2018-2019學(xué)年高中生物 第二章 克隆技術(shù) 第4課時(shí) 植物的克隆學(xué)案 浙科版選修3.doc

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第4課時(shí)　植物的克隆 知識內(nèi)容 要求 考情解讀 植物的克隆 b 1.簡述植物細(xì)胞全能性的含義和植物組織培養(yǎng)的程序。 2.舉例說明植物細(xì)胞全能性的體現(xiàn)。 3.簡述植物細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)的方法和意義。 4.簡述植物原生質(zhì)體獲得的方法及植物細(xì)胞工程的概念、操作過程和應(yīng)用。 5.簡述多途徑的植物克隆實(shí)踐。 一、植物細(xì)胞全能性和植物組織培養(yǎng) 1．植物細(xì)胞的全能性 (1)概念：植物體的每個(gè)生活細(xì)胞都具有遺傳上的全能性，因而都具有發(fā)育成完整植株的潛能。 (2)全能性的體現(xiàn) ①植物體的每個(gè)生活細(xì)胞，即使是已經(jīng)高度成熟和分化的細(xì)胞，都保持了恢復(fù)到分生狀態(tài)的能力，都具有遺傳上的全能性。 ②由于不同種類植物或同種植物的不同基因型個(gè)體之間遺傳性的差異，細(xì)胞全能性的表達(dá)程度大不相同。 ③植物細(xì)胞的全能性更容易體現(xiàn)，植物的組織培養(yǎng)比動(dòng)物更方便。 (3)全能性下降的原因 ①在長期培養(yǎng)中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可能原因有染色體畸變、細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生等，而且其結(jié)果是不可逆的。 ②細(xì)胞或組織中激素平衡被打破，或細(xì)胞對外源生長物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變。 ③隨著時(shí)間推移，由于其他各種原因產(chǎn)生了缺乏成胚性的細(xì)胞系。 2．植物組織培養(yǎng) (1)理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞全能性。 (2)一般程序：配制半固體培養(yǎng)基→獲取消毒的植物組織塊→組織培養(yǎng)，獲得愈傷組織(創(chuàng)傷組織)→以適當(dāng)配比的營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)愈傷組織，直到再生出新植株。 (3)愈傷組織：在創(chuàng)傷表面形成一種由相對沒有分化的活的薄壁細(xì)胞團(tuán)組成的新生組織。 (4)胚性細(xì)胞的特征：將含有愈傷組織培養(yǎng)物的試管放在搖床上，通過液體懸浮培養(yǎng)可以分散成單細(xì)胞。這種單細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大。 (5)用纖維素酶和果膠酶水解細(xì)胞壁，可以獲得分離的植物細(xì)胞原生質(zhì)體，用適當(dāng)方法培養(yǎng)原生質(zhì)體，也可以獲得新植株。 助學(xué)巧記　 細(xì)胞全能性大小的分析 (1)體細(xì)胞全能性與細(xì)胞分化程度：分化程度低的>分化程度高的。 (2)體細(xì)胞全能性與細(xì)胞分裂能力：分裂能力強(qiáng)的>分裂能力弱的。 (3)不同類型細(xì)胞的全能性：受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞。 (4)不同生物細(xì)胞的全能性：植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞。 探究1——實(shí)例分析 1．分析實(shí)例是否體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性并給出原因。 (1)植物花藥離體培養(yǎng)獲得植株。 答案　是?；ㄋ庪x體培養(yǎng)獲得單倍體植株，體現(xiàn)了花藥細(xì)胞的全能性。 (2)利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫草素。 答案　否。發(fā)育成完整生物個(gè)體才能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，而生產(chǎn)紫草素只是將紫草細(xì)胞培養(yǎng)成愈傷組織。 (3)紫色糯性玉米種子培育成植株。 答案　否。種子的胚已是新植物的幼體，發(fā)育成完整植株的過程，相當(dāng)于植物長大。 2．配子(卵和精子)中染色體數(shù)比正常體細(xì)胞減少了一半，配子是否還有全能性？為什么？ 答案　有。因?yàn)轶w細(xì)胞中染色體成對存在，配子染色體數(shù)雖減半，但仍含有完整的染色體組，具有控制生物性狀的全部基因。 探究2——實(shí)驗(yàn)探究 煙草植株的植物組織培養(yǎng)如圖所示。完善圖示內(nèi)容，思考回答相關(guān)問題： 1．理論基礎(chǔ)——植物細(xì)胞的全能性 物質(zhì)基礎(chǔ)：生物體的體細(xì)胞通過有絲分裂形成的子細(xì)胞與母細(xì)胞(受精卵)核內(nèi)的基因相同，即生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有本物種所特有的全套遺傳物質(zhì)。 2．操作程序 (1)半固體培養(yǎng)基的配制：配制含有適當(dāng)營養(yǎng)物質(zhì)、植物生長調(diào)節(jié)劑的含0.7%～1%瓊脂的培養(yǎng)基，倒在滅菌試管中凝固成半固體。 (2)小組織塊(即外植體)的切?。簭南镜母⑶o或葉上切取。 (3)愈傷組織的獲得：植物組織塊切口處的細(xì)胞在創(chuàng)傷的刺激下發(fā)生脫分化成為分裂的細(xì)胞。在創(chuàng)傷表面形成一種由相對沒有分化的活的薄壁細(xì)胞團(tuán)組成的新生組織，即為愈傷組織。 (4)新植株的再生 ①誘導(dǎo)愈傷組織：通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)配比，使其產(chǎn)生出芽和根的頂端分生組織，并由此再生出新的植株。 ②將含有愈傷組織培養(yǎng)物的試管放在搖床上，通過液體懸浮培養(yǎng)分散成單細(xì)胞，再在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)發(fā)育成胚狀體，進(jìn)而發(fā)育成新的植株。 3．愈傷組織的脫分化(去分化)、再分化 (1)高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化，或者叫做去分化。 (2)脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個(gè)過程叫做再分化。 