（全國通用版）2019版高考生物一輪復習 選考部分 生物技術(shù)實踐學案.doc

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選考部分 生物技術(shù)實踐 第1講 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用 ———————突破點(一)　果酒和果醋的制作——(對應學生用書P194)———— 1．制作原理 類型 菌種 反應 果酒 酵母菌 階段1：有氧條件下，酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖，其反應式為： C6H12O6＋6O26CO2＋6H2O 階段2：無氧條件下，酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精，其反應式為： C6H12O62C2H5OH＋2CO2 果醋 醋酸菌 氧氣、糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸，其反應式為：C6H12O6＋2O22CH3COOH＋2CO2＋2H2O 缺少糖源、氧氣充足時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?，其反應式為：C2H5OH＋O2 CH3COOH＋H2O 2．實驗設(shè)計與操作 　(2016全國卷Ⅱ)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的。回答下列問題： (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細胞的______________中進行，其產(chǎn)物乙醇與________________試劑反應呈現(xiàn)灰綠色，這一反應可用于乙醇的檢驗；過程③在酵母菌細胞的________________中進行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度__________。 (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在____________條件下才能完成。 (3)在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度__________(填“低于”或“高于”)第二階段的。 (4)醋酸桿菌屬于__________核生物，其細胞結(jié)構(gòu)中______(填“含有”或“不含有”)線粒體。 解析：(1)圖中過程①和②是酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇的過程，無氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)。乙醇可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測，顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。過程③為有氧呼吸的第二和第三階段，場所為線粒體。在有氧條件下酵母菌進行有氧呼吸，產(chǎn)生更多的能量供酵母菌繁殖利用，故有氧條件下酵母菌的繁殖速度更快。(2)醋酸桿菌是好氧型細菌，因此，在醋酸桿菌作用下，將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程需要在有氧條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過程中，第一階段酵母菌產(chǎn)生乙醇的適宜溫度為18～25 ℃，第二階段醋酸桿菌產(chǎn)生醋酸的適宜溫度為30～35 ℃，第一階段的溫度低于第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于原核生物，原核細胞中的細胞器只有核糖體一種，不含線粒體。 答案：(1)細胞質(zhì)基質(zhì)　酸性重鉻酸鉀　線粒體　快 (2)有氧　(3)低于　(4)原　不含有 1．果酒和果醋發(fā)酵裝置的設(shè)計思路 (1)因酵母菌的繁殖需要空氣，醋酸菌是好氧菌，所以在果酒制作的前期和果醋制作的整個過程中都需氧。因酵母菌產(chǎn)生酒精是在無氧條件下，應控制進入氧氣，故應在充氣口設(shè)置開關(guān)。 (2)由于在發(fā)酵過程中都產(chǎn)生CO2，因此需設(shè)排氣口；為防止空氣中微生物的污染，排氣口應連接一個長而彎曲的膠管。 (3)因要對發(fā)酵的情況進行及時監(jiān)測，應設(shè)置出料口便于取料。 2．果酒和果醋制作成功的關(guān)鍵點 項目 說明 材料的選 擇與處理 選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進行沖洗，除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。沖洗以洗去灰塵為目的，以防洗去野生型酵母菌 防止發(fā)酵 液被污染 ①榨汁機和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈，且發(fā)酵瓶要進行消毒； ②清洗葡萄時要先清洗后除枝梗； ③發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管而不用直管 控制發(fā) 酵條件 ①葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留約1/3的空間，目的是先讓酵母菌進行有氧呼吸，快速繁殖，耗盡O2后再進行酒精發(fā)酵，防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液的溢出； ②嚴格控制溫度：18～25 ℃利于酵母菌的繁殖和酒精發(fā)酵；30～35 ℃利于醋酸菌的繁殖和果醋的發(fā)酵； ③充氣：酒精發(fā)酵為無氧發(fā)酵，需關(guān)閉充氣口；醋酸發(fā)酵為有氧發(fā)酵，需經(jīng)充氣口充氣 1．下列關(guān)于果酒和果醋制作的敘述，正確的是(　　) A．在制作果酒和果醋的實驗中，應該一直保持厭氧環(huán)境 B．當氧氣、糖源充足時，醋酸菌能將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸 C．由于酵母菌的繁殖能力很強，不需對所用裝置進行消毒處理 D．溫度對酵母菌酒精發(fā)酵的影響很大，而對醋酸菌的發(fā)酵影響不大 解析：選B　果酒制備用的菌種是酵母菌，為兼性厭氧型，進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，溫度一般控制在18～25 ℃；果醋制備用的菌種是醋酸菌，屬于好氧型細菌，發(fā)酵時需要持續(xù)通入空氣，溫度應控制在30～35 ℃；果酒和果醋制作時都要對制作工具進行消毒，消除雜菌影響。 2．