2019高考生物一輪總復(fù)習(xí) 生物技術(shù)實踐 練案36 微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用 新人教版選修1 .doc

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練案[36]　微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用 一、選擇題 1．(2016海淀質(zhì)檢)通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌的生長；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出 (　A　) ①大腸桿菌?、诿咕、鄯啪€菌?、芄痰?xì)菌 A．④②③ B．①②③ C．①③④ D．只有③④ [解析]　缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長，而固氮細(xì)菌能生長；在培養(yǎng)基中加青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌等原核生物細(xì)胞壁的合成，而霉菌屬于真核生物，故能生長；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長，對放線菌的生長無影響。 2．(2016廣州質(zhì)檢)利用農(nóng)作物秸稈為原料可生產(chǎn)乙醇，生產(chǎn)過程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解，基主要技術(shù)流程如下圖所示，下列相關(guān)說法錯誤的是(　B　) 秸稈碎屑反應(yīng)罐水解壓濾出渣酒精發(fā)酵真空分餾 A．可用剛果紅染色法篩選過程①所需的纖維素分解菌 B．過程①加入的是葡萄糖苷酶 C．酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無氧條件下發(fā)酵 D．酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 [解析]　篩選纖維素分解菌可采用剛果紅染色法；纖維素酶為復(fù)合酶，至少包含三種組分，C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶；酒精發(fā)酵需在無氧條件下進(jìn)行；酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。 3．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說法，正確的是(　C　) A．天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基 B．接種前需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手等進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理 C．大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段 D．分離分解尿素的細(xì)菌時，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源 [解析]　天然培養(yǎng)基是指用天然物質(zhì)制成的培養(yǎng)基，但也需要加工；實驗操作者的雙手應(yīng)消毒，不能滅菌；分離分解尿素的細(xì)菌時，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源，不是碳源，需加入不含氮元素的有機(jī)物(如葡萄糖)作為碳源。 4．平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法，下列描述正確的是(　D　) A．都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 B．平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面 C．稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng) D．都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 [解析]　平板劃線法不需要進(jìn)行梯度稀釋；稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基的表面；平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。 5．做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時，下列敘述正確的是(　D　) A．高壓滅菌加熱結(jié)束時，立即開啟鍋蓋，拿出培養(yǎng)基和工具待用 B．倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 C．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落 D．用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時，應(yīng)標(biāo)記在皿底上 [解析]　高壓滅菌加熱結(jié)束，等待壓力表指針回到零后，才能開啟鍋蓋，不能打開放氣閥使壓力表指針回到零，A錯誤；倒平板過程中不能打開培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯誤；接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以快速挑取菌落，C錯誤；用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時，應(yīng)標(biāo)記在皿底上，D正確。 6．消毒和滅菌是兩個不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害。下列哪些事物適用于消毒處理(　A　) ①皮膚　 ②飲用水?、叟Ｄ獭、茏⑸淦鳌、菖囵B(yǎng)皿?、藿臃N環(huán)?、吲囵B(yǎng)基?、喙、後u油?、馐中g(shù)刀 A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②④⑤⑥⑧ D．以上全部 [解析]　消毒指用比較溫和的方法殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞，適用于那些不耐高溫的液體，如③牛奶、⑧果汁、⑨醬油，這樣可以使其中的營養(yǎng)成分不被破壞。 另外對要求不是很嚴(yán)格的①皮膚、②飲用水也用消毒的方法處理；而對于嚴(yán)格要求的④注射器、⑤培養(yǎng)皿、⑥接種環(huán)、⑦培養(yǎng)基、⑩手術(shù)刀等必須進(jìn)行滅菌處理。 所以，①②③⑧⑨立該用消毒的方法處理。 7．下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是(　D　) A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上 C．將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時 D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進(jìn)行計數(shù) [解析]　首先要進(jìn)行培養(yǎng)基的制備、用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，A正確；然后將土壤稀釋液涂布于各組平板上，B正確；將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時，C正確；確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)，D錯誤。 8．微生物培養(yǎng)過程中，要十分重視無菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實驗中的許多方面也要進(jìn)行無菌操作，防止雜菌污染，請分析下列操作，錯誤的是(　D　) ①煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢 ②接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行 ③無菌繁殖脫毒苗時，植物的外植體要進(jìn)行消毒 ④家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌 ⑤培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 ⑥加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌 A．①③ B．②④ C．③⑤ D．④⑥ [解析]　100℃煮沸5～6 min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢，①正確；酒精燈火焰附近存在一個無菌區(qū)，為了無菌操作，接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，②正確；無菌繁殖脫毒苗，植物的外植體要進(jìn)行消毒，③正確；葡萄制作葡萄酒利用的是附著于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒時葡萄不進(jìn)行滅菌，以免殺死酵母菌，④錯誤；培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，⑤正確；指示劑和染料混有微生物，故加入培養(yǎng)基前需滅菌，⑥錯誤。所以，④⑥錯誤。 二、填空題 9．