4．在植物組織培養(yǎng)過程中，為什么要進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作？ 答案　避免雜菌在培養(yǎng)基上迅速生長消耗營養(yǎng)，且有些雜菌會危害培養(yǎng)物的生長。 5．若培養(yǎng)物取自植物的幼莖、葉片等含有葉綠體的部位，愈傷組織中是否會含有葉綠體？ 答案　培養(yǎng)物經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞，故愈傷組織中不會含有葉綠體。 6．植物組織培養(yǎng)中的脫分化階段，培養(yǎng)的組織細(xì)胞是自養(yǎng)型還是異養(yǎng)型？為什么？ 答案　脫分化過程中細(xì)胞營異養(yǎng)生活。因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞沒有葉綠體，并且一般要避光培養(yǎng)，無法進(jìn)行光合作用。 例1　下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)的敘述中，錯(cuò)誤的是(　　) A．培養(yǎng)基中添加營養(yǎng)物質(zhì)的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓 B．培養(yǎng)基中的植物生長調(diào)節(jié)劑影響愈傷組織的生長和分化 C．離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織 D．同一株綠色開花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因型相同 答案　D 解析　植物組織培養(yǎng)技術(shù)既可對植物體細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，也可對生殖細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)。假設(shè)某植株的基因型為Aa，取其根尖細(xì)胞離體培養(yǎng)形成的新植株基因型仍為Aa；若取該植株花藥細(xì)胞離體培養(yǎng)，形成的新植株基因型為A或a。 例2　(2017浙江莆田一中月考)下列關(guān)于植物細(xì)胞全能性的描述錯(cuò)誤的是(　　) A．植物細(xì)胞的全能性比動(dòng)物細(xì)胞更容易表達(dá) B．不同種類的植物之間細(xì)胞全能性的表達(dá)程度不相同 C．同種植物的不同基因型個(gè)體之間細(xì)胞全能性的表達(dá)程度相同 D．某些植物的再生植株，多次繼代培養(yǎng)后會喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力 答案　C 解析　高度分化的植物細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植株的潛能，植物細(xì)胞的全能性比動(dòng)物細(xì)胞更容易表達(dá)，A正確；植物種類不同，全能性的表達(dá)程度不同，B正確；同種植物不同基因型的個(gè)體之間，細(xì)胞全能性的表達(dá)程度也不相同，C錯(cuò)誤；小麥、玉米和水稻等作物的一些品種或品系的培養(yǎng)細(xì)胞所誘導(dǎo)出的再生植株，在多次繼代培養(yǎng)后，會喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力，D正確。 方法技巧　 植物細(xì)胞全能性表達(dá)的條件及下降原因 (1) 表達(dá)條件 (2) 下降原因 二、細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng) 1．過程：單個(gè)植物細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，依次發(fā)育成細(xì)胞團(tuán)、球形胚、心形胚和胚狀體，最后再生出完整的植株。 2．方法或措施：主要通過平衡的植物激素配比進(jìn)行調(diào)控。 (1)適量的激動(dòng)素和細(xì)胞分裂素配比，可誘導(dǎo)芽的分化。 (2)適量的吲哚乙酸及適當(dāng)減除其他某些激素，可誘導(dǎo)生根。 3．意義 (1)可以在實(shí)驗(yàn)室、試管等器皿中進(jìn)行植物的受精過程和自受精卵進(jìn)行的植物胚胎發(fā)育過程，以及調(diào)節(jié)控制這些過程的環(huán)境因素、遺傳基礎(chǔ)和分子及生理生化機(jī)理研究。 (2)可以進(jìn)行遺傳工程的操作，完成與植物生長發(fā)育有關(guān)的重要基因或影響因素的研究。 (3)可以方便地通過實(shí)驗(yàn)手段培育植物新品種。 例3　下列關(guān)于植物細(xì)胞工程的有關(guān)敘述，正確的是(　　) A．植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可能原因有染色體畸變、細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生等，但其結(jié)果是可逆的 B．處于適當(dāng)液體培養(yǎng)條件的單個(gè)植物細(xì)胞，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可發(fā)生類似受精卵發(fā)育成胚的過程，即從單細(xì)胞依次到細(xì)胞團(tuán)、心形胚、球形胚和胚狀體，最后再生出完整植株 C．植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)物缺乏成胚性細(xì)胞系的原因可能是細(xì)胞或組織中激素平衡被破壞，或細(xì)胞對外源生長物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變 D．植物器官培養(yǎng)方面，器官發(fā)生和形態(tài)建成主要是通過平衡的植物激素配比進(jìn)行調(diào)控，適量的生長素和細(xì)胞分裂素配比可以誘導(dǎo)根的分化 答案　C 解析　植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的原因可能是染色體畸變、細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生等，而且其結(jié)果是不可逆的，也可能是細(xì)胞或組織中激素平衡被破壞，或細(xì)胞對外源生長物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變，A錯(cuò)誤，C正確；處于適當(dāng)液體培養(yǎng)條件的單個(gè)植物細(xì)胞，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可發(fā)生類似受精卵發(fā)育成胚的過程，即從單細(xì)胞依次到細(xì)胞團(tuán)、球形胚、心形胚和胚狀體，最后再生出完整植株，B錯(cuò)誤；植物器官培養(yǎng)方面，器官發(fā)生和形態(tài)建成主要是通過平衡的植物激素配比進(jìn)行調(diào)控的，例如，適量的生長素和細(xì)胞分裂素配比可以誘導(dǎo)芽的分化，適量的生長素(吲哚乙酸)及適當(dāng)減除其他某些激素可誘導(dǎo)生根，D錯(cuò)誤。 