2018-2019學(xué)年高中生物 專題5 課題1 DNA的粗提取與鑒定教學(xué)案（含解析）新人教版選修1 .doc

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DNA的粗提取與鑒定1.DNA在0.14 mol/ L NaCl溶液中溶解度最低。2DNA不溶于酒精，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可利用酒精將DNA和蛋白質(zhì)分開(kāi)。3DNA對(duì)蛋白酶、高溫和洗滌劑有耐受性。4在加熱條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。5哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞不含細(xì)胞核，不能作為提取DNA的實(shí)驗(yàn)材料。若選取肝臟細(xì)胞或植物細(xì)胞，則必須充分研磨。6雞血中加入檸檬酸鈉可防止血液凝固。7用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩且沿同一個(gè)方向進(jìn)行，以免加劇DNA分子的斷裂。一、實(shí)驗(yàn)原理1提取思路：利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。2提取原理(1)DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離的目的。DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則可溶于其中。(2)DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但對(duì)DNA沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080 的高溫，發(fā)生變性，而DNA在80_以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒(méi)有影響。3鑒定原理：DNA二苯胺沸水浴,藍(lán)色。二、實(shí)驗(yàn)操作1實(shí)驗(yàn)材料的選取選用DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功的可能性更大。2破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液(1)動(dòng)物細(xì)胞的破碎(以雞血為例)：在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可。(2)植物細(xì)胞的破碎(以洋蔥為例)：先將洋蔥切碎，然后加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分地?cái)嚢韬脱心ィ^(guò)濾后收集研磨液。3去除濾液中的雜質(zhì)(1)方案一：通過(guò)控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)。(2)方案二：直接在濾液中加入嫩肉粉，反應(yīng)1015 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)。(3)方案三：將濾液放在6075_的恒溫水浴箱中保溫1015 min，使蛋白質(zhì)變性而與DNA分離。4DNA的析出在濾液中加入與濾液體積相等的、冷卻的酒精溶液，靜置23 min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物。5DNA的鑒定將呈白色絲狀的DNA溶解于5 mL物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中，再加入4 mL的二苯胺試劑，沸水中加熱5 min，冷卻后觀察溶液的顏色，注意要同時(shí)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)。三、操作提示1以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，每100 mL血液中需要加入3 g 檸檬酸鈉，防止血液凝固。2加入洗滌劑后，動(dòng)作要輕緩、柔和，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇DNA分子的斷裂，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。3鑒定DNA用的二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，否則會(huì)影響鑒定的效果。1下圖中能反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關(guān)系的是()解析：選CDNA在NaCl溶液中的溶解度隨著NaCl溶液濃度的變化而變化，在NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時(shí)DNA溶解度最小。2.在DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，除去雜質(zhì)時(shí)將濾液放在6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min的目的是()A使DNA變性B使蛋白質(zhì)變性C使DNA和蛋白質(zhì)變性 D分解蛋白質(zhì)解析：選B大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080 的高溫，而DNA在80 以上才會(huì)變性。在6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min，目的是使蛋白質(zhì)變性，然后分離得到DNA。3在制備雞血細(xì)胞液的過(guò)程中，加入檸檬酸鈉的目的是()A防止凝血 B加快DNA析出C加快DNA溶解 D加速凝血解析：選A檸檬酸鈉是抗凝血物質(zhì)，防止凝血，有利于雞血細(xì)胞液的制備。