如圖表示各種因素對醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的影響，其中錯誤的是(　　) 解析：選C　溫度(pH)通過影響酶的活性來改變醋酸的產(chǎn)生速率，在最適溫度(pH)時產(chǎn)生速率最大，高于或低于該溫度(pH)都會使活性降低(甚至喪失)，A、D正確。醋酸菌是好氧菌，在一定范圍內(nèi)，隨著溶氧量的增加，醋酸會隨著該菌生長繁殖速率的加快而增加，但當溶氧量增大到一定值時，由于受其他條件的限制，不可能繼續(xù)增加而達到最大產(chǎn)生速率，B正確。醋酸產(chǎn)生速率隨時間的變化在最初階段可能不斷加快，當活菌數(shù)目達到最多時其產(chǎn)生總量會繼續(xù)增加，而產(chǎn)生速率則不再有明顯加快的現(xiàn)象，C錯誤。 ———————————突破點(二)　腐乳的制作—————— 1．制作原理 2．制作流程及影響因素 1．(2017江蘇高考)下列關(guān)于“腐乳的制作”實驗，敘述正確的是(　　) A．控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味 B．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用 C．毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉 D．成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細菌產(chǎn)生 解析：選B　控制發(fā)酵溫度的主要目的是利于菌種繁殖和代謝；腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用；毛霉的作用主要是分解蛋白質(zhì)和脂肪；成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的菌絲。 2．某品牌的腐乳獨具特色，它采用優(yōu)質(zhì)黃豆作為原料，經(jīng)嚴格篩選后用傳統(tǒng)工藝制成?；卮鹣嚓P(guān)問題： (1)在腐乳腌制過程中起主要作用的是毛霉，毛霉和細菌共有的細胞器是________。現(xiàn)代科學研究表明，除毛霉外，還有多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如__________________(寫出兩種即可)等。 (2)毛霉等多種微生物產(chǎn)生的________酶和________酶，使制作的腐乳更加鮮美且易于消化吸收。要制作出色、香、味俱全的腐乳，關(guān)鍵在于________的配制。 (3)腐乳制作過程中需要加鹽腌制8 d左右，加鹽可以____________________，使豆腐塊變硬，并且在接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些，避免________________，裝瓶時加入鹵湯中的________和________也有相同的作用。 (4)在制作過程中，若將腐乳坯堆積起來會導致__________________________________，影響毛霉生長。 解析：(1)多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母菌、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉屬于真核生物，與細菌(原核生物)共有的細胞器是核糖體。(2)毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味，是由酒及各種香辛料配制而成的。(3)加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，同時還能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。鹵湯中的酒和香辛料也具有防腐殺菌的作用。(4)在制作過程中，若將腐乳坯堆積起來會因毛霉等呼吸作用釋放的能量不能揮發(fā)而使堆內(nèi)溫度升高，影響毛霉的生長。 答案：(1)核糖體　青霉、酵母菌(合理即可)　(2)蛋白　脂肪　鹵湯　(3)析出豆腐中的水分　豆腐塊腐敗變質(zhì)　香辛料　酒　(4)堆內(nèi)溫度升高(合理即可) 影響腐乳品質(zhì)的因素 項目 說明 水的 控制 含水量約70%，用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形 鹽的 控制 鹽濃度過高會影響腐乳的口味；鹽濃度過低，腐乳易腐敗變質(zhì) 酒的 控制 酒的含量一般控制在12%左右。酒精含量過高，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗 溫度 控制 溫度為15～18 ℃，適合毛霉生長 發(fā)酵 時間 控制在6個月左右 香辛 料 具有調(diào)味和殺菌的作用，也會影響腐乳的風味或質(zhì)量 1．下列有關(guān)腐乳的敘述正確的是(　　) ①腐乳的制作主要是利用了微生物發(fā)酵的原理，主要參與的微生物是青霉 ②用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形 ③豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲，嚴格地說是直立菌絲，豆腐中還有匍匐菌絲 ④決定腐乳特殊口味的是鹵湯 ⑤腐乳的營養(yǎng)豐富，是因為大分子物質(zhì)經(jīng)過發(fā)酵作用分解成小分子且易于消化吸收的物質(zhì) ⑥鹵湯中含酒量應該控制在21%左右，酒精含量過高，腐乳成熟的時間會延長；含量過低，不足以抑制微生物的生長 A．①②③④　　　　　　 B．②③④⑤ C．③④⑤⑥ D．①④⑤⑥ 解析：選B　參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，豆腐上生長的白毛是毛霉的直立菌絲；毛霉產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶能將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解為小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸；用來制作腐乳的豆腐一般含水量為70%左右；鹵湯直接關(guān)系著腐乳的色、香、味，鹵湯中酒的含量應該控制在12%左右。 2．(2018濟寧模擬)紅方是腐乳的一種。請回答與其制作有關(guān)的問題： (1)補充制作紅方的實驗流程：①____________→②加鹽腌制→③____________→④密封腌制。 (2)在實驗流程①中，首先將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，籠屜中的溫度應控制在________℃，并保持一定的________。5天后豆腐塊表面布滿毛霉菌絲，這些毛霉來自空氣中的________。 (3)在實驗流程②操作中，向長滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬。同時，鹽還能________________，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。 