例4　(2018淳安中學(xué)檢測)從紅豆杉的樹皮和樹葉中提煉出來的紫杉醇屬于植物的次生代謝產(chǎn)物，它對多種晚期癌癥療效突出。下列有關(guān)紫杉醇獲取途徑的敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．從愈傷組織中分散得到的單細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡大且核也大 B．將愈傷組織培養(yǎng)成植株還是特定細(xì)胞系要通過平衡生長調(diào)節(jié)劑的配比進(jìn)行調(diào)控 C．在選擇紅豆杉時(shí)除了要考慮其優(yōu)良性狀外還需考慮細(xì)胞全能性的表達(dá)能力 D．通過培養(yǎng)特定細(xì)胞系，可以實(shí)現(xiàn)對重要次生代謝產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn) 答案　A 解析　從愈傷組織中分散得到的單細(xì)胞屬于胚性細(xì)胞，特點(diǎn)是細(xì)胞核大、細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小，A錯(cuò)誤；將愈傷組織培養(yǎng)成植株還是特定細(xì)胞系需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)物中激素配比，B正確；選擇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，為增加成功概率需考慮其全能性表達(dá)能力，C正確；紫杉醇是細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物，通過特定細(xì)胞系的培養(yǎng)，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，D正確。 方法技巧　植物細(xì)胞培養(yǎng)的過程 大規(guī)模植物細(xì)胞培養(yǎng) ↓液體培養(yǎng)基 細(xì)胞篩選 ↓次生代謝產(chǎn)物含量高，生長迅速 單細(xì)胞無性繁殖系 ↓擴(kuò)大培養(yǎng) 大量植物細(xì)胞 ↓ 分離有用物質(zhì) 三、原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程 1．植物原生質(zhì)體的獲得方法 在0.5～0.6 mol/L的甘露醇溶液環(huán)境(較高滲透壓)下用纖維素酶和果膠酶混合液處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，除去細(xì)胞壁，獲得球形的原生質(zhì)體。 2．植物細(xì)胞工程的操作過程 3．多途徑的植物克隆實(shí)踐 (1)將外源遺傳物質(zhì)(DNA)導(dǎo)入宿主細(xì)胞，可以培育出抗逆、高產(chǎn)及優(yōu)質(zhì)的轉(zhuǎn)基因植株。 (2)植物細(xì)胞培養(yǎng)的其他多種研究和應(yīng)用廣泛開展。 思考　獲得重要次生代謝產(chǎn)物(如某些中藥)需要將外植體培養(yǎng)到哪個(gè)階段？ 答案　應(yīng)讓外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織，培養(yǎng)特定細(xì)胞系。 特別提醒　(1)獲取原生質(zhì)體時(shí)，加入高濃度高滲甘露醇溶液的作用是防止原生質(zhì)體吸水脹破。 (2)獲得次生代謝產(chǎn)物時(shí)，一般將細(xì)胞培養(yǎng)至愈傷組織階段即可，因此不涉及再分化過程。 (3)原生質(zhì)體培養(yǎng)成功的表現(xiàn)是細(xì)胞壁再生。 例5　(2017浙江紹興高二質(zhì)檢)如圖表示利用植物細(xì)胞工程對棉花進(jìn)行改良的過程，據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是(　　) A．①過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶處理 B．②過程能定向改變原生質(zhì)體的遺傳特性 C．③過程需要通過液體懸浮培養(yǎng) D．④過程需用適宜濃度的生長調(diào)節(jié)劑處理 答案　C 解析　①過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶處理去掉細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，A正確；②過程為轉(zhuǎn)基因技術(shù)，能定向改變原生質(zhì)體的遺傳特性，B正確；③過程需要在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，C錯(cuò)誤；④過程需用適宜濃度的生長調(diào)節(jié)劑處理，促進(jìn)根、芽的發(fā)育，D正確。 易混易錯(cuò)　植物組織培養(yǎng)會涉及固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。獲取愈傷組織都是在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行的，而獲取胚性細(xì)胞，需將原生質(zhì)體進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)(液體培養(yǎng)基)。 例6　(2016浙江10月選考節(jié)選)某小組欲進(jìn)行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究。請回答： (1)原生質(zhì)體的分離：在無菌條件下，取煙草無菌苗的葉片，放入含有0.5 mol/L甘露醇(維持較高滲透壓)的________________________混合液處理，經(jīng)過離心純化后獲得原生質(zhì)體。 (2)原生質(zhì)體的培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，重新長出細(xì)胞壁，形成胚性細(xì)胞。此時(shí)，應(yīng)該________培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)，然后經(jīng)兩條途徑形成再生植株。途徑一：細(xì)胞團(tuán)經(jīng)球形胚、______和胚狀體，最后發(fā)育成植株。