2019年高考生物二輪復(fù)習(xí) 基礎(chǔ)保分專題十一 生物技術(shù)實踐學(xué)案.doc

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基礎(chǔ)保分專題十一生物技術(shù)實踐 [課前循圖憶知] 　　　　　　　　　　　　考點一　微生物的培養(yǎng)與利用 [做真題明方向] 1．(2018全國卷Ⅰ)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}： (1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制________的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有__________________(答出兩點即可)。氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有________________(答出兩點即可)。 (3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是________，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_____________________________________________________________。 (4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果： 甲同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133； 乙同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。 有人認為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是_________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)鏈霉素是抗生素，可抑制細菌生長，故加入鏈霉素的M培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，可篩選出真菌。(2)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分一般包括碳源、氮源、水和無機鹽等。細胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白質(zhì)、核酸等，故加入的氮源可參與以上物質(zhì)的合成。(3)淀粉遇碘液變藍，能產(chǎn)生淀粉酶的微生物可將淀粉水解成麥芽糖，向加有淀粉的培養(yǎng)基中加入碘液后培養(yǎng)基呈現(xiàn)藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍的淀粉被水解，形成透明圈，可根據(jù)透明圈的大小判斷產(chǎn)生淀粉酶的多少。(4)統(tǒng)計菌落數(shù)時，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，甲同學(xué)統(tǒng)計的3個平板中的菌落數(shù)在正常范圍內(nèi)且差距不大，比較準確；乙同學(xué)統(tǒng)計的3個平板中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差。 答案：(1)細菌　選擇　(2)碳源、無機鹽　蛋白質(zhì)、核酸 (3)碘液　淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈　(4)乙同學(xué)的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差 2．(2018全國卷Ⅱ)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}： (1)在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具________(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是_________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能________________。在照射前，適量噴灑________，可強化消毒效果。 (4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。 (5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度，最可能的原因是________________________________________。 解析：(1)干熱滅菌是指將滅菌物品放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170 ℃條件下加熱1～2 h。能耐高溫、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等，可采用干熱滅菌的方法。(2)巴氏消毒法是在70～75 ℃條件下煮30 min或在80 ℃條件下煮15 min，可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶的營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(3)接種室、接種箱或超凈工作臺在使用前，可以用紫外線照射30 min，紫外線能破壞微生物的DNA結(jié)構(gòu)，從而殺死物體表面或空氣中的微生物。在照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以強化消毒效果。(4)自來水通常是用氯氣進行消毒的。(5)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度，最可能的原因是鍋內(nèi)原有的冷空氣沒有排盡。 答案：(1)可以　(2)在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少　(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)　消毒液　(4)氯氣　(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡 3．(2018全國卷Ⅲ)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題： (1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用______________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用____________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落，菌落的含義是________________________________________。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進________________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)；若進行厭氧培養(yǎng)，可促進______________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。 (3)制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是________________________________________________________________。 解析：(1)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用廣泛的細菌培養(yǎng)基；MS培養(yǎng)基是滿足植物細胞的營養(yǎng)和生理需要的培養(yǎng)基；麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基通常用于酵母菌(真菌)的培養(yǎng)、鑒定及菌種保存。培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法。菌落是指由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體。(2)酵母菌為兼性厭氧型微生物，在有氧條件下進行有氧呼吸為酵母菌的快速繁殖提供能量，在無氧條件下，酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇。(3)面包松軟是因為制作過程中，加入的酵母菌可以分解葡萄糖產(chǎn)生大量的CO2，CO2遇熱膨脹，使得制作的面包松軟多孔。 答案：(1)麥芽汁瓊脂　高壓蒸汽　由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體　(2)菌體快速增殖　乙醇產(chǎn)生　(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟 命題方向 基礎(chǔ)類 第1題的(1)(2)小題，第2題的(1)(2)(3)(4)小題及第3題的(1)小題 理解類 第1題的(3)(4)小題，第2題的(5)小題及第3題的(2)(3)小題 復(fù)習(xí)方向 1．記憶培養(yǎng)基的成分、培養(yǎng)基配制的過程、消毒和滅菌的方法、原理等，如第1題的(1)(2)小題，第2題的(1)(2)(3)(4)小題 2．重點理解消毒和滅菌的區(qū)別、微生物篩選的原理、微生物鑒定的原理，如第1題的(3)(4)小題，第3題的(2)小題 3．特別注意實驗誤差和實驗結(jié)論的分析，如第2題的(5)小題，第3題的(3)小題 [理教材固根基] 1．圖解識記微生物的培養(yǎng)、分離與計數(shù)(填圖) 2．熟記微生物分離與計數(shù)的兩個實例(填空) (1)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)： ①篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。 ②測定微生物數(shù)量的常用方法：活菌計數(shù)法和顯微鏡直接計數(shù)。 ③過程：土壤取樣→制備培養(yǎng)基→樣品稀釋→涂布平板→培養(yǎng)與觀察→菌落計數(shù)。 ④鑒定方法：含酚紅指示劑的以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基→細菌→指示劑變紅，則該菌能分解尿素。 (2)分解纖維素的微生物的分離： ①實驗原理： 即：可通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。 ②流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌落。 [練熱點會遷移] 1．除草劑(含氮有機物)的長期使用會污染土壤，為了解決這一問題，某科研小組選擇培養(yǎng)了能降解某種除草劑的細菌(已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)，如圖為選擇培養(yǎng)過程。請回答下列問題： (1)制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行________處理。 (2)從培養(yǎng)基的物理性質(zhì)來看，甲培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基；從功能來看，甲培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，應(yīng)以________為唯一氮源。 (3)在甲培養(yǎng)基中進行劃線操作時，劃線時，應(yīng)該先對接種環(huán)進行____________，為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在______________附近進行。 (4)在乙培養(yǎng)基上，有透明帶菌落利用的氮源主要是________，無透明帶菌落利用的氮源可能是________，據(jù)此可篩選出目的菌。 解析：(1)通過稀釋的方法可以使土壤浸出液的濃度下降。(2)分離降解除草劑細菌的培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基，且以除草劑作為唯一氮源，即為選擇培養(yǎng)基。(3)劃線前，為了防止雜菌污染，應(yīng)將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒滅菌，為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行。(4)根據(jù)題干信息可知，含除草劑的培養(yǎng)基不透明，出現(xiàn)有透明帶菌落說明除草劑被分解，該細菌以除草劑為氮源；出現(xiàn)無透明帶菌落說明該細菌不能以除草劑作為氮源，但可以空氣中的氮氣為氮源。 答案：(1)稀釋　(2)固體　選擇　除草劑　(3)灼燒滅菌　酒精燈火焰　(4)除草劑　氮氣 2．酵母的蛋白質(zhì)含量可達自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請回答下列問題： (1)配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的________，及時對培養(yǎng)基進行分裝，并進行____________滅菌。 (2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標記好的無菌培養(yǎng)皿中，在步驟③中將溫度約________(在25 ℃、50 ℃或80 ℃中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。 (3)挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟④所示進行劃線。下列敘述合理的有________。 a．為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌 b．劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落 c．挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定酵母細胞中甲醇的含量 d．可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株 (4)步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和________供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細胞密度，將發(fā)酵液稀釋1 000倍后，經(jīng)等體積臺盼藍染液染色，用2516型血細胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù)，理論上________色細胞的個數(shù)應(yīng)不少于________，才能達到每毫升3109個活細胞的預(yù)期密度。 