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1、選修一 專題一 微生物的利用1. (2009寧夏卷,40)(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行_(消毒、滅菌);操作者的雙手需進(jìn)行清洗和_;靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能_。(3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù),要想使所得估計值更接近實(shí)際值,除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外,還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_。(4)通常,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等
2、菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的_。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_。_,(6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。解析:解答本題需要識記微生物的培養(yǎng)條件、代謝特點(diǎn),實(shí)驗(yàn)室微生物培養(yǎng)規(guī)范和主要步驟。微生物的培養(yǎng)條件有適宜的營養(yǎng)物質(zhì)(碳源、氮源、無機(jī)鹽等)、溫度、pH、滲透壓(控制培養(yǎng)液的濃度)等。細(xì)菌具有個體微小、結(jié)構(gòu)簡單、生長周期短、繁殖快、代謝旺盛、變異類型簡單(主要是基因突變)等特點(diǎn)。在微生物實(shí)驗(yàn)操作中,防止雜菌污染是貫穿實(shí)驗(yàn)整個過程中的內(nèi)容,因此,對環(huán)境、生物材料、操作者雙手等進(jìn)行消
3、毒,對培養(yǎng)基、接種環(huán)和培養(yǎng)儀器進(jìn)行滅菌等是微生物實(shí)驗(yàn)中的常見操作。紫外線滅菌的原理是紫外線的高能量使蛋白質(zhì)和DNA等生物分子變性,即空間結(jié)構(gòu)改變。稀釋涂布平板法是細(xì)菌分離純化的常用方法,合適的稀釋倍數(shù)是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落,依據(jù)菌落大小、形態(tài)、色澤等可以對細(xì)菌進(jìn)行鑒定或分類。答案:(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)鑒定(或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌,2. (2009上海卷,39)氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料,因其不易降解,會污染環(huán)境。某
4、研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表。圖1表培養(yǎng)基的組成(1)配制號固體培養(yǎng)基時,除添加號液體培養(yǎng)基成分外,還應(yīng)添加1%的_。(2)培養(yǎng)基配制時,滅菌與調(diào)pH的先后順序是_。(3)從用途上來說,號培養(yǎng)基和號培養(yǎng)基分別屬于_培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基。在號培養(yǎng)基中,為SP1菌提供氮源的成分是_。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時,SP1的菌體變成一個圓形的休眠體,這種休眠體被稱為_。圖2(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的號培養(yǎng)液中培養(yǎng),得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知,SP1菌在_培養(yǎng)條件下最早停止生長,其原因是_。解析:固體培養(yǎng)基中除添加營養(yǎng)成分外,還需要
5、加入一定量的凝固劑,如瓊脂;細(xì)菌培養(yǎng)的基本過程:配制培養(yǎng)基(稱量溶化調(diào)pH分裝加棉塞包扎)滅菌擱置斜面接種培養(yǎng)(25下57 d或37下24 h)。根據(jù)培養(yǎng)基的用途可分為基本培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基等,題中號培養(yǎng)基屬于基本培養(yǎng)基,由于號培養(yǎng)基中的碳源僅是氯苯,因此,培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。號培養(yǎng)基中僅硝酸銨含有氮元素,因此,它是該培養(yǎng)基中的氮源。細(xì)菌的休眠體是芽孢。根據(jù)曲線圖可知,氯苯濃度為20 mg/L時,菌體數(shù)量最先減少,最可能是由于氯苯被耗盡。答案:(1)瓊脂(2)先調(diào)pH,后滅菌(3)通用(基本)選擇硝酸銨(4)芽孢(5)20 mg/L氯苯碳源最早耗盡,3. 尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料
6、,但若不經(jīng)細(xì)菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用,設(shè)計了以下實(shí)驗(yàn),并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示,實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請分析回答問題:KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10 g尿素1 g瓊脂1.5 g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到100 mL(1)此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)?_,理由是_。(2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選_,這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的_和_,實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng),原因是
7、_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時,常采用_的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(5)下列材料或用具中:培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿;玻棒、試管、錐形瓶和吸管;實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。需要滅菌的是:_;需要消毒的是:_。(填序號)(6)在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)時,A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落,而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有_(填序號)。由于土樣不同由于培養(yǎng)基污染由于操作失誤沒有設(shè)置對照(7)簡述土壤中可分解尿素細(xì)菌的鑒定方法及原理:_,_。解析:(1)考查微生物培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基的區(qū)別。配制培養(yǎng)基需要根據(jù)培養(yǎng)的生物營養(yǎng)需求情況,確定其成分及比例。植物組織培養(yǎng)需要有滿足植物細(xì)胞生長所必需的營養(yǎng)和植物激素等條件。(2)培養(yǎng)基中加入尿素能夠篩選出能分解尿素的細(xì)菌,屬于選擇培養(yǎng)基。(3)尿素為該細(xì)菌提供氮源,葡萄糖為該細(xì)菌提供碳源。振蕩培養(yǎng)基可溶入氧氣,供培養(yǎng)的目的菌提供必需的氧氣。,(6)培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)菌數(shù)量與是否設(shè)置對照無關(guān)。答案:(1)不能缺少多種必需的礦質(zhì)元素 (2)目的菌選擇(3)尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣(4)涂布平板(劃線)(5)和(6)(7)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨,pH增高,使酚紅指示劑變紅