途徑二：細(xì)胞團(tuán)增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出芽，切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對較高的激素是____________。胚性細(xì)胞的主要特點(diǎn)是________(A.液泡小、細(xì)胞核小　B．液泡大、細(xì)胞核大　C．液泡大、細(xì)胞核小　D．液泡小、細(xì)胞核大)。 (3)為了對煙草的某些性狀進(jìn)行改良，分離得到兩種煙草的原生質(zhì)體后，通過______________________方法將它們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA，采用________擴(kuò)增相關(guān)基因，來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。 答案　(1)纖維素酶和果膠酶　(2)降低　心形胚　細(xì)胞分裂素　D　(3)原生質(zhì)體融合　PCR 解析　(1)去除植物細(xì)胞壁，獲得植物細(xì)胞的原生質(zhì)體，常用的方法是利用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞。(2)在獲取原生質(zhì)體時(shí)甘露醇是作為維持細(xì)胞膜內(nèi)外滲透壓平衡的穩(wěn)定劑使用的。其具體作用是提高滲透壓，防止水分滲入細(xì)胞內(nèi)部，造成細(xì)胞破裂。在原生質(zhì)體形成新細(xì)胞壁后，細(xì)胞壁有支持與保護(hù)作用，所以要降低甘露醇的濃度；由細(xì)胞團(tuán)形成再生植株，途經(jīng)：從胚性細(xì)胞→細(xì)胞團(tuán)→球形胚→心形胚→胚狀體，然后再生出完整的小植株；為快速誘導(dǎo)芽的分化，培養(yǎng)基中往往添加細(xì)胞分裂素；胚性細(xì)胞的特點(diǎn)是液泡小、細(xì)胞核大。(3)植物細(xì)胞工程中，利用原生質(zhì)體融合的方法獲得雜種細(xì)胞；體外擴(kuò)增DNA技術(shù)常用的是PCR技術(shù)。 方法技巧　植物細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)的關(guān)系 1．下列有關(guān)細(xì)胞全能性的敘述，不正確的是(　　) A．卵細(xì)胞與受精卵一樣，細(xì)胞未分化，全能性很高 B．大量的科學(xué)事實(shí)證明，高度分化的植物體細(xì)胞仍具有全能性 C．受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體，因此全能性最高 D．通過植物組織培養(yǎng)得到的試管苗，是植物細(xì)胞在一定條件下表現(xiàn)全能性的結(jié)果 答案　A 解析　卵細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，受精卵是未分化的細(xì)胞，受精卵在自然條件下能形成完整個(gè)體，全能性最高，A錯(cuò)誤，C正確；高度分化的植物體細(xì)胞也具有全能性，B正確；植物細(xì)胞在一定條件下經(jīng)過植物組織培養(yǎng)技術(shù)得到再生植株，是細(xì)胞全能性的表現(xiàn)，D正確。 2．植物細(xì)胞培養(yǎng)是在植物組織培養(yǎng)技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，下列有關(guān)植物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是(　　) A．植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的目的是為了獲得大量有生理活性的次級代謝產(chǎn)物 B．植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)快速、高效，不受季節(jié)、外部環(huán)境等條件的限制 C．利用生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)人參細(xì)胞，提取人參皂甙，用于生產(chǎn)保健藥品和美容護(hù)膚用品 D．植物細(xì)胞培養(yǎng)需要在一定的溫度、pH等條件下進(jìn)行，但不需要進(jìn)行無菌操作 答案　D 解析　植物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)一樣，整個(gè)培養(yǎng)過程必須在無菌條件下進(jìn)行，否則培養(yǎng)基內(nèi)將長出許多雜菌與離體細(xì)胞爭奪營養(yǎng)與生存空間，影響細(xì)胞增殖和細(xì)胞次級代謝產(chǎn)物的獲得。A項(xiàng)所述為植物細(xì)胞培養(yǎng)的目的，B項(xiàng)為植物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)，C項(xiàng)為植物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用。 3．(2018浙江名校協(xié)作體聯(lián)考)植物組織培養(yǎng)基中肯定沒有下列哪種物質(zhì)(　　) A．血清 B．生長素 C．無機(jī)鹽 D．蔗糖 答案　A 解析　植物組織培養(yǎng)基中通常含有植物激素(如生長素、細(xì)胞分裂素等)、無機(jī)鹽(維持滲透壓)、蔗糖(提供能量)等，不含有血清。 4．(2017舟山中學(xué)期中)下列有關(guān)高等植物原生質(zhì)體制備和培養(yǎng)的敘述，正確的是(　　) A．纖維素酶和果膠酶混合液可用于制備懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的原生質(zhì)體 B．加入0.6 mol/L甘露醇的目的是保護(hù)纖維素酶和果膠酶 C．從不同植物組織分離得到的原生質(zhì)體大小、形狀相同 D．所有植物的愈傷組織經(jīng)原生質(zhì)體培養(yǎng)均可得到再生植株 答案　A 解析　植物細(xì)胞壁由纖維素和果膠構(gòu)成，因此可以采用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，A正確；加入0.6 mol/L甘露醇的目的是防止原生質(zhì)體吸水脹破，B錯(cuò)誤；不同植物組織分離得到的原生質(zhì)體大小、形狀存在差異，C錯(cuò)誤；不同植株或基因型個(gè)體，細(xì)胞全能性存在差異，愈傷組織經(jīng)原生質(zhì)體培養(yǎng)不一定能得到再生植株，D錯(cuò)誤。 5．(2017金華一中期末)下圖中的①②③代表通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育新植株的三條途徑，請回答： (1)外植體a、b、c來自同種植株，植株A、B、C中的細(xì)胞，全能性表達(dá)程度_______________(填“相同”或“可能不同”)。 (2)途徑②和③需要用到______________和________(填培養(yǎng)基的物理性質(zhì))培養(yǎng)基兩種。 (3)外植體c脫去細(xì)胞壁過程中需要加入適宜濃度的________(A.甘露醇　B．鹽酸　C．蒸餾水　D．氯化鈉)以保持一定的滲透壓。原生質(zhì)體培養(yǎng)成功標(biāo)志著________技術(shù)又向前邁進(jìn)了一步。 (4)通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系，可以實(shí)現(xiàn)能產(chǎn)生重要__________(如某些中藥)的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)。 答案　(1)可能不同　(2)液體培養(yǎng)基　固體(或半固體) (3)A　植物細(xì)胞工程　(4)次生代謝產(chǎn)物 解析　(1)不同植株，全能性存在差異，即使同種植株，基因型不同個(gè)體之間全能性也存在差異。(2)分析題圖可知，途徑②和③均借助了搖床，即進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)，獲得單細(xì)胞，因此該途徑所用培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。同時(shí)途徑②和③均涉及愈傷組織的獲得，需利用固體培養(yǎng)基(或半固體培養(yǎng)基)。(3)植物克隆工程中，去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，一般在高濃度甘露醇溶液中進(jìn)行，使用高濃度甘露醇的目的是維持滲透壓，防止原生質(zhì)體吸水脹破。原生質(zhì)體的培養(yǎng)成功，標(biāo)志著植物細(xì)胞工程的進(jìn)步。(4)通過培養(yǎng)大量特定細(xì)胞系，可以實(shí)現(xiàn)能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物(如某些中藥)的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)。 題組一　植物細(xì)胞的全能性 1．以下不能說明細(xì)胞全能性的是(　　) A．玉米花粉粒培育出植株 B．轉(zhuǎn)入貯存蛋白基因的向日葵細(xì)胞培育出植株 C．燒傷病人的健康細(xì)胞培養(yǎng)出皮膚 D．用懸浮培養(yǎng)的胡蘿卜單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)成了可育的植株 答案　C 解析　細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。燒傷病人的健康細(xì)胞培養(yǎng)出皮膚，屬于器官水平的培養(yǎng)，沒有形成完整個(gè)體，因此不能說明細(xì)胞全能性。 2．下列有關(guān)植物細(xì)胞全能性的敘述，正確的是(　　) A．只有體細(xì)胞才具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能 B．由全能性誘導(dǎo)出的植株，在多次繼代組織培養(yǎng)后不會喪失全能性的表達(dá)能力 C．發(fā)育成完整個(gè)體所需的所有基因都存在于細(xì)胞核中 D．去除細(xì)胞壁的植物細(xì)胞不會失去全能性 答案　D 解析　植物體細(xì)胞、生殖細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能，A錯(cuò)誤；由于不同種類植物或同種植物的不同基因型個(gè)體之間遺傳性的差異，細(xì)胞全能性的表達(dá)程度大不相同，如擬南芥、煙草和番茄等的培養(yǎng)細(xì)胞很容易再生出新植株，并能在多個(gè)世代中保持細(xì)胞全能性的表達(dá)，而小麥、玉米和水稻等作物的一些品種或品系的培養(yǎng)細(xì)胞誘導(dǎo)出的再生植株，在多次繼代培養(yǎng)后，會喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力，B錯(cuò)誤；植物細(xì)胞中的基因除了存在于細(xì)胞核中外，還有少量基因存在于細(xì)胞質(zhì)的線粒體和葉綠體中，C錯(cuò)誤；去除細(xì)胞壁的植物細(xì)胞是原生質(zhì)體，可以再生細(xì)胞壁，仍具有全能性，D正確。 題組二　植物組織培養(yǎng) 3．下列屬于組織培養(yǎng)的是(　　) A．花粉培育成單倍體植株 B．芽發(fā)育成枝條 C．根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū) D．種子發(fā)育成完整的植株 答案　A 解析　植物組織培養(yǎng)的過程簡要概括為：離體的植物器官、組織或細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，經(jīng)再分化形成根、莖、葉等器官，并進(jìn)一步培育成完整的植株?；ǚ垭x體培養(yǎng)是組織培養(yǎng)的新技術(shù)，花粉細(xì)胞具有全能性；芽發(fā)育成枝條、根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)、種子發(fā)育成完整植株是正常的生長過程。 4．將無根的非洲菊幼苗轉(zhuǎn)入無植物激素的培養(yǎng)基中，在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)出現(xiàn)的現(xiàn)象是(　　) 答案　B 解析　細(xì)胞分裂素促進(jìn)細(xì)胞分裂，誘導(dǎo)芽的分化；生長素可以促進(jìn)不定根、側(cè)根的形成；此題中雖然培養(yǎng)基中沒有植物激素，但是植物幼苗葉片本身可以產(chǎn)生生長素，而細(xì)胞分裂素的產(chǎn)生部位是根尖，細(xì)胞分裂素不能產(chǎn)生，所以植物能夠在一段時(shí)間后長出少量的根而沒有出芽。 5．下圖是利用三倍體香蕉的莖尖培養(yǎng)脫毒香蕉植株的過程示意圖，下列敘述正確的是(　　) A．①～③過程中發(fā)生了有絲分裂和減數(shù)分裂 B．①階段需要生長素，而③階段僅需要細(xì)胞分裂素 C．①階段細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，細(xì)胞分化速度快 D．X階段的細(xì)胞高度液泡化，排列疏松而無規(guī)則 答案　D 解析　①～③過程中只發(fā)生了有絲分裂，沒有發(fā)生減數(shù)分裂，A錯(cuò)誤；③階段需要細(xì)胞分裂素、生長素，B錯(cuò)誤；①階段僅有細(xì)胞增殖，沒有細(xì)胞分化，C錯(cuò)誤；X是經(jīng)過①脫分化過程形成的愈傷組織，細(xì)胞高度液泡化，排列疏松而無規(guī)則，D正確。 題組三　細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng) 6．