解析：(1)制作紅方的實驗流程：①豆腐上長出毛霉→②加鹽腌制→③加鹵湯裝瓶→④密封腌制。(2)在實驗流程①中，首先將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，籠屜中的溫度應控制在15～18 ℃，并保持一定的濕度。5天后豆腐塊表面布滿毛霉菌絲，這些毛霉來自空氣中的毛霉孢子。(3)在實驗流程②操作中，向長滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬。同時，鹽還能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。 答案：(1)豆腐上長出毛霉　加鹵湯裝瓶　(2)15～18　濕度　毛霉孢子　(3)抑制微生物的生長 ———————————突破點(三)　泡菜的制作—————— 1．泡菜的制作 (1)菌種來源：附著在蔬菜上的乳酸菌。 (2)制作原理：在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。反應式：C6H12O6―→2C3H6O3。 (3)完善制作流程： 2．測定亞硝酸鹽的含量 (1)檢測原理 ①有關(guān)反應： NO反應物玫瑰紅色染料。 ②判斷方法：觀察樣品顏色變化，并與標準顯色液比較，然后計算亞硝酸鹽含量。亞硝酸鹽溶液的濃度高，顏色深些；溶液濃度低，顏色淺些。 (2)檢測步驟 配制溶液→制備標準顯色液→制備樣品處理液→比色。 　(2013全國卷Ⅱ)回答下列有關(guān)泡菜制作的問題： (1)制作泡菜時，所用鹽水需煮沸，其目的是________________________________________________________________________。 為了縮短制作時間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的作用是________________________________________________________________________。 (2)泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進行_____________的過程。該過程發(fā)生在乳酸菌細胞的______中。 (3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有________、__________________和__________________等。 (4)從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是 ________________________________________________________________________， 原因是__________________________________________________________。 解析：(1)細菌分布廣泛，制作泡菜時，需要乳酸菌進行發(fā)酵，為防止雜菌污染，所需鹽水需要煮沸；加入陳泡菜液，可以增加乳酸菌數(shù)量，加速乳酸產(chǎn)生。(2)乳酸菌為原核生物，可通過無氧呼吸將葡萄糖分解為乳酸，其無氧呼吸的過程發(fā)生在乳酸菌的細胞質(zhì)中。(3)在泡菜制作過程中，要注意控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量等。(4)由于乳酸菌比雜菌更為耐酸，在酸性環(huán)境中，乳酸菌能夠正常地增殖，而其他雜菌繁殖將受到抑制，所以在此過程中，乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少。 答案：(1)殺滅雜菌　增加乳酸菌數(shù)量　(2)無氧呼吸　細胞質(zhì)　(3)溫度　腌制時間　食鹽用量　(4)乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少　乳酸菌比雜菌更為耐酸 1．泡菜腌制中乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化 發(fā)酵時期 乳酸菌 乳酸 亞硝酸鹽 發(fā)酵初期 少(有O2，乳酸 菌活動受抑制) 少 增加(硝酸鹽 還 原菌的作用) 發(fā)酵中期 最多(乳酸抑 制其他菌活動) 積累、增多、 pH下降 下降(硝酸鹽還 原菌受抑制，部分 亞硝酸鹽被分解) 發(fā)酵后期 減少(乳酸繼續(xù) 積累，pH繼續(xù)下 降，抑制其活動) 繼續(xù)增多， pH繼續(xù)下降 下降至相對穩(wěn) 定(硝酸鹽還原 菌被完全抑制) 變化曲線 注意：亞硝酸鹽是硝酸鹽還原菌促進硝酸鹽還原形成的，而不是硝化細菌氧化氨形成的 2．四種傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品的比較 菌種 呼吸類型 原理 溫度 果酒 酵母菌 兼性厭氧 無氧呼吸產(chǎn)生酒精 18～25 ℃ 果醋 醋酸菌 需氧 糖(酒精)→醋酸 30～35 ℃ 腐乳 毛霉等 需氧 蛋白酶、脂肪酶分別 水解蛋白質(zhì)、脂肪 15～18 ℃ 泡菜 乳酸菌 無氧 無氧呼吸產(chǎn)生乳酸 室溫 1．下列關(guān)于泡菜制作的敘述，錯誤的是(　　) A．泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵的過程即乳酸菌進行無氧呼吸的過程 B．制備樣品處理液時，加入氫氧化鋁乳液的目的是除去色素等雜質(zhì)，得到澄清溶液 C．腌制時，溫度過高、食鹽量過低、腌制的時間過短易引起細菌大量繁殖 D．制作泡菜的過程中，亞硝酸鹽的含量變化規(guī)律是先減少后增加 解析：選D　制作泡菜過程中，亞硝酸鹽的含量變化為先增加后減少。 2．(2014海南高考)已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時間有關(guān)。為了測定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學設(shè)計了一個實驗，實驗材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等?；卮鹣嚓P(guān)問題： (1)請完善下列實驗步驟。 ①標準管的制備：用________________________________和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標準管。 ②樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取一定量的__________________________，加到不同的比色管中，然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色，得到樣品管。 ③將每個____________分別與系列標準管進行比較，找出與樣品管顏色深淺____________的標準管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。 (2)如圖表示的是泡菜中__________________________________ ____________________________________________________趨勢。 (3)泡菜制作過程中產(chǎn)酸的細菌主要是____________(填“醋酸菌”或“乳酸菌”)。 解析：(1)在亞硝酸鹽的含量測定中，用不同濃度亞硝酸鈉標準溶液和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標準管；用刻度移液管分別吸取一定量的不同泡制天數(shù)的泡菜濾液，加到不同的比色管中，然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色，得到樣品管；將每個樣品管分別與系列標準管進行比較，找出與樣品管顏色深淺相近的標準管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管中的亞硝酸鹽含量。(2)據(jù)圖可知，該圖表示亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時間的變化曲線。(3)制作泡菜時利用的微生物是乳酸菌。 答案：(1)①不同濃度亞硝酸鈉標準溶液?、诓煌葜铺鞌?shù)的泡菜濾液?、蹣悠饭堋∠嗤?相近)　(2)亞硝酸鹽含量的變化　(3)乳酸菌 [課堂小結(jié)握主干]　(對應學生用書P197) 建知識體系(填一填) 記核心要點(背一背) [填空]①毛霉　②乳酸菌?、跜6H12O6―→2C3H6O3(乳酸) ④酵母菌　⑤C6H12O62C2H5OH＋2CO2?、薮姿峋? 1.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的三個要點 (1)泡菜制作過程中乳酸含量先增加后保持穩(wěn)定。 (2)制作果醋利用醋酸菌的有氧呼吸。 (3)腐乳制作中酒精及香辛料的作用不僅僅在于調(diào)味。酒精還可以抑制微生物生長，香辛料可防腐殺菌。 2．泡菜制作中鹽水煮沸的兩大作用 清水和鹽的質(zhì)量比為4∶1，鹽水要煮沸后冷卻。煮沸有兩大作用，一是除去水中氧氣，二是殺滅鹽水中的其他細菌。 3．幾種發(fā)酵技術(shù)中的微生物種類 (1)在葡萄酒的自然發(fā)酵中，菌種來源于附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。 (2)腐乳制作的主要菌種是毛霉，其在15～18 ℃生長迅速。豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子。 (3)制作泡菜的主要菌種是乳酸菌(厭氧菌)，在無氧條件下可將葡萄糖分解為乳酸。 [課后跟蹤檢測]　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　 一、選擇題 1．如圖是草莓酒制作的步驟，下列分析錯誤的是(　　) ―→―→―→―→―→―→ A．步驟②是對草莓進行滅菌處理 B．步驟⑤為加入酵母菌液 C．發(fā)酵過程中放氣量先增加后減少 D．利用酸性重鉻酸鉀溶液檢測酒精 解析：選A　步驟②是對草莓進行沖洗，不能進行滅菌，否則會殺死草莓上的野生型酵母菌，A錯誤；步驟⑤為加入酵母菌液或含酵母菌的凝膠珠，B正確；酒精發(fā)酵過程中除了產(chǎn)生酒精，還會產(chǎn)生大量的二氧化碳，但隨著發(fā)酵的進行，由于營養(yǎng)物質(zhì)逐漸減少等原因，酵母菌酒精發(fā)酵的速率減慢，產(chǎn)生的二氧化碳也隨之減少，因此發(fā)酵過程中放氣量先增加后減少，C正確；酒精可用酸性重鉻酸鉀溶液檢測，D正確。 2．如圖所示的裝置可用于生物技術(shù)實踐的相關(guān)實驗，下列有關(guān)敘述錯誤的是(　　 ) A．乙裝置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作 B．利用裝置甲制作腐乳時，應隨著豆腐塊層數(shù)的加高而增加鹽量 C．用裝置乙制作果酒時溫度應控制在30 ℃左右，制作果醋時應適當降溫 D．裝置乙的排氣口通過一個長而彎曲的膠管，可防止空氣中微生物的污染 解析：選C　用裝置乙制作果酒時溫度應控制在18～25 ℃，制作果醋時溫度應控制在30～35 ℃。 3．下面為腐乳制作過程的流程圖，下列說法錯誤的是(　　) →→→ A．毛霉為好氧型真菌，為避免缺氧，放豆腐時要留出一定縫隙 B．加鹽腌制的目的是析出豆腐中的水分使之變硬，同時能抑制微生物的生長 C．加鹵湯、密封腌制中，毛霉不斷增殖，并產(chǎn)生大量的酶，分解蛋白質(zhì) D．密封瓶口時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，以防止瓶口污染 解析：選C　從流程圖可以看出，毛霉在加鹽腌制前就已長成，加鹵湯、密封腌制中，毛霉不再增殖。 4．某人利用乳酸菌制作泡菜，因操作不當導致泡菜腐爛。下列原因中正確的是(　　) ①罐口密閉缺氧，抑制了乳酸菌的生長繁殖 ②罐口封閉不嚴，氧氣抑制了乳酸菌的生長繁殖 ③罐口封閉不嚴，氧氣抑制了其他腐生菌的生長和繁殖 ④罐口封閉不嚴，促進了需氧腐生菌的生長和繁殖 A．①③ B．②④ C．②③ D．①④ 解析：選B　制作泡菜要注意壇口的密封，封閉不嚴，氧氣進入會抑制乳酸菌的生長繁殖，也會導致需氧腐生菌的生長，使泡菜腐爛。 5．下列有關(guān)測定亞硝酸鹽含量的敘述，錯誤的是(　　) A．亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應需在鹽酸酸化條件下進行 B．重氮化反應后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料 C．對顯色反應樣品進行目測，可精確算出泡菜中亞硝酸鹽含量 D．配制溶液所用的提取劑為氯化鎘與氯化鋇 解析：選C　通過比色法來測定亞硝酸鹽含量，只能大致估算出其含量，并不能精確計算出其多少。 二、非選擇題 6．(2018惠州調(diào)研)近年，藍莓成為集營養(yǎng)與保健于一身的新興水果品種，果實可鮮食，也可加工成果醋、果酒等飲品。 (1)釀造藍莓果酒所需的主要微生物是________，水果中的糖類主要為該微生物提供________________________________________________________________________。 (2)家庭式釀造果酒大多數(shù)采用自然發(fā)酵的方法，一般不對果實進行嚴格的消毒處理，原因是________________________________________________________________________ ______________________；但這樣也能成功的原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)鑒定發(fā)酵成品是否含有酒精可用________________________________________________________________________ 來檢驗，如含有酒精則會呈現(xiàn)________色。 (4)若用果酒制作果醋，需往果酒中通入________，并保持比果酒制作時的溫度________(填“高”或“低”)。 