1DNA與蛋白質(zhì)在NaCl溶液中的溶解度項(xiàng)目溶解規(guī)律2 mol/L的NaCl溶液0.14 mol/L的NaCl溶液DNA溶解析出蛋白質(zhì)部分發(fā)生鹽析沉淀溶解總結(jié)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同；選擇適當(dāng)?shù)柠}溶液就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的名師點(diǎn)撥高溫和鹽溶液對(duì)DNA和蛋白質(zhì)的影響不同(1)鹽析過(guò)程中DNA的空間結(jié)構(gòu)不變，沒(méi)有變性，只是溶解度在不同鹽濃度下不同，因此改變鹽濃度，可重新使DNA溶解。(2)高溫使DNA和蛋白質(zhì)變性時(shí)破壞的鍵不同。DNA變性時(shí)，氫鍵被破壞；降溫時(shí)DNA能復(fù)性，是可逆過(guò)程。而蛋白質(zhì)變性時(shí)往往是二硫鍵被破壞，因此蛋白質(zhì)變性是不可逆的。2DNA提取與鑒定的原理和方法基本原理方法目的DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同溶于NaCl溶液中并稀釋NaCl溶液為2 mol/L時(shí)，DNA溶解，而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析生成沉淀，通過(guò)過(guò)濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于NaCl溶液的雜質(zhì)；當(dāng)NaCl溶液稀釋至0.14 mol/L時(shí)，DNA析出，過(guò)濾可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，分解蛋白質(zhì)DNA不溶于酒精溶液加入冷卻酒精(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)DNA可被二苯胺染成藍(lán)色加入二苯胺，并沸水浴加熱鑒定DNA題組沖關(guān)1在“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)原理是DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同。DNA的溶解和析出與圖中所示曲線的對(duì)應(yīng)點(diǎn)符合的是()Aa點(diǎn)濃度最適合析出DNABb點(diǎn)濃度最適合析出DNACc點(diǎn)濃度最適合溶解DNADd點(diǎn)濃度最適合析出DNA解析：選B用高濃度的NaCl溶液溶解DNA，能除去在高鹽溶液中不能溶解的雜質(zhì)，用低濃度的NaCl溶液使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)，因此，反復(fù)溶解、析出DNA能除去與DNA溶解度不同的雜質(zhì)。從題圖可以看出，DNA在濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中(b點(diǎn))的溶解度最小，因此最適合析出DNA，但是隨著NaCl溶液濃度的增大或減小，溶解度均逐漸增大。2下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)原理的敘述，正確的是()ADNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的升高而減小B利用DNA不溶于酒精的性質(zhì)，可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNACDNA是大分子有機(jī)物，易溶于水也溶于某些有機(jī)溶劑D在沸水浴中，DNA遇二苯胺會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)解析：選B隨NaCl溶液濃度的升高，DNA的溶解度先降低后增大。DNA不溶于酒精等有機(jī)溶劑。在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺后呈現(xiàn)藍(lán)色。1實(shí)驗(yàn)材料的選取不同生物組織中DNA的含量不同，在選取材料時(shí)，應(yīng)依據(jù)“DNA含量高、材料易得、便于提取”的原則，如雞血、菜花、洋蔥等。若選取雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，可在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，使血細(xì)胞吸水破裂，釋放核物質(zhì)，過(guò)濾后收集濾液。若選取植物細(xì)胞，應(yīng)加入一定量的洗滌劑和食鹽，并進(jìn)行充分地?cái)嚢韬脱心?，過(guò)濾后收集研磨液。2提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟步驟實(shí)驗(yàn)操作目的制備雞血細(xì)胞液每100 mL血液中加入3 g檸檬酸鈉，然后靜置或離心，除去上清液防止血液凝固，使血細(xì)胞與血漿分離提取細(xì)胞核物質(zhì)在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，并充分?jǐn)嚢瑁^(guò)濾后收集濾液使細(xì)胞因過(guò)度吸水而破裂，釋放核物質(zhì)溶解DNA向上述濾液中加入NaCl，使NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為2 mol/L，并用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，然后過(guò)濾溶解DNA，過(guò)濾除去不溶的雜質(zhì)析出DNA向上述濾液中緩緩加入蒸餾水并輕輕攪拌，至白色絲狀黏稠物不再增加時(shí)停止加水，然后用多層紗布過(guò)濾使NaCl溶液的濃度降至0.14 mol/L，析出DNA，過(guò)濾除去溶于該濃度的NaCl溶液的雜質(zhì)DNA的再溶解將紗布上的黏稠物放入2 