2019-2020年高中生物第一部分微生物的利用實(shí)驗(yàn)1大腸桿菌的培養(yǎng)和分離學(xué)案浙科版.doc

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2019-2020年高中生物第一部分微生物的利用實(shí)驗(yàn)1大腸桿菌的培養(yǎng)和分離學(xué)案浙科版一、大腸桿菌1大腸桿菌屬于革蘭氏_性菌，為_(kāi)型的腸道桿菌。2結(jié)構(gòu)：屬于_生物。3用途：是在_技術(shù)中被廣泛采用的工具。4與人類的關(guān)系：它生活在人類的_中，一般對(duì)人_(“有”還是“無(wú)”)害。有一些菌株對(duì)人體能產(chǎn)生危害，因?yàn)樗鼈兛梢郧治g_并產(chǎn)生_。任何大腸桿菌如果進(jìn)入人的_系統(tǒng)，都會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害。答案：1.陰兼性厭氧2原核3基因工程4腸道無(wú)腸黏膜毒素泌尿二、細(xì)菌的培養(yǎng)和分離1細(xì)菌的培養(yǎng)：(1)細(xì)菌的繁殖：細(xì)菌以_的方式繁殖，分裂速度很快，約_分裂一次。(2)培養(yǎng)細(xì)菌的方法：培養(yǎng)細(xì)菌，需要將_轉(zhuǎn)移到_中，一般用_來(lái)轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物。(3)用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌的差別：接種后，培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基類型接種方法接種后培養(yǎng)的時(shí)間(單位：小時(shí))培養(yǎng)結(jié)果液體培養(yǎng)基接種環(huán)直接接種培養(yǎng)8 h后每毫升培養(yǎng)基中有_個(gè)細(xì)菌固體培養(yǎng)基用接種環(huán)在培養(yǎng)基上用_的方式接種(該法還可以用于_)培養(yǎng)1020 h后一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞會(huì)繁殖成許多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞，這些細(xì)胞_，形成_(1)分離的方法與特點(diǎn)：分離細(xì)菌有_和_2種。前者方法簡(jiǎn)單，后者操作復(fù)雜，但是_更易分開(kāi)。(2)本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行大腸桿菌分離，是用_法，就是在_培養(yǎng)基上進(jìn)行細(xì)菌的_。答案：1.(1)分裂20 min(2)已有細(xì)菌的培養(yǎng)物新的培養(yǎng)基接種環(huán)(3)幾億劃線分離細(xì)菌緊緊聚集在一起菌落2.(1)劃線分離法涂布分離法單菌落(2)劃線分離固體平面劃線培養(yǎng)三、滅菌操作1滅菌操作的原因：為了獲得_的培養(yǎng)物，其關(guān)鍵是防止外來(lái)_的入侵污染。因此，在培養(yǎng)微生物時(shí)必須進(jìn)行_操作。2無(wú)菌操作的條件：(1)首要條件是_必須是無(wú)菌的；(2)_必須是無(wú)菌的；(3)_的過(guò)程必須是無(wú)菌的等。答案：1.純凈雜菌無(wú)菌2(1)各種器皿(2)各種培養(yǎng)基(3)菌轉(zhuǎn)移操作四、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?1)進(jìn)行大腸桿菌的_，利用_培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的操作；(2)進(jìn)行大腸桿菌的_，用_培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌的_培養(yǎng)；(3)說(shuō)明大腸桿菌培養(yǎng)的條件和操作要求的原理。2實(shí)驗(yàn)步驟(1)滅菌：用_在_壓力下對(duì)LB液體培養(yǎng)基、LB固體培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌_min。(2)自_向_中轉(zhuǎn)移并分裝固體培養(yǎng)基：待冷卻至_左右，將三角錐形瓶中的_培養(yǎng)基，在_上分裝至幾個(gè)_中，制成_培養(yǎng)基。(3)將大腸桿菌自_轉(zhuǎn)移到_中的_培養(yǎng)基中培養(yǎng)：將大腸桿菌用_在無(wú)菌操作下接種至三角錐形瓶中的_培養(yǎng)基中，在_搖床振蕩培養(yǎng)_，完成大腸桿菌的培養(yǎng)。(4)將菌液在_培養(yǎng)基上進(jìn)行_分離：從前一步培養(yǎng)得到的菌液中獲取菌種，用_以_法接種至第二步所制得的_培養(yǎng)基中，在_恒溫箱中培養(yǎng)_h后觀察菌落。(5)菌種保存：在無(wú)菌操作下將_用_取出，再用_法接種在_上，_培養(yǎng)_后，_冰箱保存。3分離實(shí)驗(yàn)的結(jié)果及相應(yīng)結(jié)論：觀察中若看到在_的末端出現(xiàn)_，則表明菌已被分離了。4大腸桿菌分離的用途：_的通用方法，也是用于_的最簡(jiǎn)便方法之一。答案：1.(1)擴(kuò)增液體(2)分離固體平面劃線2(1)高壓鍋1 kg15(2)三角瓶培養(yǎng)皿60 固體超凈臺(tái)培養(yǎng)皿固體平面(3)斜面三角瓶液體接種環(huán)液體37 12 h(4)固體平面劃線接種環(huán)劃線固體平面371224(5)單菌落接種環(huán)劃線斜面37 24 h4 3劃線不連續(xù)的單個(gè)菌落4消除污染雜菌篩選高表達(dá)量菌株