解析：(1)釀造果酒所需的微生物主要是酵母菌，水果中的糖類主要為微生物生長提供碳源和能源。(2)家庭式釀造果酒大多數(shù)利用的是果皮上的野生型酵母菌，若對果實進行嚴格消毒，會導致果實表面的酵母菌被殺死，影響發(fā)酵。發(fā)酵過程中，在缺氧、酸性的環(huán)境中酵母菌能生長，而絕大多數(shù)其他微生物的生長受抑制，因此不進行嚴格的消毒處理，發(fā)酵也能夠成功。(3)鑒定酒精應選擇酸性重鉻酸鉀，若顏色變?yōu)榛揖G色，則說明有酒精產(chǎn)生。(4)制作果醋利用的微生物主要是醋酸菌，醋酸菌為好氧菌，因此發(fā)酵時需通入空氣，且其生長的適宜溫度高于酵母菌。 答案：(1)酵母菌　碳源和能源　(2)避免果實表面的酵母菌被殺死，影響酒精發(fā)酵　在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長而絕大多數(shù)其他微生物的生長繁殖受到抑制　(3)酸性重鉻酸鉀　灰綠　(4)空氣(氧氣)　高 7．(2016天津高考)天津獨流老醋歷史悠久、獨具風味，其生產(chǎn)工藝流程如下圖。 (1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應溫度，這是因為酶 ________________________________________________________________________。 (2)在酒精發(fā)酵階段，需添加酵母菌。在操作過程中，發(fā)酵罐先通氣，后密閉。通氣能提高________________________________________________________________________的數(shù)量， 有利于密閉時獲得更多的酒精產(chǎn)物。 (3)在醋酸發(fā)酵階段，獨流老醋采用獨特的分層固體發(fā)酵法，發(fā)酵30天。工藝如下： ①發(fā)酵過程中，定期取樣測定醋酸桿菌密度變化，趨勢如圖。據(jù)圖分析，與顛倒前相比，B層醋酸桿菌在顛倒后密度變化的特點是________________________，由此推測，影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是________________________________。 ②乳酸含量高是獨流老醋風味獨特的重要成因。發(fā)酵過程中，發(fā)酵缸中______________________________層的醋醅有利于乳酸菌繁殖，積累乳酸。 ③成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少，主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的改變，加劇了不同種類乳酸菌的____________，淘汰了部分乳酸菌種類。 解析：(1)酶的活性受溫度的影響，在最適溫度下酶的催化能力最強。(2)發(fā)酵過程中先通氣的目的是讓酵母菌大量繁殖，使發(fā)酵液中的酵母菌總數(shù)達到一定程度，有利于發(fā)酵的進行。(3)①醋酸桿菌是好氧菌，據(jù)圖分析，第15天將A、B層顛倒，顛倒后使原來處于下層缺氧狀態(tài)的醋酸桿菌分布在上層有氧的環(huán)境，醋酸桿菌大量繁殖，其數(shù)量上升，后來因為培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)被逐漸消耗以及呼吸產(chǎn)物對pH的影響，導致其數(shù)量不再增長而趨于穩(wěn)定。由此推測影響醋酸桿菌密度變化的主要因素是氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、pH。②因為乳酸菌是厭氧菌，故下層(未顛倒前B層處于下層，顛倒后A層處于下層)有利于乳酸菌繁殖。③由題目信息可知，由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗、發(fā)酵環(huán)境發(fā)生改變等，生物個體之間的斗爭、不同種類之間的競爭會加劇。 答案：(1)在最適溫度條件下催化能力最強　(2)酵母菌 (3)①先快速增長后趨于穩(wěn)定　氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、pH?、陬嵉骨暗腂層和顛倒后的A(或不翻動，或下)　③種間競爭(或競爭) 8．(2017全國卷Ⅱ)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}： (1)該實驗的自變量是________、________。 (2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是________。 (3)如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開_________，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開_________。 解析：(1)實驗使用甲、乙兩種菌種，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果，所以該實驗的自變量是菌種和發(fā)酵時間。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧型微生物。(3)因“32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系”，說明發(fā)酵的最佳時間可能超過32 h，故可繼續(xù)延長發(fā)酵時間，定期取樣觀測發(fā)酵效果，以確定最好的發(fā)酵效果所對應的時間，此時間即為最佳發(fā)酵時間。(4)從大豆到豆豉，在相關(guān)微生物的作用下，大豆中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)殡暮桶被?，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)楦视秃椭舅帷? 答案：(1)菌種　發(fā)酵時間　(2)好氧菌　(3)延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間　(4)氨基酸和肽　脂肪酸和甘油 9．腐乳是我國特有的發(fā)酵食品，是備受消費者喜愛的營養(yǎng)食品。某科研機構(gòu)研究了腐乳生產(chǎn)過程中不同濃度的食鹽對腐乳中氨基酸含量和pH的影響，部分數(shù)據(jù)如下所示。請回答下列問題。 鹽度(%) 時間(d) 5 8 11 5 6.66 6.72 6.70 10 6.63 6.62 6.68 20 4.64 6.58 6.62 30 4.61 6.56 6.58 45 4.50 6.47 6.52 60 4.11 6.44 6.50 后期發(fā)酵階段腐乳的pH變化 (注：后期發(fā)酵階段是指從腐乳裝瓶后直到成熟的過程) (1)腐乳生產(chǎn)過程有多種微生物的參與，其中起主要作用的是________。 (2)腐乳制備過程中，加鹽可以________________________________________________________________________， 使豆腐塊變硬。 (3)由圖可知，后期發(fā)酵過程中，隨著時間的延長，腐乳中游離氨基酸的含量將________，蛋白質(zhì)含量呈________趨勢。這是由于前期發(fā)酵階段產(chǎn)生了大量的________，在后期發(fā)酵階段將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子的物質(zhì)。 (4)由表可知，后期發(fā)酵到60天時，鹽度為________的腐乳已經(jīng)腐敗，說明原因：________________________________________________________________________。 (5)綜上研究結(jié)果，為了滿足口味清淡消費者的需求，同時保證營養(yǎng)豐富、口感鮮美，在生產(chǎn)過程中應該將腐乳的鹽度控制在________左右。 解析：參與腐乳生產(chǎn)的微生物主要是毛霉。在腐乳制備過程中，加鹽可以使豆腐中的水析出，使豆腐塊變硬，同時也可以抑制其他微生物的生長。毛霉產(chǎn)生的蛋白酶可以將蛋白質(zhì)分解成小分子的游離氨基酸和多肽。因此，在后期的發(fā)酵過程中，腐乳中蛋白質(zhì)的含量下降，游離氨基酸的含量上升。由表可知，鹽度為5%的腐乳隨時間延長，pH逐漸降低，表明已經(jīng)腐敗變質(zhì)，這是腐乳中鹽濃度過低，不能抑制其他微生物的生長導致的。 答案：(1)毛霉　(2)析出豆腐中的水分　(3)上升　下降　蛋白酶　(4)5%　鹽濃度過低，不足以抑制微生物的生長，導致腐敗變質(zhì)　(5)8% 10．無論是北方還是南方，泡菜的制作方法大致相同，一般的制作方法是：新鮮的蔬菜經(jīng)過整理、清潔后，放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中，然后向壇中加入鹽水、香料及一些“陳泡菜水”，密封后置于陰涼處，最適環(huán)境溫度為28～30 ℃。在實驗室或工廠生產(chǎn)泡菜時，還要跟蹤檢測泡菜腌制過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量?；卮鹩嘘P(guān)問題： (1)用白酒擦拭泡菜壇的目的是__________________________________________。 加入“陳泡菜水”的作用是___________________________________________。 (2)從細胞結(jié)構(gòu)來看，制作泡菜用的乳酸菌屬于________(填“原核生物”“真核生物”或“病毒”)。若要獲得大量乳酸菌菌種，應選用培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應有________、__________、水、無機鹽等，同時還必須滿足__________、________等具體培養(yǎng)條件的要求。 (3)泡菜壇一般用水封的目的是_________________________________________。 若泡菜壇有裂縫，可能會出現(xiàn)的結(jié)果是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是________________________________，如何進行調(diào)整？________________________，其中鹽與清水的質(zhì)量比為________。 解析：(1)制作泡菜時，所用的泡菜壇應用白酒擦拭消毒以防雜菌污染?！瓣惻莶怂敝泻腥樗峋?，制作泡菜時加入的“陳泡菜水”可提供乳酸菌菌種。(2)乳酸菌是原核生物。培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基中應有碳源、氮源、水、無機鹽等，同時還需滿足pH、無氧等具體培養(yǎng)條件的要求。(3)乳酸菌為厭氧菌，泡菜壇一般用水封的目的是隔絕空氣，創(chuàng)造無氧環(huán)境。若泡菜壇有裂縫，則會有部分空氣進入，導致乳酸菌不能正常生長，而一些雜菌大量繁殖，泡菜會變質(zhì)。(4)加鹽太多，抑制了乳酸菌的繁殖，可導致制作的泡菜“咸而不酸”。制作泡菜時，按照鹽與清水的質(zhì)量比為1∶4的比例配制鹽水。 答案：(1)消毒(或防止雜菌污染)　提供乳酸菌菌種 (2)原核生物　碳源　氮源(合理即可)　pH　無氧 (3)創(chuàng)造無氧環(huán)境　乳酸菌不能正常生長，而一些雜菌大量繁殖，泡菜會變質(zhì)　(4)加鹽過多，抑制了乳酸菌發(fā)酵　減少鹽的投放量　1∶4 11．近年來，紀錄片《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請分析回答下列問題： (1)在果醋制作時，運用醋酸菌在供應________和糖源充足時，將果糖分解成醋酸；在糖源不充足時，也可以利用酒精生成醋酸，請寫出該過程的反應式：________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)腐乳制作的流程是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時，應注意控制__________________；配制鹵湯時，要使鹵湯中酒的含量控制在________%左右。 (3)制作泡菜的原理是________________________________________________________________________ __________________________。蔬菜在腌制過程中，會產(chǎn)生亞硝酸鹽，在________________________________________________________________________ 條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生________________反應后，再與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成________色染料。 解析：(1)在果醋制作時，當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?，其反應式為：C2H5OH＋O2酶,CH3COOH＋H2O。(2)腐乳制作過程中，加鹽腌制時，應注意控制鹽的用量；配制鹵湯時，要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右，若酒精含量過高會延長腐乳成熟的時間，若酒精含量過低則不足以殺菌。(3)制作泡菜的原理是乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖，將葡萄糖分解成乳酸。在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，再與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。 