mol/L的NaCl溶液中，攪拌至完全溶解，然后過(guò)濾溶解DNA，過(guò)濾除去雜質(zhì)提取較純凈的DNA向上述濾液中加入等體積的體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精溶液，待出現(xiàn)絲狀物時(shí)用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，將絲狀物卷起除去溶于酒精的雜質(zhì)，獲得較純凈的DNA3DNA的鑒定試管序號(hào)AB1加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL2加DNA絲狀物溶解3加4 mL二苯胺混勻4沸水浴5 min實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象變藍(lán)不變色實(shí)驗(yàn)結(jié)論DNA在沸水浴條件下，遇二苯胺會(huì)變成藍(lán)色4實(shí)驗(yàn)操作分析(1)實(shí)驗(yàn)中有2次加入蒸餾水，第一次加入的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破，第二次加入的目的是稀釋NaCl溶液至0.14 mol/L，從而析出DNA。(2)實(shí)驗(yàn)中有3次加入NaCl，作用均為溶解DNA。(3)實(shí)驗(yàn)中有4次過(guò)濾：第一次過(guò)濾第二次過(guò)濾第三次過(guò)濾第四次過(guò)濾濾液中含DNA的核物質(zhì)DNA溶于0.14 mol/L NaCl溶液的雜質(zhì)DNA紗布上細(xì)胞膜、核膜等殘片不溶于2 mol/L NaCl溶液的雜質(zhì)DNA不溶于2 mol/L NaCl溶液的雜質(zhì)過(guò)濾前加入的物質(zhì)蒸餾水NaCl溶液蒸餾水NaCl溶液過(guò)濾目的去除細(xì)胞膜、核膜等雜質(zhì)去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的雜質(zhì)去除溶于0.14 mol/L NaCl溶液的雜質(zhì)去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的雜質(zhì)名師點(diǎn)撥DNA的粗提取與鑒定中的注意事項(xiàng)(1)過(guò)濾含DNA的黏稠物時(shí)不能用濾紙代替紗布，否則會(huì)因DNA被吸附到濾紙上，而導(dǎo)致DNA大量損失。(2)用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要緩慢且沿同一方向進(jìn)行，目的是防止DNA被破壞。(3)盛放雞血細(xì)胞液的容器最好是塑料器具，因?yàn)镈NA易被玻璃制品吸附，影響最終的DNA提取量。最后提取DNA用于鑒定時(shí)，可用玻璃棒將DNA卷出。(4)二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，否則二苯胺會(huì)變成淺藍(lán)色，影響鑒定效果。(5)鑒定DNA還可使用甲基綠染液，甲基綠染液可將DNA染成綠色。題組沖關(guān)3在“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中，操作正確的是()A取制備好的雞血細(xì)胞液510 mL注入燒杯中，迅速加入濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液20 mL，同時(shí)用玻璃棒沿同一方向快速攪拌5 min，可使雞血細(xì)胞破裂，釋放出DNAB整個(gè)DNA提取過(guò)程中，兩次加蒸餾水的目的都是為了降低溶液中NaCl的濃度，使DNA分子的溶解度達(dá)到最低，析出DNA分子C整個(gè)DNA提取操作中，兩次加入2 mol/L的NaCl溶液，目的都是使DNA盡可能多地溶解在NaCl溶液中DDNA鑒定操作中，只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺試劑，即可出現(xiàn)藍(lán)色解析：選C取制備好的雞血細(xì)胞液注入燒杯中，迅速加入蒸餾水并用玻璃棒沿同一方向攪拌，使雞血細(xì)胞破裂，將DNA釋放出來(lái)。整個(gè)DNA提取過(guò)程中，兩次使用蒸餾水，第一次是使雞血細(xì)胞吸水漲破，釋放DNA；第二次是用來(lái)稀釋NaCl溶液，使DNA析出。在DNA鑒定操作中，DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色需在沸水浴條件下完成。4如圖為“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)裝置，請(qǐng)回答問(wèn)題：(1)本實(shí)驗(yàn)材料選用雞血細(xì)胞液，而不是雞全血，主要原因是雞血細(xì)胞液中_含量較高。(2)圖A中加入蒸餾水的目的是_。(3)通過(guò)圖B所示步驟取得濾液后，再向?yàn)V液中加入NaCl，使NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的目的是_。(4)圖C所示加入蒸餾水的目的是_。(5)為鑒定實(shí)驗(yàn)所得絲狀物的主要成分是DNA，可用_試劑進(jìn)行檢測(cè)，在沸水浴條件下，可以看到顏色反應(yīng)呈_色。解析：(1)雞血細(xì)胞核內(nèi)DNA含量豐富，材料易得；雞全血包括血漿，而雞血細(xì)胞液為雞全血除去血漿后剩下的部分，其中DNA含量更高，更易提取。(2)如圖A所示，向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水，細(xì)胞會(huì)因吸水漲破而釋放出核物質(zhì)DNA。(3)如圖B所示，向?yàn)V液中加入物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液后，DNA溶解而蛋白質(zhì)析出。(4)如圖C所示，向DNA濃鹽溶液中加入蒸餾水，使NaCl溶液濃度降低，從而使DNA溶解度降低而析出。(5)在沸水浴條件下，DNA與二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色。