2019年高考生物試題匯編（9月）L單元 生物工程及技術(shù)（含解析）.doc

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2019年高考生物試題匯編（9月）L單元 生物工程及技術(shù)（含解析） 目錄 L單元　生物工程及技術(shù) 1 L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 1 L2 微生物的類型、營養(yǎng)和代謝 3 L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 4 L4 酶的應(yīng)用 4 L5 DNA的粗提取及蛋白質(zhì)提取技術(shù) 4 L6 植物有效成分的提取 4 L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 4 L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 4 L9 動物細胞工程與單克隆抗體 4 L10 胚胎工程 4 L11 生物技術(shù)的安全性和倫理問題 4 L12 生態(tài)工程 4 L13 生物工程及技術(shù)綜合 4 L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚州中學高三8月開學考試】19、家庭制作果酒、果醋和腐乳三種傳統(tǒng)發(fā)酵食品的共同點是 A.菌種均可來自于自然環(huán)境 B.將原料滅菌后再發(fā)酵 C.保證在無氧環(huán)境下發(fā)酵 D.適宜的溫度都是相同的 【答案】【知識點】L1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 【答案解析】A解析：制作果酒、果醋和腐乳時菌種均可來自于自然環(huán)境，A正確；原料均不需滅菌，B錯；果醋的制作需要有氧的環(huán)境，C錯；制作果酒適宜的溫度是18～25℃，制作果醋適宜的溫度是30～35℃，制作腐乳適宜的溫度是15～18℃，D錯。 【生物卷（解析）xx屆湖南省師大附中高三第一次月考（xx09）】30.(15分，每空1分)完成下列傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的相關(guān)問題： Ⅰ.(5分)下圖是果酒和果醋制作的實驗流程和發(fā)酵裝置圖，請據(jù)圖示分析回答下列問題。 (1)請將圖1中的實驗流程補充完整。 (2)圖2中的充氣口在 時關(guān)閉，在 時連接充氣泵，并不斷向內(nèi)泵入無菌空(氧)氣。 (3)排氣口在果酒發(fā)酵時排出的氣體是由 產(chǎn)生的二氧化碳(CO2)。 (4)葡萄酒呈現(xiàn)紅色的原因是紅色葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中，重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精的顏色反應(yīng)為 色。 Ⅱ.(5分)下圖為腐乳制作的流程示意圖，請據(jù)圖分析回答下列問題。 ―→―→―→ (1)現(xiàn)代科學研究表明，許多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是　 毛霉　。 (2)傳統(tǒng)的制作過程中，豆腐塊上生長的“霉”來自 。而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格的無菌條件下，將優(yōu)良的菌種接種在豆腐上，這樣可以 ，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 (3)鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的，鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右。加酒的作用：一是可以 ；二是能使腐乳具有 。 Ⅲ.(5分)下圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實驗流程示意圖，請據(jù)圖分析回答下列問題。 (1)制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料，原因是 。 (2)制備泡菜的鹽水中清水與鹽的質(zhì)量比約為 ，鹽水煮沸的目的是 ，冷卻后再使用的目的是 。 (3)泡菜的制作方法不當，很容易造成泡菜變質(zhì)，甚至發(fā)霉變味，發(fā)霉主要與 有關(guān)。 【答案】【知識點】L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 【答案解析】Ⅰ. (1)醋酸發(fā)酵 (2)果酒發(fā)酵　果醋發(fā)酵　(3)酵母菌　(4)灰綠　 Ⅱ.(1)　 毛霉　(2)　空氣中的毛霉孢子　 　避免其他菌種的污染　 (3)　抑制微生物生長　 　獨特的香味　 Ⅲ. (1)　亞硝酸鹽的含量低　 (2)　4∶1　 　殺滅雜菌　　保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響　 (3)　霉菌　 解析：Ⅰ.（1）圖1方框中的內(nèi)容是果醋發(fā)酵。 （2）果酒發(fā)酵是在無氧環(huán)境中進行的，而果醋制作是在有氧環(huán)境中進行的，因此圖2裝置中的充氣口在果酒發(fā)酵時關(guān)閉，在果醋發(fā)酵時連接充氣泵，并連續(xù)不斷地向內(nèi)泵入空氣。 （3）酵母菌無氧呼吸時，除了產(chǎn)生酒精，還會釋放二氧化碳，因此排氣口在果酒發(fā)酵時排出的氣體是由酵母菌產(chǎn)生的CO2，在果醋發(fā)酵時排出的是含氧量少的空氣、CO2。 （4）果酒發(fā)酵過程中，紅色葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中，因此葡萄酒呈現(xiàn)紅色；重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精的反應(yīng)出現(xiàn)灰綠色。 Ⅱ.(1)參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種，其中起主要作用的是毛霉。 (2)傳統(tǒng)的制作過程中，腐乳制作中的菌種來自空氣中的毛霉孢子。而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格的無菌條件下，將優(yōu)良的菌種接種在豆腐上，這樣可以　避免其他菌種的污染　，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 (3) 腐乳制作中鹵湯中的酒的作用：一是可以　抑制微生物生長　；二是能使腐乳具有　獨特的香味　。 Ⅲ.（1）制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料，原因是亞硝酸鹽的含量低. （2）制備泡菜的鹽水中清水與鹽的質(zhì)量比約為4：1，鹽水加熱煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響． (3)泡菜的發(fā)霉變味主要與霉菌有關(guān)。 【思路點撥】Ⅰ.圖1是果酒和果醋制作的實驗流程，酒精發(fā)酵后還可以進行果醋發(fā)酵；圖2是果酒和果醋的發(fā)酵裝置圖，其中排料口的作用是出料、檢測；充氣口的作用是在果醋制作時通入氧氣的；排氣孔是排氣，其彎彎曲曲的好處是防止雜菌和浮塵的污染。 Ⅱ.腐乳制作中起主要作用的是毛霉；傳統(tǒng)的制作過程中，腐乳制作中的菌種來自空氣中的毛霉孢子；為了避免其他菌種的污染，現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格的無菌條件下，將優(yōu)良的菌種接種在豆腐上；腐乳制作中鹵湯中添加的酒可以抑制微生物生長，也能使腐乳具有　獨特的香味。 