2019年高中生物 血紅蛋白的提取和分離雙基限時(shí)練 新人教版選修1.doc

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2019年高中生物 血紅蛋白的提取和分離雙基限時(shí)練 新人教版選修1一、選擇題1凝膠色譜法所用的凝膠的化學(xué)本質(zhì)大多是()A糖類(lèi)化合物B脂質(zhì)C蛋白質(zhì) D核酸解析在用于蛋白質(zhì)分離的凝膠色譜法中所用凝膠是一些微小的多孔球體，它們多是由多糖類(lèi)化合物構(gòu)成的。答案A2分離血紅蛋白溶液時(shí)，離心后試管的溶液分四層，血紅蛋白在第_層()A一 B二C三 D四解析分離血紅蛋白溶液時(shí)，離心后可明顯觀察到試管中液體分四層，從上向下數(shù)依次為：無(wú)色透明的甲苯層，白色薄層固體(脂溶性物質(zhì)的沉淀層)、紅色透明液體(血紅蛋白水溶液)、暗紅色沉淀物(其他雜質(zhì))，故血紅蛋白分布于第三層。答案C3_的蛋白質(zhì)能進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道()A相對(duì)分子質(zhì)量大的 B吸附性高的C相對(duì)分子質(zhì)量小的 D溶解度低的解析由多糖類(lèi)化合物構(gòu)成的凝膠是微小的多孔球體，球體內(nèi)有許多貫穿的通道，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)易進(jìn)入通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度慢。答案C4下列試劑可用于血紅蛋白釋放的是()0.9%的生理鹽水甲苯磷酸緩沖液蒸餾水檸檬酸鈉A BC D解析甲苯作用為溶解，脂類(lèi)物質(zhì)，也有利于紅細(xì)胞破裂和血紅蛋白的釋放，蒸餾水作用是使紅細(xì)胞吸水漲破。答案A5洗滌紅細(xì)胞時(shí)，離心所采用的方法是()A低速長(zhǎng)時(shí)間離心 B低速短時(shí)間離心C高速長(zhǎng)時(shí)間離心 D高速短時(shí)間離心解析洗滌紅細(xì)胞時(shí)，轉(zhuǎn)速要低，時(shí)間要短，否則白細(xì)胞會(huì)與之一起沉淀，達(dá)不到分離目的。答案B6下列各項(xiàng)中，一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是()A層析柱高 B層析柱的直徑C緩沖溶液 D樣品的分布解析分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱必須有適宜的高度，分離度與柱高相關(guān)。樣品的分布也影響分離度，緩沖溶液的pH影響蛋白質(zhì)所帶的電荷，因此也影響分離度。只有層析柱的直徑一般不會(huì)影響分離度。答案B7在蛋白質(zhì)的提取和分離中，關(guān)于對(duì)樣品處理過(guò)程中，分析無(wú)誤的是()A洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽B洗滌時(shí)離心速度過(guò)小，時(shí)間過(guò)短，白細(xì)胞等會(huì)沉淀，達(dá)不到分離的效果C洗滌過(guò)程選用0.1%的生理鹽水D透析的目的是去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)解析洗滌紅細(xì)胞目的是使血漿中血漿蛋白、白細(xì)胞等與紅細(xì)胞分離，如果洗滌次數(shù)過(guò)少，無(wú)法除去血漿蛋白，如離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)使白細(xì)胞等一同沉淀，達(dá)不到分離的效果，洗滌時(shí)選用0.9%的生理鹽水。答案D8蛋白質(zhì)的提取和分離分為哪幾步()A樣品處理，凝膠色譜操作、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳B樣品處理、凝膠色譜操作、純化C樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定D樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定解析蛋白質(zhì)的提取和分離分為樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定四步。A中凝膠色譜操作及SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳為實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中的技術(shù)。答案C9SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入SDS的作用是()A增大蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量B改變蛋白質(zhì)的形狀C掩蓋不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別D減少蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量解析SDS的作用是使蛋白質(zhì)完全變性，SDS所帶負(fù)電荷量大大超過(guò)蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋不同種類(lèi)蛋白質(zhì)間電荷差別。答案C10在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()A防止血紅蛋白被氧化B血紅蛋白是一種兩性物質(zhì)，需要酸中和C磷酸緩沖液會(huì)加速血紅蛋白的提取過(guò)程D讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能解析利用磷酸緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)pH環(huán)境，保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能，便于分離觀察和研究。答案D11使用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，洗滌紅細(xì)胞、釋放血紅蛋白和透析過(guò)程中，分別使用下列哪些試劑()蒸餾水生理鹽水20 mmol/L的磷酸緩沖液清水檸檬酸鈉A BC D解析在分離蛋白質(zhì)時(shí)，用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞，以去除雜蛋白，然后將其加入蒸餾水中使紅細(xì)胞破裂，釋放血紅蛋白，透析需用磷酸緩沖液，以維持pH穩(wěn)定。