紫草素是紫草細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，可作為生產(chǎn)治療燙傷藥物的原料。研究人員欲用植物組織培養(yǎng)技術(shù)通過培養(yǎng)紫草細(xì)胞生產(chǎn)紫草素。下列相關(guān)操作不合適的是(　　) A．對作為外植體的紫草葉片進(jìn)行消毒處理既保證其活性也可減輕污染 B．培養(yǎng)基中要加入植物激素以保證已分化的植物細(xì)胞脫分化形成愈傷組織 C．調(diào)節(jié)植物激素的種類和比例以保證愈傷組織再分化為胚狀體 D．在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中要不斷通入無菌空氣以保證氧氣的充足供應(yīng) 答案　C 解析　植物組織培養(yǎng)需要無菌無毒的條件，對作為外植體的紫草葉片進(jìn)行消毒處理既可保證細(xì)胞活性也可減輕污染，A正確；決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，所以培養(yǎng)基中加入植物激素可以保證已分化的植物細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，B正確；本題植物組織培養(yǎng)的目的是獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物，而不是完整植株，培養(yǎng)到愈傷組織階段就可以，C錯(cuò)誤；植物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要充足的氧氣，D正確。 7．植物組織培養(yǎng)，一般取植物的芽、莖尖或根尖的組織細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。下列不屬于取材理由的是(　　) A．植物的芽、莖尖或根尖的組織細(xì)胞一般沒有病毒積累 B．植物的芽、莖尖或根尖的組織細(xì)胞具有較強(qiáng)的分裂能力，全能性高 C．植物的芽、莖尖或根尖的組織細(xì)胞的分化程度相對較低，容易脫分化 D．植物的芽、莖尖或根尖的組織細(xì)胞進(jìn)行分裂形成了愈傷組織 答案　D 解析　進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，一般選擇植物的根尖、莖尖或芽的組織細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，是因?yàn)樵摬课坏募?xì)胞一般沒有或者很少有病毒積累，且分裂能力較強(qiáng)，分化程度較低，全能性較高，A、B、C正確；除芽、莖尖或根尖外，植物其他細(xì)胞也能經(jīng)脫分化形成愈傷組織，D錯(cuò)誤。 題組四　原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程 8．下列關(guān)于原生質(zhì)體培養(yǎng)和植物細(xì)胞工程的說法錯(cuò)誤的是(　　) A．若要獲得玫瑰花的原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶去掉細(xì)胞膜 B．利用植物細(xì)胞工程技術(shù)，可獲得抗病蟲害、抗干旱、抗鹽堿和優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)作物新品種 C．在植物細(xì)胞工程中運(yùn)用了基因工程技術(shù) D．原生質(zhì)體的培養(yǎng)結(jié)合基因工程操作，為遺傳學(xué)、植物生理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)問題提供了良好的研究系統(tǒng) 答案　A 解析　植物細(xì)胞經(jīng)過纖維素酶和果膠酶混合液去掉細(xì)胞壁后成為原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；利用植物細(xì)胞工程技術(shù)，可獲得抗病蟲害、抗干旱、抗鹽堿和優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)作物新品種，B正確；在植物細(xì)胞工程中運(yùn)用了基因工程技術(shù)，C正確；原生質(zhì)體的培養(yǎng)結(jié)合基因工程操作，為遺傳學(xué)、植物生理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)問題提供了良好的研究系統(tǒng)，D正確。 9．下列有關(guān)植物克隆技術(shù)的敘述中，錯(cuò)誤的是(　　) A．誘導(dǎo)某些植物的愈傷組織能使其直接發(fā)育成花芽 B．植物組織培養(yǎng)中通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)的配比可以實(shí)現(xiàn)器官發(fā)生和形態(tài)建成 C．植物愈傷組織通過液體懸浮培養(yǎng)能分散成單細(xì)胞，這種單細(xì)胞發(fā)育成胚狀體 D．通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系，可以克隆出大量能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物的細(xì)胞 答案　B 解析　誘導(dǎo)某些植物的愈傷組織能使其直接發(fā)育成花芽，如風(fēng)信子，A正確；植物組織培養(yǎng)中主要通過平衡的植物激素配比實(shí)現(xiàn)器官發(fā)生和形態(tài)建成，B錯(cuò)誤；植物愈傷組織通過液體懸浮培養(yǎng)能分散成單細(xì)胞，這種單細(xì)胞能發(fā)育成胚狀體，C正確；大量培養(yǎng)特定植物的細(xì)胞系，可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，D正確。 題組五　綜合應(yīng)用 10．下圖為獲得轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的流程圖。據(jù)圖回答下列問題： (1)該過程先后涉及________技術(shù)和植物克隆技術(shù)，后者的技術(shù)基礎(chǔ)是________________，過程中兩次篩選的目的分別是篩選______________________________和抗蟲植株。 (2)下列關(guān)于Ti質(zhì)粒的敘述中，錯(cuò)誤的是________。 A．含有DNA復(fù)制起點(diǎn) B．具有限制性核酸內(nèi)切酶識別序列 C．是大腸桿菌擬核外的環(huán)狀DNA D．含有控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的基因 (3)圖中A是將含愈傷組織培養(yǎng)物的試管放在________(儀器)上，通過________培養(yǎng)得到單細(xì)胞，這種單細(xì)胞依次到細(xì)胞團(tuán)、球形胚、心形胚和[B]________，最后長成植株。 (4)下列關(guān)于圖中單細(xì)胞特征的敘述，錯(cuò)誤的是________。 A．細(xì)胞質(zhì)豐富 B．液泡大 C．細(xì)胞核大 D．未分化 答案　(1)基因工程(轉(zhuǎn)基因)　植物組織培養(yǎng)　含目的基因的受體細(xì)胞　(2)C　(3)搖床　(液體)懸浮　胚狀體 (4)B 解析　(1)轉(zhuǎn)基因植物培育過程中涉及基因工程技術(shù)和植物克隆技術(shù)，植物克隆技術(shù)的基礎(chǔ)是植物組織培養(yǎng)，進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作，將含有目的基因的重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞后，需進(jìn)行篩選，篩選含有目的基因的受體細(xì)胞。(2)質(zhì)粒上含有DNA的復(fù)制起點(diǎn)，利于質(zhì)粒DNA進(jìn)行復(fù)制，A正確；質(zhì)粒上具有一個(gè)或多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn)，B正確；Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌擬核外的環(huán)狀DNA，C錯(cuò)誤；Ti質(zhì)粒能將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞的染色體上，其上含有控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的基因，D正確。(3)分析圖示可知，圖中A是將含有愈傷組織培養(yǎng)物的試管放在搖床上，通過液體懸浮培養(yǎng)得到單細(xì)胞，這種單細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可以發(fā)生類似受精卵經(jīng)過卵裂、分化、器官發(fā)生和形態(tài)建成而發(fā)育成胚的過程，即從單細(xì)胞依次到細(xì)胞團(tuán)、球形胚、心形胚和胚狀體，最后再生出完整植株。(4)單細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁明顯、細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小、未分化等特點(diǎn)。 11．(2017余姚中學(xué)期中)卡那霉素和頭孢霉素都有抗菌作用，此外，卡那霉素還對葡萄細(xì)胞有抑制作用。研究人員將Barnase基因(雄性不育基因)轉(zhuǎn)入葡萄細(xì)胞，利用卡那霉素和頭孢霉素，通過植物克隆方法成功培育出大粒、無核的葡萄新品種。請回答： (1)構(gòu)建含Barnase基因、β-葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重組質(zhì)粒，將其導(dǎo)入農(nóng)桿菌，在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)形成__________以便鑒定是否混有雜菌，再用________將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)移至LB________培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。構(gòu)建重組質(zhì)粒需要用到的工具酶是__________________、__________________。 (2)將經(jīng)過________的幼嫩葡萄葉片切成小塊，浸入農(nóng)桿菌懸浮液中，4分鐘后取出(此時(shí)已有較多農(nóng)桿菌附著在葉片小塊上)并接種到固體培養(yǎng)基中。培養(yǎng)至第3天時(shí)，可以看到在葉片小塊周圍出現(xiàn)__________和大量菌落。這時(shí)再用頭孢霉素處理葉片小塊，其目的是__________(A.抑制葡萄細(xì)胞脫分化　B．促進(jìn)葡萄細(xì)胞再分化 C．殺滅農(nóng)桿菌　D．促進(jìn)農(nóng)桿菌生長)。 (3)將葉片小塊放入卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后，轉(zhuǎn)移至生芽培養(yǎng)基中，待其長出________后，再轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)形成試管苗?？敲顾嘏囵B(yǎng)基起著________作用，植物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是______________。 (4)在卡那霉素培養(yǎng)基中，由于轉(zhuǎn)化細(xì)胞對周圍的非轉(zhuǎn)化細(xì)胞有保護(hù)作用，獲得的試管苗中可能存在假的轉(zhuǎn)基因試管苗，因此還需對試管苗的__________________基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行生化檢測，才能鑒別出真正的轉(zhuǎn)基因試管苗。 答案　(1)單菌落　接種環(huán)　液體　限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶　(2)消毒　愈傷組織　C　(3)叢狀苗　篩選　植物組織培養(yǎng)　(4)β-葡糖苷酸酶 解析　(1)構(gòu)建含Barnase基因，β-葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重組質(zhì)粒，抗性基因是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)農(nóng)桿菌形成單菌落，以便鑒定是否混有雜菌。構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。將菌種接種在液體培養(yǎng)基中需要用接種環(huán)接種。(2)將經(jīng)過消毒的幼嫩葡萄葉片切成小塊，以防止雜菌污染，離體植物組織或細(xì)胞在培養(yǎng)基中脫分化成愈傷組織。頭孢霉素有抗菌作用，用頭孢霉素處理葉片小塊，目的是殺滅附著在葉片上的農(nóng)桿菌。(3)將葉片小塊離體培養(yǎng)后，轉(zhuǎn)移到生芽培養(yǎng)基中，待其長出叢狀苗后再移栽?？敲顾睾皖^孢霉素都有抗菌作用，卡那霉素培養(yǎng)基起著篩選作用。植物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是植物組織培養(yǎng)。