Ⅲ. 新鮮的蔬菜和原料里面亞硝酸鹽含量低;腌制過程中因為鹽水比細胞內(nèi)液濃度高，細胞會失水，產(chǎn)生的水使壇子中溶液量增加;為了抑制其它雜菌的繁殖，可以利用多種措施如：加鹽、加白酒、加水密封等;制備泡菜的鹽水中清水與鹽的質(zhì)量比約為4：1，鹽水要加熱煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響;泡菜的發(fā)霉變味主要與霉菌有關(guān)。 【理綜卷（生物解析）xx屆河北省唐山市高三9月模擬考試（xx09）WORD版】39．【生物——選修1：生物技術(shù)實驗】（15分） 根據(jù)相關(guān)知識，回答關(guān)于果酒、果醋和腐乳制作的相關(guān)問題。 （1）當 、 時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。 （2）在 條件下，重鉻酸鉀與酒精發(fā)生反應(yīng)呈現(xiàn)____ 色。 （3）下圖為腐乳制作的實驗流程示意圖，據(jù)圖回答下列問題 ①圖中A代表 ，其主要目的是____ ，同時還能__ _； ②在配制鹵湯中酒的含量一般控制在____ 左右，加酒含量過高腐乳成熟時間將會 ；酒精含量過低， ，可能導致豆腐腐敗。 【答案】【知識點】L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 【答案解析】（15分；前5空每空1分，后5空每空2分） （1）氧氣；糖源都充足 （2）酸性；灰綠色 （3）①加鹽腌制；析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬； 抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì) ②12%；延長；不足以抑制微生物的生長 解析：在氧氣、糖源都充足的條件下，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精發(fā)生反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色；在腐乳制作過程中，豆腐上長出毛霉后需加鹽腌制，鹽的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，還能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。鹵湯中加酒需適量，加酒過高使腐乳成熟時間延長，酒含量低，不足以抑制微生物的生長。 【思路點撥】根據(jù)果酒發(fā)酵及腐乳制作的原理過程分析。 L2 微生物的類型、營養(yǎng)和代謝 L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚州中學高三8月開學考試】33、（8分）下表中甲、乙分別是分離兩種土壤中微生物的培養(yǎng)基的配方，回答下列問題： （1）從作用上看，甲培養(yǎng)基屬于_____________，其中能提供氮源的物質(zhì)是________。 （2）為了判斷甲培養(yǎng)基是否具有篩選作用，應(yīng)在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上接種等量的相應(yīng)濃度的土壤稀釋液，相同且適宜條件下培養(yǎng)。如果________________，則證明該培養(yǎng)基具有篩選作用。 （3）如果將B配制成固體培養(yǎng)基，則在培養(yǎng)基上長出的菌落______ ___（是/否）都能分解纖維素，理由是_______________________________________ ____。該培養(yǎng)基的主要作用是___________________________________________________________。 （4）為了計數(shù)微生物的數(shù)量，接種時應(yīng)采用___________________法，一位同學在4個平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為180、155、176、129個，則每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為___________________。 【答案】【知識點】L3微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】（1）選擇培養(yǎng)基 尿素 （2）上述培養(yǎng)基上長出的菌落數(shù)量明顯少于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落 （3）否 因培養(yǎng)基中還有水解酪素等能提供碳源，纖維素被分解后產(chǎn)生的糖類等也可為其它微生物生長提供碳源（合理即得分） 能增加纖維素分解菌的濃度，確保從樣品中分離到所需的微生物(或選擇培養(yǎng)等) （4）稀釋涂布平板 1.6109 解析：（1）甲培養(yǎng)基中以尿素為唯一的氮源，可以篩選出尿素分解菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 （2）為了判斷甲培養(yǎng)基是否具有篩選作用，應(yīng)設(shè)計對照試驗，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上接種等量的相應(yīng)濃度的土壤稀釋液，在相同且適宜條件下培養(yǎng)。如果上述培養(yǎng)基上長出的菌落數(shù)量明顯少于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落，則證明該培養(yǎng)基具有篩選作用。 （3）由于B培養(yǎng)基不是以纖維素作為唯一的碳源，還有水解酪素等能提供碳源，所以在培養(yǎng)基上長出的菌落不都能分解纖維素。乙培養(yǎng)基能增加纖維素分解菌的濃度，確保從樣品中分離到所需的微生物(或選擇培養(yǎng)等)。 （4）對微生物計數(shù)應(yīng)采用稀釋涂布平板法接種。每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量應(yīng)求培養(yǎng)后菌落數(shù)的平均值，即為（180+155+176+129）106/（60.1）= 1.6109。 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚州中學高三8月開學考試】22、下列有關(guān)制備固定化酵母細胞敘述正確的是 A．在向溶化好的海藻酸鈉溶液中加入的必須是已活化的酵母細胞 B．溶化好的海藻酸鈉溶液必須冷卻至室溫，才能加入細胞 C．溶解海藻酸鈉，最好采用小火，或者持續(xù)加熱的方法 D．在固定化酵母細胞的過程中，要以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中 【答案】【知識點】L3酶的應(yīng)用 【答案解析】ABD解析:海藻酸鈉加熱時很容易發(fā)生焦糊，所以溶解海藻酸鈉，最好采用小火，或者間斷加熱的方法，C錯。 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚州中學高三8月開學考試】20、科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解石油成分“多環(huán)芳烴菲”的菌株Q，步驟如下圖所示，下列相關(guān)的敘述中，錯誤的是 A. 步驟①—③中，培養(yǎng)液中需加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源 B. 