解析：(1)配制培養(yǎng)基時，進行計算、稱量、溶解、定容后，需先調(diào)pH再分裝到錐形瓶中進行高壓蒸汽滅菌。(2)倒平板時的培養(yǎng)基溫度約為50 ℃，冷凝后倒置培養(yǎng)。(3)平板劃線時，接種針、接種環(huán)使用前和每次劃線后都需要進行灼燒滅菌，以免造成雜菌污染；劃線時不能劃破培養(yǎng)基表面，否則不能形成正常菌落；挑取菌落時，應(yīng)挑取多個不同的菌落，分別測定酵母細胞中蛋白質(zhì)含量；逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，能篩選出其中的耐受菌，獲得耐受高甲醇的菌株。(4)酵母菌是兼性厭氧型真菌，在有氧條件下可大量繁殖。酵母擴大培養(yǎng)時，需保證充足的營養(yǎng)和氧氣等條件。由題中信息“經(jīng)等體積臺盼藍染液染色”可知，計數(shù)室中培養(yǎng)液容積實際只有0.12＝0.05 (mm3)。設(shè)5個中方格中無色(活細胞不能被臺盼藍染色)的細胞數(shù)目為x個，則3109＝x/5251 0001 0000.05，解得x＝30(個)。 答案：(1)pH　高壓蒸汽(濕熱)　(2)50 ℃　(3)a、b、d (4)氧氣　無　30 3．(2018開封三模)一定濃度的福爾馬林(甲醛的水溶液)通過使蛋白質(zhì)變性而起防腐作用。為較好處理福爾馬林廢液，科研人員設(shè)計如下實驗，希望分離出活性污泥中分解甲醛的高效細菌。如圖為分離和純化分解甲醛的細菌的實驗過程，其中LB培養(yǎng)基能使菌種成倍擴增。請分析回答： (1)圖中③過程錐形瓶內(nèi)的碳源是________，應(yīng)用該碳源的目的是________________________。 (2)①→②過程，用______________將該菌懸液注入LB培養(yǎng)基中。 (3)③→④過程，接種目的是_________________________________。若活性污泥中分解甲醛的細菌數(shù)量較多，需 要在③→④接種前添加________操作來完善上述實驗。 (4)經(jīng)過⑤過程及取樣測定甲醛濃度后的操作是________________________________。 (5)圖示為分解甲醛的細菌在⑤過程中分解甲醛的檢測結(jié)果。據(jù)圖分析，48 h后該菌對甲醛的分解能力改變的原因是____________________________________________________。 解析：(1)③過程培養(yǎng)基中以甲醛為唯一碳源，培養(yǎng)出的是分解甲醛的細菌，即以甲醛為唯一碳源的細菌。(2)①→②過程，用無菌移液管將該菌懸液注入LB培養(yǎng)基中。(3)③過程可以篩選出能分解甲醛的微生物，④過程可以獲得單菌落，接種目的是通過單個菌落分離出分解甲醛的細菌。若活性污泥中分解甲醛的細菌數(shù)量較多，需要在③→④接種前應(yīng)進行梯度稀釋。(4)分析題圖可知，③→④接種的目的是獲得由單個細菌繁殖而來的單菌落，獲得單菌落常用的接種方法是平板劃線法或稀釋涂布平板法，經(jīng)過⑤過程后取樣測定甲醛濃度，選出甲醛濃度最低的培養(yǎng)瓶，再分離、培養(yǎng)菌株。(5)分析題圖曲線可知，當(dāng)甲醛的初始濃度小于1200 mg/L時，菌株可以完全降解甲醛，當(dāng)甲醛的初始濃度增高至1600 mg/L時，由于甲醛濃度過高，使菌體蛋白質(zhì)變性，從而降低了細菌分解甲醛的能力甚至殺死分解甲醛的微生物。 答案：(1)甲醛　篩選出分解甲醛的細菌　(2)無菌移液管　(3)通過單個菌落分離出分解甲醛的細菌　(梯度)稀釋　(4)選出甲醛濃度最低的培養(yǎng)瓶，再分離、培養(yǎng)菌株　(5)甲醛濃度過高導(dǎo)致分解甲醛的細菌的蛋白質(zhì)變性，降低了分解甲醛的能力 考點二　生物技術(shù)在食品加工方面的應(yīng)用 [做真題明方向] 1．(2017全國卷Ⅱ)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}： (1)該實驗的自變量是________、____________。 (2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是________。 (3)如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開_______________，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開_______________。 解析：(1)實驗使用甲、乙兩種菌種，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果，所以該實驗的自變量是菌種和發(fā)酵時間。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧型微生物。(3)因“32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系”，說明發(fā)酵的最佳時間可能超過32 h，故可繼續(xù)延長發(fā)酵時間，定期取樣觀測發(fā)酵效果，以確定最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間，此時間即為最佳發(fā)酵時間。(4)從大豆到豆豉，在相關(guān)微生物的作用下，大豆中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)殡暮桶被?，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)楦视秃椭舅帷? 答案：(1)菌種　發(fā)酵時間　(2)好氧菌　(3)延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間　(4)氨基酸和肽　脂肪酸和甘油 2．(2017全國卷Ⅲ)綠色植物甲含有物質(zhì)W，該物質(zhì)為無色針狀晶體，易溶于極性有機溶劑，難溶于水，且受熱、受潮易分解。其提取流程為：植物甲→粉碎→加溶劑→振蕩→收集提取液→活性炭處理→過濾去除活性炭→蒸餾(含回收溶劑)→重結(jié)晶→成品?；卮鹣铝袉栴}： (1)在提取物質(zhì)W時，最好應(yīng)選用的一種原料是_______(填“高溫烘干”“晾干”或“新鮮”)的植物甲，不宜選用其他兩種的原因是_______________________________________。 (2)提取物質(zhì)W時，振蕩的作用是______________________________________________。 (3)活性炭具有很強的吸附能力，在提取過程中，用活性炭處理提取液的目的是__________________________。 (4)現(xiàn)有丙酮(沸點56 ℃)、乙醇(沸點約78 ℃)兩種溶劑，在提取物質(zhì)W時，應(yīng)選用丙酮作為提取劑，理由是 _______________________________________________________________________。 (5)該實驗操作過程中應(yīng)注意的事項是________________________________________ ___________________________________________________________(答出兩點即可)。 解析：(1)依據(jù)題干信息，物質(zhì)W受熱、受潮易分解，因此不宜選擇高溫烘干，而新鮮的植物甲含水量高，用于提取的極性有機溶劑會被水稀釋，進而降低對物質(zhì)W的提取效果，故不應(yīng)選用新鮮的植物甲。