答案：(1)氧氣　C2H5OH＋O2酶,CH3COOH＋H2O　(2)鹽的用量　12　(3)乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖，將葡萄糖分解成乳酸　鹽酸酸化　重氮化　玫瑰紅 第2講 微生物的培養(yǎng)和利用 ——突破點(一)　培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)————— 1．培養(yǎng)基 2．無菌技術(shù) 3．大腸桿菌的純化培養(yǎng) 　(2014全國卷Ⅱ)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是________________________________________________________________________； 然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中____________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高______________________的利用率。 解析：(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。0.1 mL稀釋液中平均有38個活菌，可推測每升水樣中的活菌數(shù)＝38101001 000＝3.8107(個)。(2)接種環(huán)、接種針或其他金屬用具直接在酒精燈外焰灼燒，可以迅速徹底地滅菌。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3)比較兩圖可以看出，A是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果，B是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)由于振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。 答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8107 (2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 (3)B　(4)溶解氧　營養(yǎng)物質(zhì) 1．培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的確定方法 (1)自養(yǎng)型微生物所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)是無機物，碳源可來自大氣中的CO2，氮源可由含氮無機鹽提供。 (2)異養(yǎng)型微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)主要是有機物，即碳源必須由含碳有機物提供，氮源主要由有機物提供，部分異養(yǎng)型微生物可以利用無機氮源。 2．選擇無菌技術(shù)的原則 (1)考慮無菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好。 (2)考慮操作對象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌。 3．兩種純化細菌方法的比較 項目 優(yōu)點 缺點 適用范圍 平板 劃線法 可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離 不能計數(shù) 適用于好氧菌 稀釋涂 布平板法 可以計數(shù)，可以觀察菌落特征 操作復雜、需要涂布多個平板 適用于厭氧菌和兼性厭氧菌 1．在微生物實驗室培養(yǎng)過程中，無菌技術(shù)是實驗成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。下列常用的無菌操作錯誤的是(　　) A．無菌操作不要求殺死培養(yǎng)基內(nèi)的一切微生物 B．用酒精擦拭雙手的方法對操作者進行消毒 C．實驗操作過程中應在酒精燈火焰附近進行 D．玻璃器皿可用酒精擦拭來進行滅菌 解析：選D　無菌技術(shù)是用來防止培養(yǎng)物被其他外來微生物污染，而不是殺死培養(yǎng)基中的一切微生物；對操作者應用較溫和的方法進行消毒；實驗操作過程中應在酒精燈火焰旁進行，防止微生物污染培養(yǎng)基；無菌操作用到的玻璃器皿要用干熱滅菌法徹底消滅其中的微生物，用酒精擦拭只能消毒不能滅菌。 2．為了獲得純度高的大腸桿菌，需要對大腸桿菌進行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。 (1)培養(yǎng)大腸桿菌，配制固體培養(yǎng)基的基本步驟為：計算→稱量→__________→__________→倒平板。 (2)稱量時，由于牛肉膏比較黏稠，可以用________________________________________________________________________挑取， 放在______上稱量。由于牛肉膏和蛋白胨________________________________________________________________________， 稱量時動作要迅速，稱量后要及時蓋上瓶蓋。 (3)在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌能生長，說明培養(yǎng)基含有________________________________________________________________________ 等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。 (4)微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法如__________ 和______________等，使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個________，從而獲得純菌株。 解析：配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基本步驟為：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。稱量時，由于牛肉膏比較黏稠，可用玻璃棒挑取，放在稱量紙上稱量，而牛肉膏和蛋白胨容易吸潮，稱量時動作要迅速。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中含有大腸桿菌所需要的碳源、氮源、無機鹽、水等營養(yǎng)要素，所以常用來培養(yǎng)大腸桿菌。微生物純化培養(yǎng)的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，可使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個菌落，從而獲得純菌株。 