步驟①—③中，將錐形瓶放在搖床上充分振蕩，使菌株與培養(yǎng)液充分接觸 C. 步驟④是利用平板劃線法純化菌株Q，圖中所示接種環(huán)最少灼燒2次 D. 步驟④中每一區(qū)域可重復(fù)畫幾次，但1區(qū)和5區(qū)不能出現(xiàn)交叉 【答案】【知識點】L3微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】C解析: 要想分離能降解石油成分“多環(huán)芳烴菲”的菌株，配制培養(yǎng)液時，必須用多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源，故A正確；培養(yǎng)過程中，將錐形瓶充分震蕩，目的是使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，B正確；接種環(huán)在每次接種前和接種后都要通過灼燒滅菌，圖中所示接種環(huán)要灼燒6次，C錯誤；純化菌株Q的過程中，在做第二次以及其后的劃線操作時，總是從上次劃線的末端開始劃線，1區(qū)和5區(qū)不能出現(xiàn)交叉，D正確。 【生物卷（解析）xx屆云南省玉溪一中高三上學期第一次月考（xx09）】選一．（15分）炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病，炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀，對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過實驗確診。 （1）細菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。 （2）細菌鑒定：實驗流程如圖所示 (1)挑選可疑菌落制片后，用__________________(1分)觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。 (2)對配制的液體培養(yǎng)基等需采取______________(2分)滅菌；實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為____________________(2分)（填“無機碳”或“有機碳”）。 (3)接種可疑菌后，35 ℃培養(yǎng)24 h，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是__________________(2分)，對照組試管中應(yīng)加入__________(2分)，與實驗組同時培養(yǎng)6 h后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組______________(2分)（填“高”或“低”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。 (4)對排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細胞除T細胞、B細胞外，還有_____________(2分)和_______________(2分)。 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】(1)顯微鏡（1分）(2)高壓蒸汽　有機碳　　(3)細菌大量繁殖　等量生理鹽水　低　(4)吞噬細胞、漿細胞 解析：(1) 炭疽桿菌是原核生物，為單細胞生物，觀察它的結(jié)構(gòu)應(yīng)借助于顯微鏡。 （2）微生物培養(yǎng)基需采用高壓蒸汽滅菌。實驗所用培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為有機碳，因為炭疽桿菌為異養(yǎng)型生物。 (3)35℃培養(yǎng)24小時，細菌大量繁殖會導致液體培養(yǎng)基變渾濁，對照組不能含有細菌，根據(jù)等量原則故應(yīng)該是等量的生理鹽水，加入噬菌體后，由于噬菌體能夠使炭疽桿菌死亡，故實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低 （4）抗體是由體液免疫過程產(chǎn)生，參與體液免疫的細胞有T細胞、B細胞、吞噬細胞、漿細胞等。 【生物卷（解析）xx屆江西省師大附中等五校高三第一次聯(lián)考（xx08）】31、[生物——選修1：生物技術(shù)實驗]（10分） 無菌操作是微生物接種技術(shù)的關(guān)鍵；傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物分離、純化、應(yīng)用過程及植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)過程中，均要無菌操作。回答下列相關(guān)問題： （1）消毒和滅菌是兩個不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠喪失生長繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害。下列哪些事物適用于消毒處理 。 ①皮膚　 ②飲用水　 ③牛奶　 ④注射器　 ⑤培養(yǎng)皿　 ⑥接種環(huán)　 ⑦培養(yǎng)基　 ⑧果汁　 ⑨醬油　 ⑩手術(shù)刀 A．①②③⑧⑨　B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑤⑥⑧ D．以上全部 （2）配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行 ，接種前要進行 ，在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行。 （3）在微生物的實驗室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是____ 。右圖是利用 法進行大腸桿菌接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。為達到這一目的，操作上應(yīng)注意： ① 每次劃線前要 ； ② 冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃； ③ 首尾區(qū) 。 （4）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是 ，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。 （5）利用培養(yǎng)基不僅可以分離培養(yǎng)大腸桿菌，也可以進行植物組織培養(yǎng)。與大腸桿菌培養(yǎng)明顯不同的是，用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要加入 。 （6）有位同學在家制作泡菜時，為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素，結(jié)果發(fā)酵失敗，原因可能是 。 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】（1）A （2）調(diào)整pH 高壓蒸汽滅菌 （3）防止外來雜菌的入侵 平板劃線 灼燒接種環(huán) 不連接（不重疊） （4）將未接種（接種等量無菌水）的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當時間 （5）植物激素(或生長素和細胞分裂素)（6）青霉素殺死了乳酸菌 解析：（1）皮膚、飲用水、牛奶、果汁、醬油應(yīng)消毒處理，注射器、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、培養(yǎng)基、手術(shù)刀應(yīng)滅菌處理。 （2）配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行調(diào)整pH，接種前要進行高壓蒸汽滅菌，在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行。 （3）在微生物的實驗室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。微生物的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線進行時應(yīng)每次劃線前要灼燒接種環(huán)，冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃，首尾區(qū)不連接。 （4）接種前檢測培養(yǎng)基是否被污染的方法為將未接種（接種等量無菌水）的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。 （5）與大腸桿菌培養(yǎng)明顯不同的是，用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要加入植物激素(或生長素和細胞分裂素)。 （6）制作泡菜利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵，但乳酸菌對青霉素敏感，會導致死亡。 【理綜卷(解析)xx屆廣西桂林中學高三8月月考（xx08）】39.[生物—選修1：生物技術(shù)實踐]（8分） 有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}： （1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以__________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 （2）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力_________________。通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_______和__________。無菌技術(shù)要求實驗操作應(yīng)在酒精燈___________附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。 （3）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即________和____________。 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】（1）原油 選擇 （2）強 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰 （3） 平板劃線法 稀釋涂布平板法 （1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 （2）降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大；實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等．無菌操作要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染。 （3）分離純化菌種時，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便純化菌種。 【思路點撥】本題的知識點是微生物培養(yǎng)過程中的無菌技術(shù)，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，主要考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。 【典型總結(jié)】（1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌。 （2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。 培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。 （3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落。 【理綜卷（生物解析）xx屆寧夏銀川一中高三上學期第一次月考（xx08）】39．【生物——選修1：生物技術(shù)實踐專題】（15分） 炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病，炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過實驗確診。 (1)細菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。 (2)細菌鑒定：實驗流程如下圖所示 ①對配制的液體培養(yǎng)基需采取 方法滅菌；實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為 (填“無機碳”或“有機碳”)。在提供主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足炭疽桿菌生長對 、 以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求。 ②挑選可疑菌落制片后，用 觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。 ③接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24小時，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是 ，對照組試管中應(yīng)加入 ，與實驗組同時培養(yǎng)6小時后，若實驗組液體培養(yǎng)基的 比對照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。 ④對排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細胞除T細胞、B細胞外，還有 、 。 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】（除標明外，其余每空2分，共15分） ①高壓蒸汽（1分） 有機碳　 pH、氧氣 ②顯微鏡　 ③細菌大量繁殖　 等量生理鹽水　 渾濁度　 ④吞噬細胞、漿細胞 解析：液體培養(yǎng)基采用高壓蒸汽法滅菌，由于炭疽桿菌是異養(yǎng)型生物，因而液體培養(yǎng)基中的碳源為有機碳；培養(yǎng)基除了必需的營養(yǎng)外，還需適宜的PH及氧氣。炭疽桿菌需通過顯微鏡才能觀察；對照組試管中應(yīng)加入等量的生理鹽水，通過比較兩試管的混濁度可判斷疑似患者被炭疽桿菌感染，抗體是在體液免疫中產(chǎn)生的，抗原先被吞噬細胞識別、處理、呈遞給T細胞，T細胞產(chǎn)生淋巴因子及抗原共同刺激B細胞，使其增殖分化形成漿細胞，漿細胞合成并分泌抗體。 【思路點撥】根據(jù)微生物培養(yǎng)及免疫知識分析 L4 酶的應(yīng)用 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚州中學高三8月開學考試】18、在利用雞血進行“DNA的粗提取與鑒定”的實驗中，相關(guān)敘述正確的是 A．