答案：(1)DNA(2)使血細(xì)胞吸水漲破，釋放出核物質(zhì)DNA(3)使DNA溶解于NaCl溶液中(4)使DNA因溶解度下降而析出(5)二苯胺藍(lán)隨堂基礎(chǔ)鞏固1在混合物中提取DNA分子的基本思路是()A根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的差異B根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的共性C根據(jù)各種大分子在細(xì)胞內(nèi)的功能D根據(jù)各種大分子的結(jié)構(gòu)和在細(xì)胞內(nèi)的位置解析：選A提取生物大分子的基本思路是：選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。DNA分子的粗提取是利用DNA與蛋白質(zhì)等其他成分在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異進(jìn)行分離的。2下列不宜選作DNA粗提取材料的是()A洋蔥表皮細(xì)胞 B鮮豌豆種子C人成熟的紅細(xì)胞 D豬肝解析：選C用于DNA粗提取的材料應(yīng)具備的條件是細(xì)胞中要含有DNA，且DNA的含量要豐富，A、B、D三項(xiàng)都符合要求。人成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核，不含DNA，所以不宜選作實(shí)驗(yàn)材料。3向溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水，在這個(gè)過(guò)程中DNA和雜質(zhì)蛋白質(zhì)等的溶解度變化情況分別是()A減小、減小 B增大、增大C先減小后增大、增大 D減小、增大 解析：選CDNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最??；蛋白質(zhì)的溶解度隨NaCl溶液濃度的降低而逐漸增大。4(江蘇高考)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是()A酵母和菜花均可作為提取DNA的材料BDNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水C向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?，可?jiàn)玻棒上有白色絮狀物DDNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)解析：選C原則上含DNA的生物材料都可用來(lái)提取DNA，只是選用DNA含量高的生物組織，成功的可能性更大；DNA在2 mol/L NaCl溶液和蒸餾水中溶解度都較大；向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?，雞血細(xì)胞會(huì)吸水破裂，但在蒸餾水中不會(huì)析出DNA；DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱，待冷卻后溶液變藍(lán)。5在DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，若選擇的實(shí)驗(yàn)材料為植物細(xì)胞，破碎細(xì)胞時(shí)要加入一定量的洗滌劑和食鹽。加入洗滌劑和食鹽的目的分別是()利于DNA的溶解分離DNA和蛋白質(zhì)瓦解細(xì)胞膜溶解蛋白質(zhì)A BC D解析：選D食鹽的主要成分是NaCl，DNA在一定物質(zhì)的量濃度的NaCl溶液中易溶解，加入洗滌劑的目的是瓦解細(xì)胞膜。6在蛋白質(zhì)和DNA的混合液中，要想得到較純的DNA，可采用的方法有()向混合液中加入足量的蒸餾水向混合液中加入DNA水解酶向混合液中加入冷的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液向混合液中加入蛋白酶A BC D解析選BDNA分子在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，在冷的酒精溶液中可析出，據(jù)此可將DNA和蛋白質(zhì)分離；蛋白酶可將蛋白質(zhì)水解成可溶性的多肽，從而將蛋白質(zhì)與DNA分離。7如圖為DNA粗提取實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的一些重要步驟，據(jù)圖回答：(1)正確的操作順序是_。(2)圖中步驟C、E都加入蒸餾水，但加入的目的不同，分別是_和_。(3)圖中步驟A中所用的酒精必須經(jīng)過(guò)_才能使用，該步驟的目的是_。解析：DNA粗提取的過(guò)程：雞血細(xì)胞加蒸餾水,漲破后過(guò)濾用2 mol/L的NaCl溶液溶解過(guò)濾除去不溶雜質(zhì)加蒸餾水,析出含DNA的黏稠物過(guò)濾黏稠物溶解在2 mol/L的NaCl溶液中過(guò)濾95%的酒精中進(jìn)一步提純。根據(jù)圖示及以上分析，正確的操作順序?yàn)镃BEDA。答案：(1)CBEDA(2)加速血細(xì)胞的破裂降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出(3)充分預(yù)冷處理提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA課時(shí)跟蹤檢測(cè)一、選擇題1下列關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的相關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是()A可以選擇DNA含量較高的生物組織為材料，如雞的血細(xì)胞BDNA不溶于酒精，且在0.14 mol/L的氯化鈉溶液中析出C可以利用嫩肉粉把雜質(zhì)多糖和RNA去除D洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜，從而獲得含有DNA的濾液解析：選C雞血細(xì)胞中含有DNA，可作為提取DNA的生物材料，不可選用哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞；DNA不溶于酒精，且NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時(shí)DNA溶解度最小，兩者均可將DNA大量析出；嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，可將蛋白質(zhì)水解，從而除去蛋白質(zhì)；洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜，從而獲得含有DNA的濾液。