生物產(chǎn)品降解表面活性劑功效評價技術(shù)規(guī)范征求意見稿.docx

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1ICS 07.080A 21中 華 人 民 共 和 國 國 家 標 準GB/T XXXXX—201X 生物產(chǎn)品降解表面活性劑功效評價技術(shù)規(guī)范Technical specifications for efficacy evaluation of surfactant degradation by biological product（征求意見稿）201X-XX-XX 發(fā)布 201X-XX-XX 實施中 華 人 民 共 和 國 國 家 質(zhì) 量 監(jiān) 督 檢 驗 檢 疫 總 局中 國 國 家 標 準 化 管 理 委 員 會 發(fā) 布GB/T ××××—201× 前言本標準按照 GB/T 1.1—2009 給出的規(guī)則起草。本標準由中國標準化研究院提出并歸口。本標準起草單位： 本標準主要起草人： GB/T ××××—201×1生物產(chǎn)品降解表面活性劑功效評價技術(shù)規(guī)范1 范圍本標準規(guī)定了生物產(chǎn)品降解表面活性劑效果評價試驗原理、儀器設(shè)備及器具、試劑與材料、試驗步驟、結(jié)果分析。本標準適用于微生物和酶生物產(chǎn)品降解表面活性劑效果評價。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 6682 分析實驗室用水GB/T 15818 表面活性劑生物降解度試驗方法3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1生物產(chǎn)品 biological products利用生物技術(shù)獲得的產(chǎn)品。3.2降解 degradation表面活性劑在一定條件下由生物產(chǎn)品引起的原始母體分子特性在一定程度上的消失。3.3降解率 degradation rate表面活性劑在一定條件下降解前后濃度的百分比。4 試驗原理一定條件下生物產(chǎn)品使表面活性劑發(fā)生降解后，顯色劑與剩余表面活性劑反應(yīng)生成有色物質(zhì)，利用分光光度計在一定波長下測定有色物質(zhì)吸光度值，其吸光度值與剩余表面活性劑濃度成正比，通過比較降解前后表面活性劑濃度變化，評價生物產(chǎn)品降解效果。5 儀器設(shè)備及器具GB/T ××××—201×25.1 電子天平：精度為 0.001 g 和 0.01 g。5.2 pH 計：精度為 0.01 pH 單位。5.3 微量移液器：10 μL～1000 μL。6 試劑與材料除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，實驗用水均為 GB/T 6882 規(guī)定的二級水。6.1 表面活性劑儲備溶液分別稱取表面活性劑標準品 1.000 g，用三氯甲烷溶解并定容至 100 mL 容量瓶中，配制成濃度為1 g/L 的儲備溶液，于冰箱冷凍室中保存。6.2 基礎(chǔ)營養(yǎng)基溶液按照 GB/T 15818 要求進行配置。7 試驗步驟7.1 試驗設(shè)計不同類型生物產(chǎn)品降解表面活性劑效果試驗設(shè)計應(yīng)符合表 1 要求。表 1 生物產(chǎn)品降解表面活性劑效果試驗設(shè)計產(chǎn)品種類項目微生物產(chǎn)品 酶產(chǎn)品處理設(shè)計1.供試樣品2.失活樣品3.空白對照表面活性劑選擇 陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、兩性離子表面活性劑、乙氧 基類表面活性劑、烷基糖苷類表面活性劑重復次數(shù) 不少于3次反應(yīng)條件 按正交試驗結(jié)果確定7.2 待測微生物試驗實施7.2.1 供試樣品處理固體產(chǎn)品應(yīng)進行研磨處理，制成粉末狀供試樣品。7.2.2 失活樣品處理取供試的固體或液體微生物樣品進行 121 oC，30 min 殺菌處理。7.2.3 最佳反應(yīng)體系確定250 ml 三角瓶中加入 100 ml 基礎(chǔ)營養(yǎng)基溶液，121 ℃， 20 min 滅菌，冷卻。設(shè)計正交實驗，按照供試樣品的影響因素宜選取反應(yīng)溫度、反應(yīng)轉(zhuǎn)速、底物濃度、反應(yīng)時間等，確定最佳反應(yīng)體系條件。GB/T ××××—201×37.2.4 降解處理試驗取250 mL三角瓶9個，空白樣3個，供試樣品瓶3個，失活樣品瓶3個。分別向9個瓶中加入100 mL基礎(chǔ)營養(yǎng)基溶液，進行滅菌處理后備用。按照最佳反應(yīng)體系條件進行降解試驗。7.3 待測酶試驗實施7.3.1 供試樣品處理固體產(chǎn)品應(yīng)用緩沖溶液溶解。7.3.2 失活樣品處理用緩沖溶液溶解后的固體樣品或液體酶樣品在 100 oC 環(huán)境下進行 15 min 去酶活處理。7.3.3 最佳反應(yīng)體系確定250 ml 三角瓶中加入 100 ml 緩沖溶液，設(shè)計正交實驗，影響因素宜選取酶量、底物濃度、pH 值、反應(yīng)時間等，確定最佳反應(yīng)體系條件。7.3.4 降解處理試驗取 250 mL 三角瓶 9 個，空白樣品瓶 3 個，供試樣品瓶 3 個，失活樣品瓶 3 個。分別向 9 個瓶中加入 100 mL 緩沖溶液。按照最佳反應(yīng)體系進行降解試驗。7.4 濃度測定根據(jù)表面活性劑的特性，分別按GB/T15818 附錄A、附錄B、附錄C 、附錄D 中的方法進行。8 結(jié)果分析8.1 結(jié)果計算降解率按照式（1）計算：…………………………（1）D=(??0-??1)?(??0-??2)?(??0???')??0 ×100%式中：D——底物的降解率（%） ；ρ0——為反應(yīng)開始時的起始底物濃度（ mg/L） ；ρ1——為供試樣品反應(yīng)后的殘留底物濃度（ mg/L） ；ρ2——為失活樣品反應(yīng)后的殘留底物濃度（ mg/L） ；GB/T ××××—201×4ρ′——為空白樣品反應(yīng)后的殘留底物濃度（mg/L） 。以平行樣的平均值為最終的降解率值，計算結(jié)果保留到小數(shù)點后兩位。8.2 結(jié)果判定以降解率的大小評價被測試生物產(chǎn)品的降解功效：降解率大于等于80%，小于100%時，降解效果為好；降解率大于等于60%，小于80%時，降解效果為良好；降解率大于等于40%，小于60%時，降解效果為較好；降解率大于等于20%，小于40%時，降解效果為一般；降解率小于20%時，降解效果為差。8.3 重復性在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的 10%。__________________________