用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L，濾去析出物 B．調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì) C．將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍色 D．用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相同 【答案】【知識點】L4 DNA的粗提取及蛋白質(zhì)提取技術(shù) 【答案解析】B解析：DNA在NaCl溶液濃度為0.14mol/L時溶解度最低，將會析出，A錯；調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度可以去除部分雜質(zhì)，加入木瓜蛋白酶可以分解蛋白質(zhì)，B正確；用二苯胺試劑檢測DNA時，需水浴加熱，C錯；用菜花替代雞血作為實驗材料，應(yīng)首先去除細胞壁，D錯。 L5 DNA的粗提取及蛋白質(zhì)提取技術(shù) L6 植物有效成分的提取 【理綜卷（生物解析）xx屆廣東省廣州市海珠區(qū)高三摸底考試（xx08）】6．關(guān)于“克隆羊”、“試管羊”、“轉(zhuǎn)基因羊”的說法，合理的是 A．它們的遺傳物質(zhì)都只來自于一個親本 B．它們在形成過程中一般都有卵細胞的參與 C．它們是通過相同的生殖方式獲得親本的優(yōu)良性狀 D．培育過程都用到核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù) 【答案】【知識點】L6 基因工程與蛋白質(zhì)工程L9 胚胎工程 【答案解析】B解析：轉(zhuǎn)基因羊：在羊的受精卵內(nèi)加入了其他物種的基因后誕生的羊。試管羊：將羊的精子和卵子在體外進行受精然后植入母體而誕生的羊?？寺⊙颍簩⒀虻募毎酥踩肓硪恢谎虻娜ズ寺鸭毎?，然后植入母體而誕生的羊，A錯誤；B正確；克隆羊是無性生殖，另外兩個屬于有性生殖，C錯誤；三者都用到了胚胎移植，只有克隆羊用到了核移植，D錯誤 L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【生物卷（解析）xx屆江西省南昌二中高三上學期第一次考試（xx08）】41．【生物選修3 現(xiàn)代生物技術(shù)】（15分） 回答下列與基因工程有關(guān)的問題： （1）切割DNA的工具是 酶，這類酶主要是從 中分離純化出來的。若切割形成的是平末端，則需要用 DNA連接酶連接。 （2）一個基因表達載體的組成，除了目的基因外，還必須有 ________ 、 _ 以及標記基因等，標記基因的作用是 。 （3）將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ? ，此外還可以采用 法和 法。 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】 【思路點撥】根據(jù)基因工程的操作步驟內(nèi)容進行分析。 南昌二中xx學年度上學期第一次考試 高三生物試卷參考答案 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚州中學高三8月開學考試】30、（9分）下圖1表示利用生物技術(shù)制備抗X的單克隆抗體的過程；圖2表示體外受精培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過程；圖3表示番茄和馬鈴薯植物體細胞融合和再生植株的過程，請據(jù)圖回答下面的問題： （1）圖1中注射到小鼠體內(nèi)的物質(zhì)是____________。融合后的細胞經(jīng)過多次篩選才能獲得理想的細胞，此類細胞的特點是___________。該過程所用的生物技術(shù)有__________。 （2）圖2中參與體外受精的精子需要經(jīng)過成熟和___________的過程，才能使卵細胞受精。若要獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可對圖2囊胚中的___________均等分割后進行胚胎移植，暫不移入的胚胎可使用________________方法保存。 （3）圖3中過程①是植物細胞形成__________________________的階段，該過程所用的酶是______________。植物體細胞雜交技術(shù)的重要意義是__________________。 【答案】【知識點】L7植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù)L8動物細胞工程與單克隆抗體 【答案解析】（1）抗原X　 既能無限增殖又能產(chǎn)生抗X的抗體　 動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù) （2）獲能 　內(nèi)細胞團　 　冷凍(或低溫) （3）原生質(zhì)體　 纖維素酶和果膠酶　 克服了遠緣雜交不親和的障礙 解析：（1）圖1是制備抗X抗原的單克隆抗體的過程，要想獲得分泌抗X抗原的抗體，需要對小鼠注射相應(yīng)的抗原即X抗原。融合后經(jīng)篩選的細胞為雜交瘤細胞，具備雙親細胞的遺傳特性，此類細胞的特點是既能無限增殖又能產(chǎn)生抗X的抗體。兩類細胞融合需要細胞融合技術(shù)，雜交瘤細胞在體內(nèi)或體外培養(yǎng)，需要細胞培養(yǎng)技術(shù)，所以該過程所用的生物技術(shù)有動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。 （2）圖2精子需要成熟和獲能的過程才具備受精的能力．若要獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可以在體外進行胚胎分割，胚胎分割需要對囊胚中內(nèi)細胞團均分。，暫不移入的胚胎可使用冷凍(或低溫)方法保存。 （3）圖3所示為植物體細胞雜交和植物組織培養(yǎng)過程。體細胞雜交的第一步就是制備原生質(zhì)體，可以利用纖維素酶和果膠酶將植物細胞壁分解掉。植物體細胞雜交技術(shù)的重要意義是克服了遠緣雜交不親和的障礙。 【思路點撥】圖1所示為單克隆抗體的制備過程．小鼠的B細胞經(jīng)過免疫，再與能無限增殖的骨髓瘤細胞融合，形成的雜交瘤細胞同時具備了分泌抗體和無限增殖的能力。 圖2所示為胚胎工程中的體外受精和胚胎移植技術(shù)．精子只有經(jīng)過獲能處理后才具備使卵細胞受精的能力．將內(nèi)細胞團進行均等切割后，每個部分都可以再發(fā)育成一個個體。 圖3分析，①表示去除細胞壁，②表示原生質(zhì)體的融合，③表示再生細胞壁，④表示脫分化，⑤表示再分化，⑥表示移栽。 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚州中學高三8月開學考試】24、下列屬于植物細胞表現(xiàn)出全能性的必需條件的是 Ａ．適宜的營養(yǎng) Ｂ．適宜的光照和溫度 Ｃ．導入相關(guān)的外源基因 Ｄ．脫離母體 【答案】【知識點】L7植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【答案解析】ABD解析: 植物細胞表現(xiàn)出全能性的必需條件有脫離母體、適宜的營養(yǎng)、適宜的光照和溫度等，A、B、D正確，C錯。 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺州中學高三上學期第一次統(tǒng)練（xx09）】42.（13分）多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠使細胞壁破損。成熟的番茄果實中，PG合成顯著增加，能使果實變紅變軟，不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達，可延長果實保質(zhì)期。