2“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中，提取雞血細(xì)胞的核物質(zhì)和析出含DNA的黏稠物這兩步中都用到了蒸餾水，其作用分別是()A防止雞血細(xì)胞失水皺縮和稀釋NaCl溶液至0.14 mol/L使DNA析出B防止雞血細(xì)胞失水皺縮和溶解DNAC使雞血細(xì)胞吸水漲破和稀釋NaCl溶液至0.14 mol/L使DNA析出D使雞血細(xì)胞吸水漲破和溶解DNA解析：選C第一次加蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞漲破，釋放出核DNA，第二次加蒸餾水的目的是將NaCl溶液濃度降低到0.14 mol/L，使DNA析出。3某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，操作錯(cuò)誤的是()A加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分地研磨B用蛋白酶純化過(guò)濾后的研磨液中的DNAC加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱解析：選A加入洗滌劑后，攪拌動(dòng)作要輕緩、柔和，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作；用蛋白酶分解過(guò)濾后的研磨液中的蛋白質(zhì)，可純化過(guò)濾后研磨液中的DNA；加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌的目的是保證DNA分子不斷裂，保持其完整性；加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱才能出現(xiàn)顏色反應(yīng)。4若從植物細(xì)胞中提取DNA，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)效果不好，如看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定時(shí)顏色反應(yīng)不明顯等。其可能的原因是()植物細(xì)胞中不含DNA研磨不充分過(guò)濾不充分冷酒精的量過(guò)大A BC D解析：選D研磨不充分會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全，提取的DNA量變少；過(guò)濾不充分也會(huì)導(dǎo)致提取的DNA量過(guò)少；若用于沉淀DNA的酒精量過(guò)少，也會(huì)導(dǎo)致DNA的沉淀量少，從而影響實(shí)驗(yàn)效果。5在“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中，如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要進(jìn)行研磨并攪拌。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是()A在切碎的植物材料中加入一定量的洗滌劑和蒸餾水，充分研磨后過(guò)濾獲取濾液B加入洗滌劑是為了瓦解細(xì)胞膜和核膜C要快速攪拌產(chǎn)生泡沫以加速細(xì)胞膜的溶解D先加入洗滌劑，攪拌和研磨后再加入食鹽解析：選B提取植物材料中的DNA時(shí)，需在切碎的組織中加入一定量的洗滌劑和食鹽。加入洗滌劑的目的是瓦解細(xì)胞膜和核膜，以利于DNA的釋放，同時(shí)要進(jìn)行充分地?cái)嚢韬脱心?，使DNA完全釋放。攪拌時(shí)應(yīng)輕緩、柔和，避免產(chǎn)生大量泡沫，不利于后續(xù)操作。6下表是關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中所使用的材料、操作及其作用的表述，正確的是()選項(xiàng)試劑操作作用A檸檬酸鈉溶液與雞血混合有利于血液凝固B蒸餾水與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀C蒸餾水加入溶解有DNA的NaCl溶液中析出DNA絲狀物D冷卻的酒精加入過(guò)濾后的NaCl溶液中產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)解析：選C在DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，檸檬酸鈉可以防止血液凝固；雞血中加入蒸餾水可以使細(xì)胞膜和核膜破裂；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，有利于DNA析出；DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)溶于冷卻的酒精可以獲得較純的DNA，DNA遇二苯胺(沸水浴加熱)呈藍(lán)色。7DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中有以下過(guò)濾：過(guò)濾用蒸餾水稀釋過(guò)的雞血細(xì)胞液；過(guò)濾含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液；過(guò)濾溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液，以上過(guò)濾分別為了獲得()A含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液B含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、含DNA的濾液C含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、紗布上的DNAD含較純的DNA濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液解析：選A用蒸餾水稀釋雞血細(xì)胞液，使血細(xì)胞的細(xì)胞膜、核膜破裂，釋放出核物質(zhì)，此時(shí)過(guò)濾只能得到含DNA和其他物質(zhì)如蛋白質(zhì)的濾液，這種濾液必須經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)中其他步驟的相繼處理，方能得到較純的DNA。DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低，呈絲狀黏稠物，經(jīng)過(guò)濾留在紗布上。8下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是()A洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增大DNA在NaCl溶液中的溶解度B將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)C常溫下菜花勻漿中有些酶類會(huì)影響DNA的提取D用玻璃棒緩慢攪拌濾液會(huì)導(dǎo)致DNA獲得量減少解析：選C洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA在NaCl溶液中的溶解度無(wú)影響；DNA絲狀物需先溶解在適宜濃度的NaCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，混合均勻后沸水浴加熱，待冷卻后觀察到溶液變藍(lán)；常溫下菜花勻漿中有些水解酶可能會(huì)使DNA水解而影響DNA的提??；用玻璃棒朝一個(gè)方向緩慢攪拌可減輕對(duì)DNA分子的破壞，有利于DNA分子的提取。9下列與析出DNA黏稠物有關(guān)的敘述，錯(cuò)誤的是()A操作時(shí)緩緩滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度B在操作時(shí)，用玻璃棒輕緩攪拌，以保證DNA分子完整C加蒸餾水可同時(shí)降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度，兩者均可析出D當(dāng)絲狀黏稠物不再增加時(shí)，NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度約等于0.14 mol/L解析：選C向含有DNA的溶液中加入蒸餾水后，NaCl溶液的濃度會(huì)變小，當(dāng)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時(shí)，DNA溶解度最小，而此時(shí)蛋白質(zhì)溶解在NaCl溶液中。10在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)敘述正確的是()A用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L，濾去析出物B調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，可去除部分雜質(zhì)C將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色D用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同解析：選B用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L后，過(guò)濾并收集析出物；利用二苯胺試劑鑒定DNA時(shí)，需沸水浴加熱幾分鐘，才呈藍(lán)色；用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，需加入洗滌劑和食鹽，并對(duì)材料進(jìn)行研磨。調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度改變不同物質(zhì)在其中的溶解度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白質(zhì)都可以去除部分雜質(zhì)。二、非選擇題11如圖是“DNA粗提取與鑒定”相關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟。請(qǐng)據(jù)圖分析回答：(1)雞血細(xì)胞是進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)較好的實(shí)驗(yàn)材料，這是因?yàn)開(kāi)。從雞血細(xì)胞中釋放出核物質(zhì)的處理方法是_。(2)圖A表示釋放核物質(zhì)后進(jìn)行過(guò)濾的過(guò)程，過(guò)濾后取_(填“濾液”或“析出物”)進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)；圖B表示的相關(guān)操作過(guò)程中，加入2 mol/L NaCl溶液的作用是_；圖C表示在濾液中加入冷卻的95%的酒精，其目的是_。(3)為鑒定實(shí)驗(yàn)所得絲狀物的主要成分是DNA，可滴加_溶液，結(jié)果絲狀物被染成綠色。(4)圖D中a試管為對(duì)照組，b試管為實(shí)驗(yàn)組。a試管現(xiàn)象_；b試管現(xiàn)象_。在沸水中加熱的目的是_，同時(shí)說(shuō)明DNA對(duì)高溫有較強(qiáng)的_。a試管在實(shí)驗(yàn)中的作用是_。b試管中溶液顏色的變化程度主要與_有關(guān)。解析：圖A表示釋放核物質(zhì)后進(jìn)行過(guò)濾的過(guò)程，紗布上的過(guò)濾物主要是細(xì)胞膜、核膜的碎片等雜質(zhì)，而DNA主要存在于下面的濾液中，所以過(guò)濾后應(yīng)取濾液進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。