(2016河南鄭州二模)某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL，再經(jīng)高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO47H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 瓊脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 1.0 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g (1)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？__不能__(填“能”或“不能”)，原因是__培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物(培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素)__。 (2)培養(yǎng)基用__高壓蒸汽滅菌__方法滅菌，培養(yǎng)皿用__干熱滅菌__方法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到__50__℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右時，在__酒精燈火焰__附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止__培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基__，以免造成污染。 (3)要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用__(稀釋)涂布平板__法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的__菌落數(shù)目__就能大約推測出樣品中活菌數(shù)。 (4)培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是__將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生__。 (5)某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為234，那么每克樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL)__2.34109__。 [解析]　(1)據(jù)表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，所以不能分離尿素分解菌，篩選尿素分解菌，應(yīng)以尿素為唯一氮源。(2)微生物培養(yǎng)中的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，玻璃器皿可以使用干熱滅菌。倒平板時需要培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時在酒精燈火焰旁進(jìn)行，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。(3)固體培養(yǎng)基上的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法適用于微生物的統(tǒng)計計數(shù)，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)目或平均菌落數(shù)能夠推測樣品中的活菌數(shù)。(4)檢測培養(yǎng)基是否被污染，需要將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，如果有菌落說明被污染，否則沒有被污染。(5)依據(jù)公式得每克樣品中菌落數(shù)＝M＝106＝2.34109。 10．如圖所示為分離分解纖維素的微生物的實驗流程?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題： →→梯度稀釋→→ (1)圖中采集土樣時，一般選擇__纖維素__豐富的環(huán)境。圖中②過程所用的培養(yǎng)基以纖維素為唯一__碳源__，選擇培養(yǎng)的目的是__使纖維素分解菌得到增殖__。 (2)圖中③過程采用的接種方法為__稀釋涂布平板法__(填“平板劃線法”或“稀釋涂布平板法”)，所用的培養(yǎng)基中的染料是__剛果紅__，該染料能與纖維素形成__紅色__復(fù)合物。圖中④過程挑選菌落的標(biāo)準(zhǔn)是__菌落周圍有透明圈__。 (3)常采用__高壓蒸汽滅菌__法對實驗中所用的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。 [解析]　(1)纖維素分解菌大多分布在富含纖維素的環(huán)境中，選擇培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源。選擇培養(yǎng)的目的是使那些能夠適應(yīng)選擇培養(yǎng)基中的營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖。(2)將樣品用稀釋涂布平板法接種到鑒別培養(yǎng)基上。剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，挑選菌落時應(yīng)選那些周圍有透明圈的菌落。(3)對培養(yǎng)基常采用的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法。 11．(2017山東濟(jì)寧檢測)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉嗜熱菌樣品中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示： (1)進(jìn)行①過程的目的是__稀釋__，②過程所使用的接種方法是__稀釋涂布平板__法。 (2)從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基屬于__選擇__培養(yǎng)基，配制時僅以__淀粉__作為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應(yīng)加入__瓊脂__作為凝固劑。 (3)Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是__先調(diào)節(jié)pH，后滅菌__。一般對配制的培養(yǎng)基采用__高壓蒸汽滅菌__法滅菌。 (4)培養(yǎng)一段時間后，應(yīng)從Ⅰ號培養(yǎng)基上挑出__透明圈大__的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上。 [解析]　(1)分析題圖可知，①過程是梯度稀釋，目的是對樣品進(jìn)行稀釋；②過程是用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。(2)本題實驗的目的是篩選高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱菌，從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，本培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應(yīng)加入瓊脂作為凝固劑。(3)培養(yǎng)基配制和滅菌時應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，然后再進(jìn)行滅菌，如果先滅菌再凋節(jié)pH，在調(diào)節(jié)pH時會污染培養(yǎng)基；一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。(4)能分解淀粉的嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時可釋放淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，透明圈越大淀粉酶的活性越強(qiáng)，所以要從Ⅰ號培養(yǎng)基上挑出透明圈大的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上。 12．牛奶是微生物培養(yǎng)的良好培養(yǎng)基，牛奶在飲前都要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物，為檢測消毒前后牛奶中細(xì)菌含量變化情況，做如圖所示操作。用無菌吸管從錐形瓶中吸取1 mL生牛奶稀釋液至盛有9 mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復(fù)2次。請回答下列有關(guān)問題： (1)巴氏消毒的方法是__70～75_℃煮30分鐘(80_℃煮15分鐘)__，使用這種方法對生鮮牛奶進(jìn)行消毒的好處是__牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞__。 (2)取最終的牛奶稀釋液0.1mL滴在培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布，應(yīng)選擇的涂布工具是圖中的__B__。 (3)圖中所示方法為稀釋培養(yǎng)法，理想情況下，培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落。若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為35個、33個、34個，則可以推測生牛奶中每毫升含細(xì)菌數(shù)為__3.4106__個，運(yùn)用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值__偏小__(填“偏大”或“偏小”)，原因是__個別菌落可能是由2個或多個細(xì)菌形成的__。 (4)消毒后的牛奶中絕大部分細(xì)菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測消毒后的牛奶中細(xì)菌的數(shù)量，則在操作步驟上應(yīng)做什么改動？__稀釋次數(shù)減少__。 (5)從生牛奶取樣培養(yǎng)得到的菌落中，混有各種雜菌，從中檢測出大腸桿菌的方法是在培養(yǎng)基中加入__伊紅美藍(lán)(金屬光澤的紫)__，菌落具有__黑色__特征的可以認(rèn)定為大腸桿菌。