科學家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上，導入番茄細胞中，得到轉(zhuǎn)基因番茄，具體操作流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題： (1) 若已獲取PG的mRNA，可通過 獲取PG基因。 (2)用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后，可用含有________的培養(yǎng)基進行篩選，理由是______________。之后，還需將其置于質(zhì)量分數(shù)為25%的蔗糖溶液中，觀察細胞________現(xiàn)象來鑒別細胞壁是否再生。 (3)由于導入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA，且能與________互補結(jié)合，因此可抑制PG基因的正常表達。若________，則可確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。 (4)將轉(zhuǎn)入反向鏈接PG基因的番茄細胞培育成完整的植株，需要用________技術(shù)；其中，愈傷組織經(jīng)________形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加____________________。 (5)將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時間后，單株鮮重和光合作用強度的變化如圖。據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強度的變化趨勢是__________，單株鮮重的變化趨勢是________________________。據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機物的量______(能、不能)滿足自身最佳生長的需要。 (6)據(jù)圖推測，若要在誘導試管苗生根的過程中提高其光合作用能力，應(yīng)________(降低，增加)培養(yǎng)基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【答案解析】 解析：利用mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄法可獲取目的基因，觀察圖示可知，質(zhì)粒上有2個標記基因，但四環(huán)素抗性基因插入了目的基因，結(jié)構(gòu)被破壞，而卡哪霉素抗性基因正常作為標記基因，因而在培養(yǎng)基中加入卡哪霉素可篩選出含目的基因的原生質(zhì)體，原生質(zhì)體是否再生出細胞壁可通過質(zhì)壁分離現(xiàn)象判斷；目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA能與天然的PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA互補，形成雙鏈RNA，抑制翻譯過程，基因不能表達，目的基因表達成功的標志是番茄果實的保質(zhì)期延長。番茄細胞培育成植株需用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織經(jīng)再分化形成完整植株，此過程除需要必需的營養(yǎng)外還需加植物激素調(diào)節(jié)；從曲線圖中觀察可知，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強度的變化趨勢是逐漸減小，單株鮮重的變化趨勢是先增加后下降，據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機物的量不能滿足自身最佳生長的需要。從圖中可知，降低培養(yǎng)基中蔗糖濃度可提高試管苗的自養(yǎng)能力， 【思路點撥】根據(jù)基因工程知識分析，注意比較曲線與變量間的關(guān)系。 【典型總結(jié)】識圖題必需先讀懂圖示內(nèi)容，并獲取正確的信息，然后結(jié)合相關(guān)知識進行分析。 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺州中學高三上學期第一次統(tǒng)練（xx09）】39.人類 B 型血友病屬于伴 X 隱性遺傳病，因為血液中缺少凝血因子Ⅸ導致凝血異常。下列關(guān)于對患者進行基因治療的設(shè)計，正確的是 A．逆轉(zhuǎn)錄病毒的核酸可直接用作載體 B．需將凝血因子Ⅸ和載體連接起來 C．必須把目的基因插入到 X 染色體 D．需選擇患者自身細胞作為受體細胞 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】D 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺州中學高三上學期第一次統(tǒng)練（xx09）】30．多聚酶鏈式反應(yīng)（PCR）是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán)：95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性（引物與DNA模板鏈結(jié)合）→72℃下引物鏈延伸（形成新的脫氧核苷酸鏈）。下列有關(guān)PCR過程的敘述中不正確的是： A．變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵，也可利用解旋酶實現(xiàn) B．復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補配對原則完成 C．延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸 D．PCR與細胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】C 解析：延伸過程中需要的是四種脫氧核糖核苷酸而不是核糖核苷酸。 【思路點撥】根據(jù)PCR技術(shù)的相關(guān)知識進行分析。 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺州中學高三上學期第一次統(tǒng)練（xx09）】27.報道稱深圳某生物制品公司將人的乙肝抗原基因?qū)虢湍妇?，生產(chǎn)出的乙型肝炎疫苗，致使嬰兒接種后發(fā)生疑似預(yù)防接種異常反應(yīng)，并已出現(xiàn)死亡病例。下列關(guān)于此乙肝疫苗的說法正確的是 A．乙肝抗原基因可從酵母菌基因文庫中獲得 B．轉(zhuǎn)基因過程中用到的質(zhì)粒是一種類似于染色體的鏈狀DNA的遺傳物質(zhì) C．轉(zhuǎn)基因酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的理論基礎(chǔ)之一是生物共用一套遺傳密碼 D．將乙肝抗原基因?qū)虢湍妇鷷r用CaCl2處理酵母菌，可增大細胞膜的通透性 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】C 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺州中學高三上學期第一次統(tǒng)練（xx09）】26.某科學家從細菌中分離出耐高溫淀粉酶(Amy)基因a，通過基因工程的方法，將a轉(zhuǎn)到馬鈴薯植株中，經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細胞中存在，下列說法正確的是 A．