(2)提取物質(zhì)W時，振蕩可以使原料和所加有機溶劑充分混勻。(3)利用活性炭的吸附能力，可以去除提取液中植物甲所含的色素，從而得到較為純凈的物質(zhì)W與有機溶劑的混合物。(4)丙酮沸點低于乙醇，蒸餾時物質(zhì)W分解較少。(5)物質(zhì)W容易受熱分解，因此蒸餾操作應(yīng)在較低的溫度下進行，同時因?qū)嶒炛惺褂昧擞袡C溶劑，要注意防火。 答案：(1)晾干　高溫烘干過程中，植物甲中的物質(zhì)W易被破壞；新鮮的植物甲含水量高，用于提取的極性有機溶劑會被水稀釋，進而降低對物質(zhì)W的提取效果 (2)使原料和溶劑充分混勻　(3)去除提取液中的色素 (4)丙酮沸點低于乙醇，蒸餾時物質(zhì)W分解較少 (5)在溫度較低的情況下操作，防火 3．(2016全國卷Ⅱ)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}： (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細胞的______________中進行，其產(chǎn)物乙醇與________________試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗；過程③在酵母菌細胞的________________中進行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度__________。 (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在____________條件下才能完成。 (3)在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度__________(填“低于”或“高于”)第二階段的。 (4)醋酸桿菌屬于__________核生物，其細胞結(jié)構(gòu)中________(填“含有”或“不含有”)線粒體。 解析：(1)圖中過程①和②是酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇的過程，無氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)。乙醇可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測，顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。過程③為有氧呼吸的第二和第三階段，場所為線粒體。在有氧條件下酵母菌進行有氧呼吸，產(chǎn)生更多的能量供酵母菌繁殖利用，故有氧條件下酵母菌的繁殖速度更快。(2)醋酸桿菌是好氧型細菌，因此，在醋酸桿菌作用下，將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程需要在有氧條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過程中，第一階段酵母菌產(chǎn)生乙醇的適宜溫度為18～25 ℃，第二階段醋酸桿菌產(chǎn)生醋酸的適宜溫度為30～35 ℃，第一階段的溫度低于第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于原核生物，原核細胞中的細胞器只有核糖體一種，不含線粒體。 答案：(1)細胞質(zhì)基質(zhì)　重鉻酸鉀　線粒體　快 (2)有氧　(3)低于　(4)原　不含有 4．(2015全國卷Ⅱ)回答與胡蘿卜素有關(guān)的問題： (1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素中，最主要的是__________(填“α胡蘿卜素”“β胡蘿卜素”或“γ胡蘿卜素”)，該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成兩分子________，后者缺乏會引起人在弱光下視物不清的病癥，該疾病稱為________，胡蘿卜素是________(填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”)物質(zhì)。 (2)工業(yè)生產(chǎn)上，用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時，________(填“需要”或“不需要”)將新鮮的巖藻干燥。 (3)現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑，應(yīng)選用其中的____________作為胡蘿卜素的萃取劑，不選用另外一種的理由是___________________________________________。 解析：(1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素有三類，其中最主要的是β胡蘿卜素，β胡蘿卜素在人或動物體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成維生素A，維生素A缺乏會導(dǎo)致夜盲癥。胡蘿卜素是非揮發(fā)性物質(zhì)。(2)胡蘿卜素的提取一般采用萃取法，萃取前需要對材料進行干燥處理，以提高萃取的效率。(3)萃取胡蘿卜素的有機溶劑應(yīng)該具有很高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶，如乙酸乙酯。乙醇是水溶性有機溶劑，因萃取過程中能與水混溶而影響萃取效果，所以不用它作萃取劑。 答案：(1)β胡蘿卜素　維生素A　夜盲癥　非揮發(fā)性 (2)需要　(3)乙酸乙酯　萃取胡蘿卜素的有機溶劑應(yīng)不與水混溶，而乙醇為水溶性有機溶劑(其他合理答案也可) 命題方向 基礎(chǔ)類 第1題的(1)(4)小題，第3、4題的(1)(2)小題 理解類 第1題的(2)(3)小題，第2、4題的(3)小題 復(fù)習(xí)方向 1.記憶果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的原理和過程及植物有效成分提取的方法、原理和過程，如第1題的(1)(4)小題，第3、4題的(1)(2)小題 2．重點理解果酒、果醋、腐乳及泡菜制作及植物有效成分提取過程中的注意事項。如第1題的(2)(3)小題，第2題的(4)(5)小題，第4題的(3)小題 [理教材固根基] 1．比較記憶果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作(填表) 項目內(nèi)容 果酒和果醋的制作　　 腐乳制作 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 作用菌種 果酒：酵母菌 果醋：醋酸菌 主要是毛霉 乳酸菌 原理 ①酵母菌在無氧條件下將葡萄糖氧化成乙醇 ②醋酸菌在有氧條件下將乙醇氧化為醋酸 毛霉將蛋白質(zhì)、脂肪分解成小分子有機物 乳酸菌將糖分解為乳酸 原料選擇 新鮮葡萄(或蘋果) 豆腐 大白菜、花椰菜等新鮮干凈的蔬菜 實驗流程 讓豆腐上長出毛霉 ↓ 加鹽腌制 ↓ 加鹵湯裝瓶 ↓ 密封腌制 測亞硝酸鹽含量：配制溶液→制備標準顯色液→制備樣品處理液→比色 2．圖解植物有效成分的提取(填空) (1)植物有效成分的提取方法： 提取方法 方法步驟 適用范圍 蒸餾法 水蒸氣蒸餾→分離油層→除水過濾 適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油 壓榨法 石灰水浸泡→漂洗→壓榨、過濾、靜置→再次過濾 適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取 萃取法 粉碎、干燥→萃取、過濾→濃縮 適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細小，能充分浸泡在有機溶劑中 (2)提取植物有效成分的實例： ①玫瑰精油的提?。? ②橘皮精油的提?。? ③胡蘿卜素的提取： 3．