酸化。 酵解酵解（細(xì)胞質(zhì)）（細(xì)胞質(zhì)）氧化磷酸化氧化磷酸化 （線(xiàn)粒體）（線(xiàn)粒體）目錄目錄-磷酸甘油穿梭磷酸甘油穿梭(-glycerophosphate shuttle)(-glycerophosphate shuttle)蘋(píng)果酸蘋(píng)果酸- -天冬氨酸穿梭天冬氨酸穿梭 (malate-asparateshuttle)(malate-asparateshuttle) 轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制：轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制：目錄目錄 NADH+H+ FADH2 NAD+ FAD 線(xiàn)粒體線(xiàn)粒體 內(nèi)膜內(nèi)膜 線(xiàn)粒體線(xiàn)粒體 外膜外膜膜間隙膜間隙 線(xiàn)粒

51、體線(xiàn)粒體 基質(zhì)基質(zhì)-磷酸甘油磷酸甘油 脫氫酶脫氫酶 呼吸鏈呼吸鏈 磷酸二羥丙酮磷酸二羥丙酮 PiCH2O-CH2OH C=OPiCH2O-CH2OH C=O-磷酸甘油磷酸甘油 PiCH2O-CH2OH CHOHPiCH2O-CH2OH CHOH磷酸甘油脫磷酸甘油脫氫酶氫酶1 1、-磷酸甘油穿梭主要存在于磷酸甘油穿梭主要存在于腦腦和和骨骼肌骨骼肌目錄目錄2 2、蘋(píng)果酸蘋(píng)果酸- -天冬氨酸穿梭主要存在于天冬氨酸穿梭主要存在于肝肝和和心肌心肌天冬氨酸天冬氨酸-谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白目錄目錄-磷酸甘油穿梭磷酸甘油穿梭蘋(píng)果酸蘋(píng)果酸- -天冬氨酸穿梭天冬氨酸穿梭穿梭物質(zhì)穿梭物質(zhì)-磷酸甘油磷酸甘油磷酸

52、二羥丙酮磷酸二羥丙酮蘋(píng)果酸、蘋(píng)果酸、 谷氨酸谷氨酸天冬天冬aaaa、-酮戊二酸酮戊二酸進(jìn)入線(xiàn)粒進(jìn)入線(xiàn)粒體后轉(zhuǎn)變體后轉(zhuǎn)變成的物質(zhì)成的物質(zhì)FADH2NADH+ H+進(jìn)入進(jìn)入呼吸鏈呼吸鏈 琥珀酸琥珀酸氧化呼吸鏈氧化呼吸鏈NADHNADH氧化呼吸鏈氧化呼吸鏈生成生成ATPATP數(shù)數(shù)1.52.5存在組織存在組織腦、骨骼肌腦、骨骼肌肝和心肌肝和心肌相同點(diǎn)相同點(diǎn)將胞漿中將胞漿中NADHNADH的還原當(dāng)量轉(zhuǎn)送到線(xiàn)粒體內(nèi)的還原當(dāng)量轉(zhuǎn)送到線(xiàn)粒體內(nèi)兩種穿梭系統(tǒng)的比較目錄目錄（二）（二）ATP-ADP轉(zhuǎn)位酶協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)運(yùn)轉(zhuǎn)位酶協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)運(yùn)ADP進(jìn)入和進(jìn)入和ATP移出線(xiàn)粒體移出線(xiàn)粒體 185頁(yè)頁(yè)目錄目錄ATP4- F0 F1 胞

53、液側(cè)胞液側(cè) 基質(zhì)側(cè)基質(zhì)側(cè) 腺苷酸腺苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白磷酸磷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 ADP3- H2PO4- ATP4- H+ H+ H+ H+ H2PO4- H2PO4- ADP3- ADP3- 每分子每分子ATP4-和和ADP3-反向轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)，向內(nèi)膜外凈反向轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)，向內(nèi)膜外凈轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移1個(gè)負(fù)電荷個(gè)負(fù)電荷 ，相當(dāng)于多，相當(dāng)于多1個(gè)個(gè)H+轉(zhuǎn)入線(xiàn)粒體基質(zhì)。轉(zhuǎn)入線(xiàn)粒體基質(zhì)。 目錄目錄 第四節(jié)第四節(jié) 其他氧化與抗氧化體系其他氧化與抗氧化體系目錄目錄n反應(yīng)活性氧類(lèi)反應(yīng)活性氧類(lèi)(reactive oxygen species, ROS)O2e-O-2e-+2H+H2O2e-+H+OHH2Oe-+H+H2O反應(yīng)活

54、性氧類(lèi)反應(yīng)活性氧類(lèi)超氧陰離子超氧陰離子羥自由基羥自由基(活性最強(qiáng)）活性最強(qiáng)）過(guò)氧化氫過(guò)氧化氫一、線(xiàn)粒體氧化呼吸鏈也可產(chǎn)生活性氧一、線(xiàn)粒體氧化呼吸鏈也可產(chǎn)生活性氧 目錄目錄nROSROS主要來(lái)源主要來(lái)源線(xiàn)粒體：線(xiàn)粒體：是體內(nèi)（是體內(nèi)（ OO-2-2超氧陰離子）的主超氧陰離子）的主要來(lái)源；要來(lái)源； OO-2-2在線(xiàn)粒體中再生成在線(xiàn)粒體中再生成H H2 2O O2 2和和OHOH。過(guò)氧化酶體：過(guò)氧化酶體：FADFAD將從脂肪酸等底物獲得的將從脂肪酸等底物獲得的電子交給電子交給O O2 2生成生成H H2 2O O2 2和羥自由基和羥自由基OHOH。胞漿胞漿需氧脫氫酶需氧脫氫酶（如黃嘌呤氧化酶等）也可