基因a只有導入到馬鈴薯受精卵中才能表達 B．目的基因來自細菌，可以不需要載體直接導入受體細胞 C．基因a導入成功后，將抑制細胞原有的新陳代謝，開辟新的代謝途徑 D．目的基因進入受體細胞后，可隨著馬鈴薯的DNA分子的復(fù)制而復(fù)制，傳給子代細胞并表達 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】D 解析：基因a導入到馬鈴薯體細胞中也可表達，目的基因必需與載體結(jié)合才能導入受體細胞，不能直接導入受體細胞；基因a導入成功后，不會抑制細胞原有的新陳代謝。 【思路點撥】根據(jù)基因工程的知識分析。 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺州中學高三上學期第一次統(tǒng)練（xx09）】15．人的糖蛋白必須經(jīng)內(nèi)質(zhì)和高爾基體加工合成。通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，可以使人的糖蛋白基因得以表達的受體細胞是 A．大腸桿菌 B．酵母菌 C．T4噬菌體 D．質(zhì)粒DNA 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】B 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺州中學高三上學期第一次統(tǒng)練（xx09）】14.下列關(guān)于基因工程的敘述，錯誤的是(　　)。 A．目的基因和受體細胞均可來自動、植物或微生物 B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶 C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性 D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】D 解析：載體上的抗體基因不能促進目的基因的表達。 【思路點撥】根據(jù)基因工程的知識分析。 【生物卷（解析）xx屆江西省師大附中等五校高三第一次聯(lián)考（xx08）】32、[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]（10分） 應(yīng)用生物工程技術(shù)獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請據(jù)圖回答下列問題： (1) 在培育轉(zhuǎn)人生長激素基因牛過程中，②過程常用的方法是 ，采用 技術(shù)可以獲得多頭基因型相同的轉(zhuǎn)基因牛。 (2) 轉(zhuǎn)人生長激素基因?？赏ㄟ^乳腺細胞分泌乳汁來生產(chǎn)人生長激素，在構(gòu)建基因表達載體時，人生長激素基因的首端必須含有 。 (3) prG能激發(fā)細胞不斷分裂，通過基因工程導入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，Ⅲ代表的細胞具有 的特點。 (4) 在抗蟲棉培育過程中，④過程常采用的方法是 ；⑤過程采用的技術(shù)是 ；在分子水平上可采用 方法來檢測轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的抗蟲基因是否成功表達。 (5) 下面是獲取目的基因的幾種方法，其中需要模板的是_______。 ① 從基因組文庫中獲取目的基因 ② 利用PCR技術(shù)擴增目的基因 ③ 構(gòu)建cDNA文庫 ④ 通過DNA合成儀利用化學方法人工合成目的基因 A．①② B．②③ C．①③ D．①④ (6) 當獲能后的精子與卵子相遇時，首先發(fā)生 ，釋放出有關(guān)的酶直接溶解卵丘細胞間的物質(zhì)，形成精子穿越放射冠的通路。防止多精入卵的生理反應(yīng)依次有透明帶反應(yīng)、 。 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程L9 動物細胞工程與單克隆抗體E4 減數(shù)分裂和受精作用L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【答案解析】(1) 顯微注射法 胚胎分割 (2) 牛乳腺蛋白基因的啟動子 (3) 既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體 (4) 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 植物組織培養(yǎng) 抗原--抗體雜交 (5) B (6) 頂體反應(yīng) 卵細胞膜的封閉作用 解析：（1）將目的基因?qū)雱游锛毎Ｓ蔑@微注射法。采用胚胎分割技術(shù)可以獲得多頭基因型相同的轉(zhuǎn)基因牛。 （2）在構(gòu)建基因表達載體時，人生長激素基因的首端必須含有牛乳腺蛋白基因的啟動子。 （3）由圖可知，Ⅲ為雜交瘤細胞，其既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體。 （4）在抗蟲棉培育過程中，常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細胞。將棉花受體細胞培育成抗蟲棉植株常采用植物組織培養(yǎng)的方法。檢測轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的抗蟲基因是否成功表達可采用抗原--抗體雜交法。 （5）利用PCR技術(shù)擴增目的基因、構(gòu)建cDNA文庫需要模板。 （6）當獲能后的精子與卵子相遇時，首先發(fā)生頂體反應(yīng)，釋放出有關(guān)的酶直接溶解卵丘細胞間的物質(zhì)，形成精子穿越放射冠的通路。防止多精入卵的生理反應(yīng)依次有透明帶反應(yīng)和卵細胞膜的封閉作用。 【理綜卷(解析)xx屆廣西桂林中學高三8月月考（xx08）】40.（8分） 下圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過程示意圖。據(jù)圖回答： （1）甲圖所示為 技術(shù)，可以用來擴增目的基因。此過程中所使用的酶是。 （2）乙圖為獲得抗蟲棉技術(shù)的流程。A過程需要的酶有________、________。圖中將目的基因?qū)胫参锸荏w細胞采用的方法是 。 在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。則C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入________。 （3） 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的具體方法是使用標記的______與提取出的_____做分子雜交。 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】（1）PCR、Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）； （2）限制酶、DNA連接酶；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；卡那霉素； （3）目的基因 mRNA 分子 （1）由甲圖的反應(yīng)過程可知是體外獲得目的基因的方法即PCR技術(shù)，在這個過程中所使用的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。 （2）圖乙中A過程是獲得重組質(zhì)粒的過程，該過程需要用限制性內(nèi)切酶對質(zhì)粒、目的基因進行切割，再在DNA連接酶的催化作用下形成重組質(zhì)粒。