答案C12關(guān)于血紅蛋白分子組成的敘述正確的是()A兩條肽鏈、兩條肽鏈、一個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán)B一條肽鏈、三條肽鏈、四個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán)C兩條肽鏈、兩條肽鏈、四個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán)D兩條肽鏈、兩條肽鏈、兩個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán)解析血紅蛋白由四條肽鏈組成，包括兩條肽鏈和兩條肽鏈，其中每條肽鏈環(huán)繞一個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán)，共四個(gè)。答案C13下面說(shuō)法不正確的是()A在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液pH的影響，維持pH基本不變B緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成C電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程D透析袋能使大分子自由進(jìn)出，而將小分子保留在袋內(nèi)解析透析袋一般是用硝酸纖維素(又叫玻璃紙)制成的。透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)。透析可以除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，或用于更換樣品的緩沖液。答案D14下列關(guān)于凝膠色譜法的正確認(rèn)識(shí)是()A凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體，這些多孔球體是由脂類(lèi)化合物構(gòu)成的B蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的移動(dòng)速度快，先分離出來(lái)C在色譜柱中裝填凝膠的時(shí)候要盡量緊密，以降低凝膠顆粒之間的空隙D蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的移動(dòng)速度慢，后分離出來(lái)解析凝膠多為多糖類(lèi)物質(zhì)，蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量小的所經(jīng)路程遠(yuǎn)，移動(dòng)速度慢，分離出來(lái)晚。答案C15已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子，其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示，下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是()A將樣品裝入透析袋中透析12小時(shí)，若分子乙保留在袋內(nèi)，則分子丙也保留在袋內(nèi)B若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，則分子甲移動(dòng)速度最快C若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min，分子戊存在于沉淀中，則分子甲也存在于沉淀中D若用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子，則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)解析由圖可排列出分子質(zhì)量由大到小依次為：丙丁乙戊甲，透析法可除去樣品中分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，若分子乙保留在袋內(nèi)，則丙和丁也在袋內(nèi)，A項(xiàng)正確；凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，分子質(zhì)量越大的分離越快，則丙的移動(dòng)速度最快，B項(xiàng)錯(cuò)；如果戊存在于沉淀中，則丙、丁、乙也在沉淀中，甲不能確定，C項(xiàng)錯(cuò)；“SDS”電泳過(guò)程中只和蛋白質(zhì)的分子量大小有關(guān)，而與所帶電荷無(wú)關(guān)，而分子量相差最遠(yuǎn)的是甲與丙，D項(xiàng)錯(cuò)。答案A二、非選擇題16某生物興趣小組在學(xué)習(xí)完“蛋白質(zhì)的提取和分離”后，聯(lián)系相關(guān)實(shí)驗(yàn)，準(zhǔn)備從豬肝研磨液中初步提取過(guò)氧化氫酶，設(shè)計(jì)的“過(guò)氧化氫酶提取、分離流程圖”如下：試回答下列有關(guān)問(wèn)題：(1)向肝細(xì)胞懸液中加入一定量pH7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢瑁梢云扑楦渭?xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是_。與使用蒸餾水相比，使用緩沖液的優(yōu)點(diǎn)是_。(2)蛋白質(zhì)粗分離階段透析的目的是_。(3)電泳利用了待分離樣品中各種分子的_等的差異，而產(chǎn)生不同的遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。(4)實(shí)驗(yàn)小組以3%過(guò)氧化氫溶液和獲得的過(guò)氧化氫酶為材料進(jìn)行溫度對(duì)酶催化活性影響的探究，得到下圖所示結(jié)果。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出“過(guò)氧化氫酶能耐受100 高溫”的結(jié)論，請(qǐng)問(wèn)這一結(jié)論是否可靠？為什么？_。解析破碎細(xì)胞方法為使細(xì)胞吸水漲破，所應(yīng)用原理為滲透作用，為了保證所提取H2O2酶活性，要保證液體pH等條件穩(wěn)定，故此應(yīng)加入緩沖液而不用蒸餾水。蛋白質(zhì)分離時(shí)透析的目的是除去小的雜質(zhì)，在研究溫度對(duì)酶的活性的影響時(shí)，一般不用H2O2酶對(duì)H2O2的分解作用，因?yàn)闇囟缺旧韺?duì)H2O2分解有影響。答案(1)滲透原理可以保證酶溶液pH基本穩(wěn)定，避免因pH變化影響H2O2酶活性(2)除去小分子化合物(雜質(zhì))(3)帶電性質(zhì)、分子大小、形狀(答對(duì)兩項(xiàng)得分)(4)不可靠，高溫也能促使過(guò)氧化氫分解17紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白，血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：(1)樣品處理，它包括_、_、收集血紅蛋白溶液。