鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵_實(shí)驗(yàn)報(bào)告(精)

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1、- 分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 實(shí)驗(yàn)題目： 鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵 學(xué) 院： 專 業(yè)： 食品科學(xué)與工程 班 級： 姓 名： 學(xué) 號： 同組者： 一． 實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 1. 了解分光光度法測定物質(zhì)含量的一般條件及其選定方法 2. 掌握鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的方法 3. 了解722型分光光度計(jì)的構(gòu)造和使用方法 二． 實(shí)驗(yàn)原理 1. 光度法測定的條件：分光光度法測定物質(zhì)含量時(shí)應(yīng)注意的條件主要是 顯色反響的條件和測量吸光度的條件。顯色反響的條件有顯色劑用量、介質(zhì)的酸度、顯色時(shí)溶液溫度、顯色時(shí)間及干擾物質(zhì)的消除方法等;測量吸光度的條

2、件包括應(yīng)選擇的入射光波長，吸光度圍和參比溶液等。 2. 在PH=2-9的條件下，F(xiàn)e2+與鄰二氮雜菲〔o-ph〕生成極穩(wěn)定的橘紅色配合物，反響式如下： 此配合物的lgK穩(wěn) =21.3 摩爾吸收系數(shù)ε510 =1.1×104 在顯色前，首先用鹽酸羥胺把Fe2+ 復(fù)原成Fe3+.其反響式如下： 2Fe 3+ +2NH 2 OH· HC1 ＝2Fe 2+ +N 2↑+2H 2 O+4H + +2C1- 測定時(shí)，控制溶液酸度在PH=5左右較為適宜。酸度過高時(shí)，反響進(jìn)展較慢;酸度太低，那么Fe 2+水解，影響顯色。 三、 實(shí)驗(yàn)儀器 分光光度計(jì)、容量瓶、移液管、洗

3、瓶 四、實(shí)驗(yàn)步驟 1. 條件實(shí)驗(yàn) （1） 吸收曲線的測繪準(zhǔn)確吸取20 μg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL于50 mL容量瓶中，參加5%鹽酸羥胺溶液1 mL，搖勻，參加1 mol·L-1NaOAc溶液5 mL和0.1%鄰二氮雜菲溶液3 mL。以水稀釋至刻度，搖勻。放置10 min，在722型分光光度計(jì)上，用1 cm比色皿，以水為參比溶液，波長從570 nm到430 nm為止，每隔10 nm測定一次吸光度。如圖1所示，其最大吸收波長為510 nm，故該實(shí)驗(yàn)選擇測定波長為510 nm。 （2） 鄰二氮雜菲-亞鐵配合物的穩(wěn)定性 用上面溶液繼續(xù)進(jìn)展測定，其方法是在最大吸收波長510 nm處，每隔

4、一定時(shí)間測定其吸光度，及再參加顯色劑后立即測定一次吸光度，經(jīng)10、20、30、120 min后，再各測一次吸光度。 〔3〕顯色劑濃度實(shí)驗(yàn) 取50 mL容量瓶7只，編號。每只容量瓶中準(zhǔn)確參加20 ug·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL以及1mL5%鹽酸羥胺溶液，經(jīng)2 min后。再參加5 mL1 mol·L-1NaOAc溶液，然后分別參加0.1%鄰二氮雜菲溶液0.3mL、0.6mL、1.0 mL、1.5 mL、2.00 mL、3.0 mL和4.0 mL，用水稀釋至刻度，搖勻，在分光光度計(jì)上，用最大吸收波長510 nm、1 cm比色皿，以水為參比，測定上述溶液的吸光度。 2.鐵含量的測定 〔1

5、〕標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取50mL容量瓶6只，編號。分別吸取20 μg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL和10.0 mL于5只容量瓶中，另一只容量瓶中不加標(biāo)準(zhǔn)溶液〔配制空白溶液，作參比〕。然后各加5%鹽酸羥胺溶液，搖勻，經(jīng)2 min后，再各加5 mL1 mol·L-1NaAc溶液及3 mL1 g·L-1鄰二氮雜菲溶液，以水稀釋至刻度線，搖勻。放置10 min，在分光光度計(jì)上，用1 cm比色皿，在510 nm處，測定各溶液的吸光度。以鐵含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 （2） 未知液中鐵含量的測定 吸取5ml未知液代

6、替標(biāo)準(zhǔn)溶液，其他步驟均同上測定吸光度。由未知液的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出5ml未知液中的鐵含量，然后以每毫升未知液中含鐵多少微克表示結(jié)果。 五、記錄與計(jì)算 （1） 吸收曲線的測繪 波長 吸光度A 570 550 530 520 510 500 490 470 450 430 0.067 0.152 0.345 0.428 0.454 0.440 0.426 0.402 0.343 0.297 討論：從曲線可以看出，在一定圍，當(dāng)波長較小時(shí)，隨波長增加吸光度增加。測定的適宜波長是510nm。 〔2〕鄰二氮雜菲亞鐵配合物的穩(wěn)定性 放置時(shí)間 0

7、5 10 15 20 穩(wěn)定性 0.389 0.390 0.389 0.389 0.389 討論：從曲線可以看出，配合物穩(wěn)定性較好。 (3) 顯色劑用量的測定 容量瓶號 顯色劑量/mL 吸光度A 1 2 3 4 5 6 7 0.3 0.6 1.0 1.5 2.0 3.0 4.0 0.125 0.235 0.386 0.418 0.428 0.415 0.424 討論：當(dāng)顯色劑較小時(shí)，隨顯色劑含量增加吸光度增加，當(dāng)參加顯色劑為1.5ml吸光度最大。所以顯色劑的適宜參加的量為1.5ml （4） 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測繪與鐵含量的測定

8、 試液編號 標(biāo)準(zhǔn)溶液的量V/mL 總含鐵量m/ug 吸光度A 1 2 3 4 5 6 0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 0 40 80 120 180 200 0.000 0.195 0.357 0.479 0.678 0.831 未知液 5.0 122.3 0.498 討論；由測定的未知液吸光度為0.498通過函數(shù)關(guān)系可得鐵的含量為122.3m/μg 討論： 1.再用分光光度計(jì)測量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)應(yīng)注意什么？ 答：再用分光光度計(jì)測量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)，應(yīng)保持用一個(gè)比色皿測量，這樣可以減小比色皿自身對實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的影響。 2.如用配置已久的鹽酸羥胺溶液，對分析結(jié)果將帶來什么影響？ 答：鹽酸羥胺是用來將復(fù)原成的，如果配制已久，復(fù)原能力減弱，就會使局部鐵離子得不到復(fù)原，造成分析結(jié)果偏小 3.鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的適宜條件是什么？ 答：測定時(shí)，要控制PH=5左右較好，弱酸度較高，反響速度較慢，酸度較低，會使二價(jià)鐵離子水解，影響顯色 4. 為什么要用鄰二氮菲顯色后再測定？ 答：因?yàn)樗形⒘拷M分較少，對光的吸收很小，無法測出其吸光光度，參加顯色劑后，與被測組分形成絡(luò)合物，摩爾吸收系數(shù)較高，吸光明顯，容易測定。 . z.