答案：(1)溶化　滅菌　(2)玻璃棒　稱量紙　容易吸潮　(3)碳源、氮源、無機鹽、水　(4)平板劃線法　稀釋涂布平板法　菌落 ———————突破點(二)　微生物的篩選與計數(shù)—————— 1．土壤中分解尿素細菌的分離 2．纖維素分解菌的篩選 3．纖維素酶 來源 纖維素分解菌 組成 復合酶，至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶 作用 纖維素C1酶、CX酶 纖維二糖葡萄糖苷酶 葡萄糖 　(2017全國卷Ⅰ)某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}： (1)有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生__________。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是__________________________________________。但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是______________________________________________(答出兩點即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是____________________________________________________。 (3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________________________________(答出兩點即可)。 解析：(1)土壤中的某些細菌之所以能夠分解尿素，是因為它們能產(chǎn)生脲酶。尿素分解菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機物，必須利用現(xiàn)成的有機物(如葡萄糖)作為碳源；葡萄糖通過呼吸作用被分解時，能為細胞生命活動提供能量，同時，葡萄糖還可以為其他有機物的合成提供原料。(2)選擇培養(yǎng)基是允許特定種類的微生物(目的微生物)生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。本實驗的目的菌是可分解尿素的細菌，因此配制的培養(yǎng)基應只允許尿素分解菌生長，NH4NO3可以作為所有細菌的氮源，培養(yǎng)基中若含有NH4NO3，將不能起到篩選作用。(3)KH2PO4和Na2HPO4能為細菌生長提供鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽，而H2PO/HPO可作為緩沖劑，使培養(yǎng)基中pH保持相對穩(wěn)定。 答案：(1)脲酶　分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機物　為細胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料　(2)尿素　其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用　(3)為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定 1．微生物的篩選與鑒別方法 (1)微生物的篩選方法 單菌落 挑取法 利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物 選擇 培養(yǎng)法 利用選擇培養(yǎng)基對微生物進行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物 鑒定 培養(yǎng)法 利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物 (2)微生物的鑒別方法 菌落特征 鑒別法 根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進行鑒別 指示劑 鑒別法 如培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基變紅，說明該種微生物能夠分解尿素 染色 鑒別法 如利用剛果紅染色法，根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來篩選分解纖維素的微生物 2．兩種計數(shù)方法的比較 間接計數(shù)法 (稀釋涂布平板法) 直接計數(shù)法 (顯微計數(shù)法) 原理 當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌 利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量 公式 每克樣品中的菌落數(shù)＝(CV)M C：某稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)；V：涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)；M：稀釋倍數(shù) 每毫升原液所含細菌數(shù)：每小格平均細菌數(shù)400104稀釋倍數(shù) 缺點 當兩個或多個菌體連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 不能區(qū)分細胞死活 結(jié)果 比實際值偏小 比實際值偏大 1．(2014全國卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將__________分解成__________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成________色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的__________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)： 酵母膏 無機鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng)基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示無。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是________________________________________________________________________ ________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)纖維素酶包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，C1酶、CX酶催化纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)CR能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物