DNA的粗提取與鑒定 [練熱點會遷移] 1．某校同學(xué)在生物實驗室開展生物技術(shù)實踐活動。請回答下列有關(guān)問題： (1)A組同學(xué)制作的蘋果酒清香、明快，風(fēng)味清爽，它是由果汁發(fā)酵產(chǎn)生的。果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可用____________來檢驗。 (2)B組同學(xué)在藍莓果酒制作過程中，在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是由________大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源時將乙醇變?yōu)開_________，然后變?yōu)榇姿帷? (3)C組同學(xué)用豆腐發(fā)酵制成腐乳，發(fā)酵過程中主要是微生物分泌的多種酶發(fā)揮作用，其中主要是____________。 (4)D組同學(xué)制作泡菜。在泡菜腌制的過程中，要注意控制腌制的時間、___________和食鹽的用量；泡菜不能急著吃，是因為泡菜制作過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽，實驗室常采用比色法來檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量，亞硝酸鹽在適宜條件下可以與相關(guān)試劑反應(yīng)生成_____________色物質(zhì)。 (5)E組同學(xué)嘗試用胡蘿卜提取胡蘿卜素，他們采用的方法是____________；胡蘿卜素的性質(zhì)：不溶于________，微溶于乙醇，易溶于_____________等有機溶劑；胡蘿卜素的鑒定方法常用__________。 解析：(1)在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。(2)當(dāng)氧氣充足，缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿帷?3)腐乳是用豆腐發(fā)酵制成的，有多種微生物參與其中，其中起主要作用的是毛霉，起作用的酶主要是蛋白酶和脂肪酶。(4)亞硝酸鹽的含量常采用比色法來檢測；亞硝酸鹽在適宜條件下可以與相關(guān)試劑反應(yīng)生成玫瑰紅色物質(zhì)。(5)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是萃取法；胡蘿卜素不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑，因此胡蘿卜素的鑒定常用紙層析法。 答案：(1)(酸性)重鉻酸鉀　(2)醋酸菌　乙醛　(3)蛋白酶(和脂肪酶)　(4)溫度　玫瑰紅　(5)萃取法　水　石油醚(乙醚或苯)　紙層析法 2．茶葉歷來被人們視為延年益壽之品。茶飲料主打“健康牌”，極少添加人工合成的色素、香精等，更多利用從植物中提取的天然成分。請回答下列問題： (1)紅茶菌液是一種傳統(tǒng)的活菌飲料，由酵母菌、醋酸菌等微生物利用蔗糖等營養(yǎng)物質(zhì)共同發(fā)酵產(chǎn)生。與醋酸菌相比，酵母菌在結(jié)構(gòu)上最主要的特點是__________________________，在接種活菌前，將紅茶糖水煮沸的目的是____________。 (2)茶飲料所添加的胡蘿卜素，通常采用________法從胡蘿卜中提取，理由是________________________?，F(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑，應(yīng)選用____________用于提取胡蘿卜素。 (3)如圖1所示為將提取的胡蘿卜素樣品通過紙層析法進行鑒定的結(jié)果，從圖1中分析可知，層析帶______(填“Ⅰ”“Ⅱ”或“Ⅲ”)對應(yīng)β胡蘿卜素。出現(xiàn)樣品2的結(jié)果的原因可能是在操作過程中________(填編號，多選)。 ①萃取溫度高，時間長　②干燥溫度高，時間長?、畚唇?jīng)濃縮蒸餾?、茳c樣太快，樣點小 (4)茶油是從油茶籽中提取出來的，相關(guān)流程如圖2所示： 圖2中的A應(yīng)為________，和橘皮精油一樣，在提取之前需用________浸泡，以防止壓榨時滑脫，提高出油率。 解析：(1)酵母菌是真核生物，醋酸菌是原核生物，與醋酸菌相比，酵母菌在結(jié)構(gòu)上最主要的特點是具有由核膜包被的細胞核。接種活菌前，將紅茶糖水煮沸的目的是消滅雜菌、除去氧氣。(2)通常采用萃取法從胡蘿卜中提取胡蘿卜素。提取后常用紙層析法對提取的胡蘿卜素進行鑒定。萃取胡蘿卜素的有機溶劑應(yīng)能充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶，故應(yīng)選擇乙酸乙酯作為萃取劑。(3)分析圖1可知，層析帶Ⅰ對應(yīng)β胡蘿卜素；樣品2中的色素偏少，出現(xiàn)該結(jié)果的可能原因是在操作過程中干燥溫度高、時間長或未經(jīng)濃縮蒸餾。(4)從流程圖可知，茶油是采用壓榨法提取的，故A為壓榨，為了防止壓榨時滑脫并提高出油率，通常在壓榨之前用石灰水浸泡。 答案：(1)具有由核膜包被的細胞核　滅菌除氧　 (2)萃取　胡蘿卜素易溶于有機溶劑　乙酸乙酯　 (3)Ⅰ?、冖邸?4)壓榨　石灰水 [課堂強化訓(xùn)練]　 　 　　　　　　　　　 　　　　　　 　　　　　　　　　　 　 1．(2018長沙模擬)大腸桿菌是寄生于人和動物腸道中的細菌，其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍反應(yīng)，使菌落呈黑色。下面是其培養(yǎng)基配方： 成分 蛋白胨 乳糖 磷酸二氫鉀 瓊脂 蒸餾水 2%伊紅 水溶液 0.5%美藍 水溶液 含量 10 g 10 g 2 g 20～30 g 1 000 mL 20 mL 13 mL 回答下列問題： (1)該培養(yǎng)基中，蛋白胨為大腸桿菌提供的主要營養(yǎng)有________________和維生素。從物理性質(zhì)來看，該培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基。 (2)對該培養(yǎng)基進行滅菌時，可采用_____________法。在接種大腸桿菌前，需先將滅菌后的空白培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成，其目的是 ________________________________________________________________________。 (3)為檢測嚴重污染水體中大腸桿菌數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中，應(yīng)選擇顏色為_____________的菌落進行計數(shù)。該方法是通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)，其原理是________________________________________________。 解析：(1)該培養(yǎng)基中，蛋白胨為大腸桿菌提供的主要營養(yǎng)有碳源、氮源和維生素。從物理性質(zhì)來看，該培養(yǎng)基加入了瓊脂作為凝固劑，因此屬于固體培養(yǎng)基。