DNA不溶于冷酒精，而其他一些物質(zhì)可以溶于冷酒精，從而可進(jìn)一步提純DNA。甲基綠為比較常用的細(xì)胞核染色劑，染色后細(xì)胞核中染色體呈綠色，可以用來(lái)鑒定DNA。答案：(1)雞血細(xì)胞核中DNA含量豐富，材料易得向雞血細(xì)胞溶液中加入蒸餾水，并攪拌(2)濾液溶解DNA分子提取雜質(zhì)更少的DNA(或去除脂溶性雜質(zhì))(3)甲基綠(4)溶液不變藍(lán)溶液變藍(lán)加快顏色反應(yīng)速度耐受性對(duì)照加入DNA(絲狀物)的多少12如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的相關(guān)操作。(1)圖中實(shí)驗(yàn)材料A可以是_等，研磨前加入的B應(yīng)該是_。(2)通過(guò)上述所示步驟得到濾液C后， 再向?yàn)V液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是_，再過(guò)濾得到濾液D，向?yàn)V液D中加入蒸餾水的目的是_。(3)在“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中，將含有一定雜質(zhì)的DNA絲狀物分別放入體積為2 mL的4種溶液中，經(jīng)攪拌后過(guò)濾，獲得下表所示的4種濾液，含DNA最少的是濾液_。1研磨液中攪拌研磨后過(guò)濾濾液E22 mol/L的NaCl溶液中攪拌后過(guò)濾濾液F30.14 mol/L的NaCl溶液中攪拌后過(guò)濾濾液G4冷卻的95%的酒精溶液中攪拌后過(guò)濾濾液H(4)DNA鑒定的原理是_。解析：選用洋蔥、菜花等植物材料提取DNA時(shí)，要在切碎的材料中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨；DNA在2 mol/L的NaCl溶液中溶解度較高，而在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小。向?yàn)V液中加入2 mol/L 的NaCl溶液可以使DNA溶解，過(guò)濾除去不溶的雜質(zhì)。向?yàn)V液中加入蒸餾水可降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出，除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)；DNA不溶于冷酒精，可利用這一原理進(jìn)一步提純DNA；鑒定DNA 的原理是在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。答案：(1)洋蔥、菜花洗滌劑和食鹽(2)使DNA溶解使DNA(溶解度下降而沉淀)析出(3)H(4)在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色13臨床上常利用血液中的DNA進(jìn)行身份鑒定、基因診斷等，但血液中DNA含量少、不易提取。為了從血液中獲取更多的DNA，科研人員以大鼠血液為材料，嘗試比較兩種提取DNA的方法，主要操作如下： 實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表中OD260反映溶液中核酸的濃度，OD280反映溶液中蛋白質(zhì)或氨基酸的濃度，理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8)：提取方法OD260OD280OD260/OD280DNA含量(g/mL血液)方法A0.3040.1881.6238方法B0.6120.4201.4676.5試回答下列問(wèn)題：(1)補(bǔ)全相關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟：_，_。(2)實(shí)驗(yàn)中利用異丙醇溶液純化DNA的原理是_。(3)與用雞血作實(shí)驗(yàn)材料相比，從哺乳動(dòng)物的血液中提取的DNA總是很少，這是因?yàn)開(kāi)。(4)兩種方法中，OD260/OD280均低于1.8，主要原因是_；其中方法A的OD260/OD280更接近1.8，原因是_。(5)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從人血液中提取DNA時(shí)應(yīng)優(yōu)先選擇方法_(填“A”或“B”)。解析：(1)DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度最大，應(yīng)取上清液；DNA不溶于酒精，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，為沉淀物。(2)實(shí)驗(yàn)中利用異丙醇溶液純化DNA的原理是DNA不溶于異丙醇，有些雜質(zhì)溶于異丙醇。(3)與用雞血作實(shí)驗(yàn)材料相比，從哺乳動(dòng)物的血液中提取的DNA總是很少，這是因?yàn)椴溉閯?dòng)物血液中紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核，只有白細(xì)胞內(nèi)有DNA。(4)兩種方法中OD260/OD280均低于1.8，主要原因是溶液中混有較多的蛋白質(zhì)；其中方法A的OD260/OD280更接近1.8，原因是蛋白酶K能催化部分蛋白質(zhì)的水解。(5)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，由于B方法獲得的DNA含量較多，故從人血液中提取DNA時(shí)應(yīng)優(yōu)先選擇方法B。答案：(1)上清液沉淀物(2)DNA不溶于異丙醇，而有些雜質(zhì)能溶解(3)哺乳動(dòng)物血液中只有白細(xì)胞內(nèi)有DNA(或哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核)(4)溶液中混有較多的蛋白質(zhì)蛋白酶K能催化部分蛋白質(zhì)的水解(5)B