55、（如黃嘌呤氧化酶等）也可催化生成催化生成OO-2-2。細(xì)菌感染、組織缺氧等病理過(guò)程，環(huán)境、藥細(xì)菌感染、組織缺氧等病理過(guò)程，環(huán)境、藥物等物等外源因素外源因素也可導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生活性氧類(lèi)。也可導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生活性氧類(lèi)。 目錄目錄需氧脫氫酶和氧化酶需氧脫氫酶和氧化酶受受氫氫體體輔輔酶酶（輔輔基基） 產(chǎn)產(chǎn)物物不不需需氧氧脫脫氫氫酶酶輔輔酶酶需需氧氧脫脫氫氫酶酶O2 FMN或或FAD H2O2氧氧化化酶酶O2 含含Cu H2O受受氫氫體體輔輔酶酶（輔輔基基） 產(chǎn)產(chǎn)物物不不需需氧氧脫脫氫氫酶酶輔輔酶酶需需氧氧脫脫氫氫酶酶O2 FMN或或FAD H2O2氧氧化化酶酶O2 含含Cu H2O二、抗氧化酶體系有清除反應(yīng)活

56、性氧類(lèi)二、抗氧化酶體系有清除反應(yīng)活性氧類(lèi)的功能的功能目錄目錄n抗氧化酶體系抗氧化酶體系1 1、過(guò)氧化氫酶、過(guò)氧化氫酶(catalase)(catalase)又稱(chēng)觸酶，其輔基含又稱(chēng)觸酶，其輔基含4 4個(gè)血紅素個(gè)血紅素2H2O2 2H2O + O2 過(guò)氧化氫酶過(guò)氧化氫酶 目錄目錄可去除細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)生的可去除細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)生的H2O2和過(guò)和過(guò)氧化物氧化物(R-O-OH)，是，是體內(nèi)防止活性氧類(lèi)損傷體內(nèi)防止活性氧類(lèi)損傷主要的酶主要的酶。2、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase，GPx)H2O2 + 2GSH 2 H2O +GS-SG（氧化型）（氧化

57、型）2GSH + R-O-OH GS-SG + H2O + R-OH目錄目錄 谷胱甘肽過(guò)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶氧化物酶 H2O2(ROOH) H2O(ROH+H2O) 2G SH （還原型）（還原型） G S S G （氧化型）（氧化型） NADP+ NADPH+H+ 此類(lèi)酶可保護(hù)生物膜及血紅蛋白免遭損傷此類(lèi)酶可保護(hù)生物膜及血紅蛋白免遭損傷 谷胱甘谷胱甘肽還原酶肽還原酶 含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶 目錄目錄3 3、超氧化物歧化酶（、超氧化物歧化酶（ superoxide dismutasesuperoxide dismutase SODSOD) )2O2+ 2H+ SODH2

58、O2 + O2 H2O + O2 過(guò)氧化氫酶過(guò)氧化氫酶目錄目錄RH + NADPH + H+ + O2 ROH + NADP+ + H2O 上述反應(yīng)需要細(xì)胞色素上述反應(yīng)需要細(xì)胞色素P450 (Cyt P450)參與參與n細(xì)胞色素細(xì)胞色素P450單加氧酶單加氧酶(cytochrome P450 monooxygenase)，又稱(chēng)混合功能氧化酶，又稱(chēng)混合功能氧化酶(mixed-function oxidase)或羥化酶或羥化酶(hydroxylase)三、微粒體細(xì)胞色素三、微粒體細(xì)胞色素P450P450單加氧酶催化單加氧酶催化底物分子羥基化底物分子羥基化目錄目錄細(xì)胞色素細(xì)胞色素P450單加氧酶作用

59、機(jī)制單加氧酶作用機(jī)制目錄目錄微粒體細(xì)胞色素微粒體細(xì)胞色素P450P450單加氧酶單加氧酶催化羥化反應(yīng)的生理意義：催化羥化反應(yīng)的生理意義：o膽汁酸、膽固醇的生成膽汁酸、膽固醇的生成o藥物、毒物的生物轉(zhuǎn)化藥物、毒物的生物轉(zhuǎn)化o腎上腺皮質(zhì)、類(lèi)固醇激素的生物合成腎上腺皮質(zhì)、類(lèi)固醇激素的生物合成目錄目錄作作 業(yè)業(yè)名詞解釋?zhuān)好~解釋?zhuān)?.1.生物氧化生物氧化2.2.氧化磷酸化氧化磷酸化3.3.底物水平磷酸化底物水平磷酸化4.4.磷氧比（磷氧比（P0P0）簡(jiǎn)答：簡(jiǎn)答：1.1.試述氧化呼吸鏈的組成，順序和各組分的主要試述氧化呼吸鏈的組成，順序和各組分的主要功能？功能？2.CO2.CO中毒可導(dǎo)致呼吸停止，其機(jī)制是什么？中毒可導(dǎo)致呼吸停止，其機(jī)制是什么？