(2)對該培養(yǎng)基進行滅菌時，可采用高壓蒸汽滅菌法。在接種大腸桿菌前，需先將滅菌后的空白培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成，其目的是檢測培養(yǎng)基制備是否合格(滅菌是否徹底)。(3)大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍反應(yīng)，使菌落呈黑色。為檢測嚴重污染水體中大腸桿菌數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中，應(yīng)選擇顏色為黑色的菌落進行計數(shù)。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)的原理是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。 答案：(1)碳源、氮源　固體　(2)高壓蒸汽滅菌　檢測培養(yǎng)基制備是否合格(滅菌是否徹底)　(3)黑色　當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌 2．(2018泰州二模)圖1表示研究人員為篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株進行的相關(guān)實驗流程。其中透明圈是微生物在固體培養(yǎng)基上消耗特定營養(yǎng)物質(zhì)形成的。請回答下列問題： (1)本實驗中，選擇蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源，這是因為________________________________________________。 (2)篩選用的培養(yǎng)基應(yīng)以__________作為唯一碳源，并在配制培養(yǎng)基時加入__________作為凝固劑，篩選時應(yīng)選擇D/d較大的菌株，因為這一指標值越大說明____________________________。 (3)圖2、圖3是研究纖維素酶的最適宜溫度和熱穩(wěn)定性的結(jié)果。 ①研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時，首先將纖維素酶液置于35～65 ℃的不同溫度條件下保溫2 h，再取上述不同溫度處理的纖維素酶液和__________________________，并在________ ℃下測定纖維素酶的催化速率，計算酶活性殘留率。 ②生產(chǎn)中使用該纖維素酶時，最好將溫度控制在40 ℃左右，依據(jù)是______________________________________________________________________。 解析：(1)由于蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)中富含纖維素，會聚集較多的纖維素分解菌，故選擇蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源。(2)篩選用的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素作為唯一碳源，并在配制培養(yǎng)基時加入瓊脂作為凝固劑，篩選時應(yīng)選擇透明圈直徑與菌落直徑比值較大的菌株，因為這一指標值越大，說明單個菌體產(chǎn)生的纖維素酶的活性越強。(3)①研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時，首先將纖維素酶液置于35～65 ℃的不同溫度條件下保溫2 h，再取上述不同溫度處理的纖維素酶液和未經(jīng)保溫處理的纖維素酶液，并在50 ℃下測定纖維素酶的催化速率，計算酶活性殘留率。②由圖可知：40 ℃時，纖維素酶的熱穩(wěn)定性高，作用時間持久，且酶活性相對較高，故生產(chǎn)中使用該纖維素酶時，最好將溫度控制在40 ℃左右。 答案：(1)蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)中富含纖維素，會聚集較多的纖維素分解菌　(2)纖維素　瓊脂　單個菌體產(chǎn)生的纖維素酶的活性越強　(3)①未經(jīng)保溫處理的纖維素酶液　50?、谠摐囟认?，纖維素酶的熱穩(wěn)定性高，作用時間持久，且酶活性相對較高 3．(2018瀘州模擬)請回答下列有關(guān)釀酒的問題： (1)釀酒過程中需要用到酵母菌，其異化作用類型是______________，其細胞內(nèi)將葡萄糖分解為酒精的酶存在于______________。 (2)某同學(xué)嘗試用新鮮葡萄制作葡萄酒，發(fā)酵過程擰松瓶蓋的目的是__________________。發(fā)酵后期擰松瓶蓋的間隔時間可延長，原因是______________________________________。 (3)過去啤酒生產(chǎn)都以大麥芽為原料，借用大麥發(fā)芽后產(chǎn)生的淀粉酶，使淀粉分解?，F(xiàn)在我們將________應(yīng)用于啤酒生產(chǎn)中，可以在種子不發(fā)芽的情況下誘導(dǎo)淀粉酶的合成。這樣做的好處是________________________。 (4)為研究發(fā)酵罐中釀酒酵母菌的生長情況，常要取樣統(tǒng)計分析，并測定pH。若某研究人員將樣品的次序搞亂了，那么判斷取樣順序的主要依據(jù)是________________(填“酵母菌的數(shù)量”或“發(fā)酵液的pH”)。 解析：(1)釀酒過程中需要用到酵母菌，酵母菌既能進行有氧呼吸，又能進行無氧呼吸，其異化作用類型是兼性厭氧型；無氧呼吸過程中，酵母菌將葡萄糖分解為酒精和二氧化碳，催化該過程的酶存在于細胞質(zhì)基質(zhì)中。(2)某同學(xué)嘗試用新鮮葡萄制作葡萄酒，發(fā)酵過程中擰松瓶蓋的目的是釋放二氧化碳。發(fā)酵后期，瓶內(nèi)的有機物減少，酒精發(fā)酵產(chǎn)生的二氧化碳減少，因此發(fā)酵后期擰松瓶蓋的間隔時間可延長。(3)赤霉素能夠促進種子的萌發(fā)，因此可以將赤霉素應(yīng)用于啤酒生產(chǎn)中，可以在種子不發(fā)芽的情況下誘導(dǎo)淀粉酶的合成。這樣做可以避免大麥因發(fā)芽而消耗大量養(yǎng)分。(4)為研究發(fā)酵罐中釀酒酵母菌的生長情況，常要取樣統(tǒng)計分析，并測定pH。在發(fā)酵過程中，產(chǎn)生的二氧化碳會導(dǎo)致pH下降，因此將樣品的次序搞亂后，可以根據(jù)發(fā)酵液的pH判斷取樣順序。 答案：(1)兼性厭氧型　細胞質(zhì)基質(zhì)　(2)釋放二氧化碳　發(fā)酵后期，瓶內(nèi)的有機物減少，酒精發(fā)酵產(chǎn)生的二氧化碳減少　(3)赤霉素　避免大麥因發(fā)芽而消耗大量養(yǎng)分 (4)發(fā)酵液的pH 4．(2018汕頭二模)回答下列與芳香油提取相關(guān)的問題： (1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有__________________________________________的性質(zhì)。蒸餾時收集的蒸餾液不是純的玫瑰精油，原因是____________________________。 (2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料一定時，蒸餾過程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和____________。當(dāng)原料量等其他條件一定時，提取量與蒸餾時間的變化趨勢是________________________。 (3)當(dāng)水蒸氣蒸餾后，能收集到乳白色的油水混合物。