(4)重組質(zhì)粒含有Barnase基因、β-葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因，因此對試管苗的β-葡糖苷酸酶基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行生化檢測，就能鑒別出真正的轉(zhuǎn)基因試管苗。 12．(2016紹興期末調(diào)測)某研究小組欲應(yīng)用植物細(xì)胞工程技術(shù)，將已知序列抗鹽基因?qū)朐|(zhì)體培育抗鹽青蒿品種，使利用廢棄的鹽堿地規(guī)?；?、基地化種植青蒿成為可能，培育過程如下圖所示。請回答： (1)在抗鹽品種培育時(shí)，可以用________方法得到目的基因，或者用________擴(kuò)增目的基因，再用相同的限制性核酸內(nèi)切酶和__________________，使目的基因和載體DNA連接在一起，形成重組DNA分子。 (2)下列各項(xiàng)中，在制備葉片原生質(zhì)體時(shí)，要用到的是(　　) A．胰蛋白酶 B．植物生長調(diào)節(jié)劑 C．較高濃度的甘露醇 D．一定濃度的氯化鈣 (3)重組DNA分子通過c導(dǎo)入原生質(zhì)體，原生質(zhì)體經(jīng)培養(yǎng)再生出細(xì)胞壁，經(jīng)________過程形成愈傷組織。愈傷組織通過i過程，在適當(dāng)配比的____________誘導(dǎo)下，再生出植株，也可以通過[f]____________分散成單細(xì)胞。 (4)下列關(guān)于該植物細(xì)胞工程技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．葉細(xì)胞具有遺傳上的全能性，因而能通過組織培養(yǎng)形成完整植株 B．可在培養(yǎng)基中加入一定量的NaCl，篩選出抗鹽細(xì)胞或植株 C．通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系，可以實(shí)現(xiàn)對青蒿素的工業(yè)化生產(chǎn) D．細(xì)胞對外源生長物質(zhì)敏感性的改變，不會導(dǎo)致細(xì)胞全能性表達(dá)能力的降低 答案　(1)化學(xué)合成　PCR　DNA連接酶　(2)C　(3)脫分化　激素(或植物生長調(diào)節(jié)劑)　液體懸浮培養(yǎng) (4)D 解析　(1)由題意可知，抗鹽基因序列已知，因此可通過化學(xué)合成方法獲得目的基因，或用PCR擴(kuò)增目的基因，然后利用相同的限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，使目的基因和載體DNA連接在一起，形成重組DNA分子。(2)制備原生質(zhì)體，一般在較高濃度的甘露醇溶液中(防止原生質(zhì)體吸水脹破)，在纖維素酶和果膠酶的作用下，去除植物細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，C項(xiàng)符合題意。(3)植物細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，i過程為再分化，脫分化和再分化都需要在適當(dāng)配比的激素(或植物生長調(diào)節(jié)劑)誘導(dǎo)下才能實(shí)現(xiàn)。愈傷組織可以經(jīng)再分化直接發(fā)育成植株，也可在液體培養(yǎng)基中，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)分散成單細(xì)胞，進(jìn)而發(fā)育成胚狀體。(4)植物細(xì)胞理論上都具有全能性，能通過植物組織培養(yǎng)獲得完整植株，A正確；在植物克隆過程中，通過在培養(yǎng)基中加入一定濃度的NaCl，可以篩選出抗鹽細(xì)胞或植株，B正確；通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系，可以獲得細(xì)胞的次生代謝產(chǎn)物，如紫草素、青蒿素等，C正確；細(xì)胞對外源生長物質(zhì)敏感性改變，會使培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降，即全能性的表達(dá)能力降低，D錯(cuò)誤。 [自助加餐] 13．下圖表示基因型為AaBb的水稻的花藥通過無菌操作，接入試管后，在一定條件下形成試管苗的培育過程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．愈傷組織是花粉細(xì)胞通過有絲分裂后形成的不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán) B．在愈傷組織的形成過程中，必須從培養(yǎng)基中獲得水、無機(jī)鹽和小分子的有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì) C．為促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂生長，在培養(yǎng)基中應(yīng)加入適宜濃度的生長素等激素 D．試管苗可能出現(xiàn)的基因型有AABB或AAbb或aaBB或aabb 答案　D 解析　花粉是通過減數(shù)分裂形成的，其基因型為AB或Ab或aB或ab，由花粉發(fā)育而來的個(gè)體未經(jīng)秋水仙素處理，是單倍體植株。 14．辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如圖所示。下列敘述中正確的是(　　) A．將高產(chǎn)細(xì)胞系放在0.5～0.6 mol/L的甘露醇溶液中可以獲得原生質(zhì)體 B．圖中獲得愈傷組織、脫毒苗和單細(xì)胞的培養(yǎng)基中都有凝固劑即瓊脂 C．②過程中，培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值低時(shí)，有利于芽的分化 D．從愈傷組織分離出的單細(xì)胞，該細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小、細(xì)胞核小 答案　C 解析　將高產(chǎn)細(xì)胞系放在0.5～0.6 mol/L的甘露醇溶液中，還需要加入纖維素酶和果膠酶才可獲得原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；單細(xì)胞的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；②過程為再分化，通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素的用量實(shí)現(xiàn)，其中生長素含量高，主要誘導(dǎo)根的分化，細(xì)胞分裂素含量高，主要誘導(dǎo)芽的分化，C正確；愈傷組織分離出的單細(xì)胞的特點(diǎn)是細(xì)胞體積小、細(xì)胞核大、細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小，D錯(cuò)誤。