(2)收集的血紅蛋白溶液在透析袋中經(jīng)過(guò)透析，這就是樣品的粗分離。透析的目的是_。透析的原理是_ _。(3)通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是_。解析樣品的處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液。透析的目的是除去相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)；應(yīng)用的原理是半透膜的選擇透過(guò)性，具體說(shuō)就是小分子能自由出入，大分子保留在袋中。純化的目的是將分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去。答案(1)紅細(xì)胞的洗滌血紅蛋白的釋放(2)去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在透析袋內(nèi)(3)通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去18測(cè)定蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量是研究蛋白的一項(xiàng)重要技術(shù)，常用凝膠(由多孔性網(wǎng)狀物質(zhì)構(gòu)成的顆粒，其孔能讓小分子物質(zhì)進(jìn)出)過(guò)濾法測(cè)定，即在一根垂直的玻璃柱中裝滿(mǎn)凝膠，然后在其上端加入蛋白混合液并用緩沖液進(jìn)行洗脫。根據(jù)各種蛋白質(zhì)洗脫的先后順序可以比較它們的相對(duì)分子質(zhì)量大小。利用下列材料，鑒定樣品液(含有A、B兩種相對(duì)分子質(zhì)量大小不同的蛋白質(zhì))中蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小。材料用具：支架臺(tái)、符合要求的凝膠柱、吸管、緩沖液洗脫瓶、帶有開(kāi)關(guān)的玻璃導(dǎo)管、橡膠軟管、夾子、試管若干、足量的緩沖液等。(1)實(shí)驗(yàn)步驟：加樣前先_ _；加樣：_ _；洗脫：_ _；收集并檢測(cè)它們洗脫的先后順序。(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論：_。(3)請(qǐng)用坐標(biāo)圖表示出不同蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量大小與洗脫液體積的關(guān)系。解析凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，在凝膠外部移動(dòng)，速度快、路程短；而相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)，擴(kuò)散進(jìn)入凝膠內(nèi)部而被滯留，需要更多的緩沖液將它們洗脫出來(lái)，這樣相對(duì)分子質(zhì)量不同的分子得以分離，這是凝膠色譜法的實(shí)驗(yàn)原理。加樣前，應(yīng)先使凝膠柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊；加樣時(shí)，注意不要破壞凝膠面，緩沖液洗脫前，應(yīng)先使樣品滲入凝膠床，加緩沖液洗脫。根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理，誰(shuí)先洗脫出來(lái)，誰(shuí)的相對(duì)分子質(zhì)量大，洗脫液消耗少；反之洗脫液消耗多。答案(1)將凝膠柱垂直固定在支架臺(tái)上，打開(kāi)色譜柱下端的流出口，使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊，關(guān)閉出口用吸管小心將1 mL含有A、B兩種蛋白質(zhì)的混合樣液加到色譜柱頂端，注意不要破壞凝膠面；打開(kāi)下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)后關(guān)閉下端出口小心加入緩沖液到適當(dāng)高度，連接緩沖液洗脫瓶，打開(kāi)下端出口，用緩沖液進(jìn)行洗脫(2)經(jīng)過(guò)檢測(cè)若A先于B洗脫出來(lái)，則A的相對(duì)分子質(zhì)量大于B；若B先于A洗脫出來(lái)，則B的相對(duì)分子質(zhì)量大于A(3)19回答下列有關(guān)提取生物體內(nèi)物質(zhì)的問(wèn)題：(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成部分，其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有_功能。我們應(yīng)選用_的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入_。(2)甲裝置中，B是血紅蛋白溶液，則A是_；乙裝置中，C溶液的作用是_。(3)甲裝置用于_，目的是_。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫_，是根據(jù)_分離蛋白質(zhì)的有效方法。(4)最后經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行_。(5)圖丙為用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳的結(jié)果。根據(jù)結(jié)果，某同學(xué)得出：“提取的血紅蛋白有兩條肽鏈”的結(jié)論，這種說(shuō)法可靠嗎？并說(shuō)明理由_ _。解析(1)血紅蛋白可運(yùn)輸氧氣，以供給組織細(xì)胞利用。因哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核及其他細(xì)胞器，所以是提取血紅蛋白的良好實(shí)驗(yàn)材料。(2)在一定范圍內(nèi)，磷酸緩沖液可維持pH基本不變，從而保持血紅蛋白的活性正常。磷酸緩沖液還可洗脫血紅蛋白。(3)透析袋相當(dāng)于半透膜，可除去樣品中相對(duì)分子量較小的雜質(zhì)。(4)電泳利用樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，可進(jìn)行純度的鑒定。答案(1)運(yùn)輸哺乳動(dòng)物(豬、牛、羊)檸檬酸鈉(抗凝劑)(2)磷酸緩沖液洗脫血紅蛋白(洗脫)(3)透析(粗分離)去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)凝膠色譜法相對(duì)分子質(zhì)量的大小(4)純度鑒定(5)不可靠。只能得出提取的血紅蛋白含有兩種大小不同的肽鏈，不一定是兩條