向油水混合物中加入NaCl，作用是__________________。分離出油層，一般可加入一些____________，以吸收油層中的水分。 (4)如果蒸餾過程中不進行冷卻，則精油提取量會________。 解析：(1)玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機溶劑，具有揮發(fā)性，常采用水蒸氣蒸餾法提取玫瑰精油。蒸餾時玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來，所得到的蒸餾液是油水混合物。(2)提取玫瑰精油時，影響提取量的主要因素是蒸餾時間和蒸餾溫度。當(dāng)原料量等其他條件一定時，提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是在一定的時間內(nèi)提取量隨蒸餾時間的延長而增加，一定時間后因玫瑰精油已經(jīng)全部被蒸餾提取完而使得提取量不再增加。(3)在提取過程中加入NaCl，可以增加水層的比重，使油水分層；分離出油層，一般可加入一些無水Na2SO4，以吸收油層中的水分。(4)玫瑰精油易揮發(fā)，如果蒸餾過程中不進行冷卻，則部分精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失，使提取量下降。 答案：(1)易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、易溶于有機溶劑　玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來　(2)蒸餾溫度　先增加后保持不變　(3)促進油水分層　無水Na2SO4　(4)下降 [課后檢測增分強訓(xùn)] 1.(1)如圖是利用____________法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面得到的結(jié)果。 (2)分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、KCl、MgSO47H2O、H2O。若此培養(yǎng)基用于篩選分解尿素的細菌，則應(yīng)除去上述_______成分，并加入_______和葡萄糖，以補充______________源。 (3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和________，以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通常采用________法，在鑒定過程中需要用____________作為對照。 (4)橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生____________問題，所以一般采用壓榨法。 解析：(1)據(jù)圖分析，圖示接種方法為平板劃線法，平板劃線操作就是將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。(2)題干所給的培養(yǎng)基配方中缺少碳源，氮源是NaNO3，若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細菌，則應(yīng)該使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，同時尿素分解菌屬于異養(yǎng)型生物，需加入葡萄糖作為碳源。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和干燥，以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通常采用紙層析法，在鑒定過程中需要用標準樣品作為對照。(4)橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生原料焦糊問題，所以一般采用壓榨法。 答案：(1)平板劃線　(2)NaNO3　尿素　碳源和氮源　(3)干燥　紙層析　標準樣品　(4)原料焦糊 2．(2018珠海一模)地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸，其中40%～60%被土壤中的某些微生物分解利用，這是因為它們能夠產(chǎn)生纖維素酶，某研究小組欲從土壤中分離得到纖維素分解菌，其操作流程如下所示，請回答相關(guān)問題。 ①土壤取樣→②選擇培養(yǎng)→③梯度稀釋→④鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)→⑤挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 (1)研究小組將濾紙埋在土壤里，30天后再從已經(jīng)腐爛的濾紙上提取土樣篩選纖維素分解菌。請說說這么做的道理是什么？___________________________________________。 (2)上述流程②成功的關(guān)鍵，是選擇培養(yǎng)基的配方中要以________為唯一碳源。流程④→⑤常用________染色法，④→⑤過程利用染色法能夠挑選出纖維素分解菌的原因是________________________________________________________________________。 (3)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，無菌技術(shù)就是圍繞如何避免雜菌的污染展開的。請列舉幾項該研究小組應(yīng)該實施的無菌操作(如實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行)________________________________________________________________(答出兩點即可)。為了證明培養(yǎng)基是否受到外來雜菌污染。需要設(shè)置空白對照，對照培養(yǎng)基的處理是__________________________________________________。 (4)若用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計纖維素分解菌落的數(shù)量，發(fā)現(xiàn)測定的結(jié)果往往比實際活菌數(shù)量要少，原因是____________________________________________________。 解析：(1)濾紙富含纖維素，能使纖維素分解菌相對聚集，故研究小組將濾紙埋在土壤里，30天后再從已經(jīng)腐爛的濾紙上提取土樣能篩選出纖維素分解菌。(2)要篩選出纖維素分解菌，在培養(yǎng)基中應(yīng)該加入纖維素作為唯一的碳源，流程④→⑤常用剛果紅染色法，④→⑤過程利用染色法能夠挑選出纖維素分解菌的原因是剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌分泌的纖維素酶可以分解纖維素，使培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，通過透明圈即可挑選纖維素分解菌。(3)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，無菌技術(shù)是實驗成敗的關(guān)鍵，如對實驗操作空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒，對實驗器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。為了證明培養(yǎng)基是否受到外來雜菌污染。