因土壤農(nóng)桿菌易侵染植物細胞，故一般用土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛毎Ｅ囵B(yǎng)基中加入卡那霉素是為了篩選導入重組質(zhì)粒的受體細胞。 （3）因mRNA堿基可以與目的基因模板鏈堿基互補配對，故可用標記的目的基因作探針對細胞中的mRNA進行檢測，以確定目的基因是否轉(zhuǎn)錄。 【典型總結(jié)】1、檢測受體細胞中的標記基因是否表達，即是否表現(xiàn)出標記基因的性狀，從而判斷受體細胞中是否已導入含有目的基因的運載體。如果檢測出標記基因表達的性狀，說明運載體已導入受體細胞。 2、檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因，這是目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。 檢測方法是：采用DNA分子雜交技術(shù)。先將轉(zhuǎn)基因生物的基因組提取出來；把目的基因的DNA片段用放射性同位素作標記做成探針；使探針與基因組DNA雜交，如果出現(xiàn)雜交帶，就表明目的基因已插入染色體DNA中。 3、檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，這是檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步。采用DNA與RNA分子雜交技術(shù)。從轉(zhuǎn)基因生物中提取出mRNA，把目的基因的DNA片段用放射性同位素作標記做成探針；使探針與mRNA雜交，如果出現(xiàn)雜交帶，就表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNA。 4、檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體（對抗進行同位素標記）進行抗原——抗體雜交；如果出現(xiàn)雜交帶，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。 【理綜卷(解析)xx屆廣西桂林中學高三8月月考（xx08）】3.下列關(guān)于各種酶的敘述，不正確的是: A.DNA解旋酶能斷裂堿基對之間氫鍵 B.RNA聚合酶能催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄 C.一種DNA限制酶能切割出多種黏性末端 D.胰蛋白酶可以將離體的動物組織分散成單個細胞 【答案】【知識點】F3 L7基因的結(jié)構(gòu)和基因的表達 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】C DNA解旋酶用來打開堿基間的氫鍵，使雙鏈變?yōu)閱捂?，A正確；RNA聚合酶是DNA轉(zhuǎn)錄時與啟動子結(jié)合，使轉(zhuǎn)錄開始，B正確；DNA限制酶具有專一性，一種限制酶只能切出一種粘性末端，C錯誤；胰蛋白酶可以將離體組織分散成單個細胞，D正確； 【理綜卷（生物解析）xx屆廣東省廣州市第六中學高三上學期第一次質(zhì)量檢測（xx09）】24．關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述,錯誤的是 A．蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì) B．動物細胞融合技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體 C．體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應(yīng)溶液中受精 D．選取原腸胚進行胚胎分割成功率較高 【答案】【知識點】L7 L10基因工程與蛋白質(zhì)工程 胚胎工程 【答案解析】BD蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì)，A正確；克隆動物的技術(shù)是核移植，單克隆抗體是體細胞融合，B錯誤；體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應(yīng)溶液中受精，C正確；桑葚期和囊胚期胚胎分割成功率高，D錯誤。 L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【生物卷(解析)xx屆廣西桂林十八中高三上學期第一次月考】29、在誘導離體菊花莖段形成幼苗的過程中，下列生命活動不會同時發(fā)生的是 (　　) A.細胞的增殖和分化 B.光能的吸收與轉(zhuǎn)化 C.ATP的合成與分解 D.基因的突變與重組 【答案】【知識點】L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【答案解析】D 離體菊花莖段形成幼苗的過程中，涉及到脫分化和再分化過程；整個過程都伴隨著細胞的分裂，A不符合題意。葉綠素的形成過程需要光照，形成幼苗的過程需要光照；愈傷組織形成的幼苗會開始進行光合作用，有光能的吸收和轉(zhuǎn)化，B不符合題意。ATP是直接能源物質(zhì)，整個過程中需要ATP提供能量，伴隨有ATP的合成和分解，C不符合題意?；蛑亟M只發(fā)生在減數(shù)分裂過程中，菊花莖段形成幼苗的過程中不進行減數(shù)分裂，D符合題意。 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚州中學高三8月開學考試】30、（9分）下圖1表示利用生物技術(shù)制備抗X的單克隆抗體的過程；圖2表示體外受精培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過程；圖3表示番茄和馬鈴薯植物體細胞融合和再生植株的過程，請據(jù)圖回答下面的問題： （1）圖1中注射到小鼠體內(nèi)的物質(zhì)是____________。融合后的細胞經(jīng)過多次篩選才能獲得理想的細胞，此類細胞的特點是___________。該過程所用的生物技術(shù)有__________。 （2）圖2中參與體外受精的精子需要經(jīng)過成熟和___________的過程，才能使卵細胞受精。若要獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可對圖2囊胚中的___________均等分割后進行胚胎移植，暫不移入的胚胎可使用________________方法保存。 （3）圖3中過程①是植物細胞形成__________________________的階段，該過程所用的酶是______________。植物體細胞雜交技術(shù)的重要意義是__________________。 【答案】【知識點】L7植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù)L8動物細胞工程與單克隆抗體 【答案解析】（1）抗原X　 既能無限增殖又能產(chǎn)生抗X的抗體　 動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù) （2）獲能 　內(nèi)細胞團　 　冷凍(或低溫) （3）原生質(zhì)體　 纖維素酶和果膠酶　 克服了遠緣雜交不親和的障礙 解析：（1）圖1是制備抗X抗原的單克隆抗體的過程，要想獲得分泌抗X抗原的抗體，需要對小鼠注射相應(yīng)的抗原即X抗原。融合后經(jīng)篩選的細胞為雜交瘤細胞，具備雙親細胞的遺傳特性，此類細胞的特點是既能無限增殖又能產(chǎn)生抗X的抗體。兩類細胞融合需要細胞融合技術(shù)，雜交瘤細胞在體內(nèi)或體外培養(yǎng)，需要細胞培養(yǎng)技術(shù)，所以該過程所用的生物技術(shù)有動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。 （2）圖2精子需要成熟和獲能的過程才具備受精的能力．若要獲得