需要設(shè)置空白對照，對照培養(yǎng)基的處理是接種等量的無菌水，置于實驗組相同的環(huán)境條件下培養(yǎng)。(4)當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計纖維素分解菌落的數(shù)量，測定的結(jié)果往往比實際活菌數(shù)量要少。 答案：(1)濾紙富含纖維素，能使纖維素分解菌相對聚集(或人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境)　(2)纖維素　剛果紅　剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌分泌的纖維素酶可以分解纖維素，使培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，通過透明圈即可挑選纖維素分解菌　(3)對實驗操作空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒，對實驗器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌　接種等量的無菌水，置于與實驗組相同的環(huán)境條件下培養(yǎng)　(4)當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 3．根據(jù)生物技術(shù)實踐的有關(guān)知識，回答下列問題： (1)從土壤中分離能分解尿素的細菌時，所用的選擇培養(yǎng)基應(yīng)以________為唯一氮源。分解尿素的細菌由于含有脲酶，可將________________而使周圍環(huán)境的pH上升，在選擇培養(yǎng)基中加入________指示劑，對其進行分離、鑒別。 (2)由果酒制作轉(zhuǎn)為果醋制作時，需要調(diào)整的溫度范圍是________________________。在制作腐乳的過程中，加鹽和加酒都能夠抑制________________。 (3)玫瑰精油是制作高級香水的主要成分，其適合用水蒸氣蒸餾法提取，理由是玫瑰精油具有____________________________的性質(zhì)。當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時，蒸餾過程中影響玫瑰精油提取量的主要因素有蒸餾時間和____________。如果蒸餾過程中不進行冷卻，則玫瑰精油提取量會下降，原因是____________________________。 (4)DNA在濃度為__________ mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。使用體積分數(shù)為95%的冷卻酒精可使DNA________(填“析出”或“溶解”)。 解析：(1)從土壤中分離分解尿素的細菌時，應(yīng)該選用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。尿素分解菌合成的脲酶，將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，pH升高，導(dǎo)致酚紅指示劑變成紅色。(2)酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18～25 ℃，醋酸發(fā)酵時一般將溫度控制在30～35 ℃。在制作腐乳過程中，加鹽的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，同時抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)；加酒的目的是抑制微生物的生長，同時使腐乳具有獨特的香味。(3)玫瑰精油具有易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定等性質(zhì)，故適合用水蒸氣蒸餾法提取。蒸餾時許多因素都會影響產(chǎn)品的品質(zhì)，如蒸餾溫度、蒸餾時間等。蒸餾過程中要進行冷卻，讓混合物重新分出油層和水層，若不冷卻則會有部分玫瑰精油隨水蒸氣揮發(fā)而流失，使玫瑰精油提取量下降。(4)DNA在濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。使用體積分數(shù)為95%的冷卻酒精可使DNA析出。 答案：(1)尿素　尿素分解成氨　酚紅　(2)由18～25 ℃調(diào)整為30～35 ℃　微生物的生長　(3)易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定　蒸餾溫度　部分玫瑰精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失　(4)0.14　析出 4．葡萄種植基地為解決葡萄滯銷易腐爛問題，引進果酒、果醋生產(chǎn)線進行葡萄的深加工，獲得了較好效益。其生產(chǎn)流程如圖所示，據(jù)圖回答： (1)在篩選菌種A時，需要在接種前用________________法對葡萄果汁進行滅菌。對于需要長期保存的菌種，可以采用______________的方法。 (2)在純化菌種A時接種了5個平板，每個平板均接種了0.1 mL樣品并培養(yǎng)。其中乙平板的菌落分布如圖，純化菌種A的接種方法是________________，推測出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻。其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落數(shù)分別是180、220、480、200，則樣品中菌種A的數(shù)量為________個/mL，用該方法統(tǒng)計的結(jié)果，一般________(填“低于”或“高于”)實際值。 解析：(1)葡萄果汁作為篩選菌種A時的培養(yǎng)基，需要在接種前用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏法。(2)分析圖中乙平板的菌落分布特點，可以推知采用的純化方法是稀釋涂布平板法；根據(jù)題意，樣品中菌種A的數(shù)量為(180＋220＋200)30.1＝2 000(個/mL)；由于稀釋涂布平板法的個別菌落可能來自兩個或多個細胞，所以用該方法統(tǒng)計的結(jié)果，一般低于實際值。 答案：(1)高壓蒸汽滅菌　甘油管藏　 (2)稀釋涂布平板法　2 000　低于 5．青蒿素是從黃花蒿的莖葉中提取的無色針狀晶體，易溶于有機溶劑，不溶于水，不易揮發(fā)。請回答以下問題： (1)從黃花蒿中提取青蒿素時，應(yīng)采用___________法，所選用的有機溶劑為____________(填“乙醇”或“乙酸乙酯”)，通常在提取前將黃花蒿莖葉進行粉碎和______，以提高效率。提取過程中宜采用_________加熱以防止燃燒、爆炸，加熱時瓶口要安裝________________裝置，所得液體濃縮前進行_______________。 (2)玫瑰精油是從玫瑰花中提取的，其原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合的乳濁液呈_________色，此時向乳濁液中加入氯化鈉，就會出現(xiàn)明顯的分層現(xiàn)象，可用分液漏斗將其分開，然后再加入_______________，經(jīng)過濾可得到純精油。 解析：(1)根據(jù)題干信息“青蒿素易溶于有機溶劑、不溶于水、不易揮發(fā)”，所以應(yīng)采用萃取法從黃花蒿中提取青蒿素。乙醇是水溶性有機溶劑，萃取中能與水混溶而影響萃取效果，所以乙醇不能用于青蒿素的萃??；乙酸乙酯不與水混溶，沸點高，因此可用于青蒿素的萃取。通常在提取前將黃花蒿莖葉進行粉碎和干燥，以提高效率。提取過程中宜采用水浴加熱以防